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文档简介

页眉内容页眉内容页脚内容页脚内容13(2)常用技术包括1)核酸分子杂交技术，其方法主要有斑点印迹、Southern印迹、Northern印迹、原位杂交、等位基因特异寡核苷酸探针杂交；2)限制性内切酶酶谱分析法；DNA限制性片段长度多态性(RFLP)分析；PCR技术；DNA芯片；基因测序。PCR技术实际上是在模板DNA,引物和4种脱氧核糖核苷三磷酸存在的条件下依赖于耐热DNA聚合酶的酶促合成反应。其原理主要有几个方面DNA合成需要引物，两条互补链上都需要引物；DNA的复性与变性的原理；PCR技术的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性。耐高温的DNA聚合酶的发现和运用。PCR全过程包括三个基本步骤，即1)双链DNA模板加热变性成单链(变性)；2)在低温下引物与单链DNA互补配对(退火)；3)在适宜温度下DNA聚合酶催化引物3'-OH端加入脱氧核苷酸(延伸)。这三个基本步骤构成的循环重复进行，可以使特异性DNA的扩增率达到数百万倍。PCR技术的应用1）分子生物学领域基因克隆；DNA序列测定；突变分析；基因重组；基因定量；鉴定转录调控序列；转座子插入位点的确定；检测基因的修饰；2）临床医学领域病原体诊断；遗传病的基因诊断；器官移植；肿瘤诊断；法医学；3）动植物学的研究；4）其他领域如组织和群体生物学、古生物学等。辅助遗传病的临床诊断针对单基因病（包括少数肿瘤）的确诊及症状前诊断。疾病易感性及患病风险预测1）遗传病患病风险分析①出生缺陷的产前诊断分析胎儿的某些特定基因以诊断人类染色体病和单基因遗传病。②植入前遗传诊断（PGD）对配子或移入宫腔之前的胚胎进行快速的遗传学分析，筛选出健康配子或胚胎，以避免异常妊娠。③遗传筛查2）其他疾病如肿瘤以及常见多基因病，如I型和II型糖尿病、高血压、肥胖、和阿尔茨海默氏病（AD）的易感

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