执业药师考试-分光光度法

分光光度法第五章第一节紫外-可见分光光度法

根据物质对波长为200～760nm波长范围的光吸收特性所建立的一种定性、定量和结构分析的方法。

紫外-可见吸收光谱分子的价电子吸收了光的能量，由低能量的基态跃迁到高能量的激发态，在相应波长位置出现吸收带形成的光谱，称为紫外-可见吸收光谱一、根本原理〔一〕Lambert-Beer定律物质对单色光吸收特性与浓度、液层厚度关系定律

摩尔吸收系数ε百分吸收系数C=1mol/Ll=1cmC=1%(g/100ml)l=1cm二、紫外-可见分光光度计

1、光源紫外区氢灯或氘灯可见区钨灯或卤钨灯

2、单色器棱镜或光栅

3、吸收池石英或玻璃

4、检测器光电池、光电管、光电倍增管、光二极管阵列检测器紫外-可见分光光度计的校正 波长汞灯、氘灯、钬玻璃吸收度重铬酸钾的硫酸溶液杂散光碘化钠和亚硝酸钠溶液吸收池误差 三、紫外-可见吸收光谱与结构的关系〔一〕紫外-可见吸收光谱

以波长为横坐标，以吸收度为纵坐标所绘制的曲线特征参数〔1〕最大吸收波长〔max〕（2）最大吸收波长处的吸收系数〔3〕最小吸收波长〔min〕〔4〕末端吸收〔二〕电子跃迁与吸收带√四、吸收度的测定方法〔一〕对溶剂的要求A尽量小〔二〕空白对照试验清零〔三〕测定波长确证±2nm〔四〕供试液的浓度A=0.3~0.7〔五〕狭缝宽度五、应用〔一〕鉴别吸收光谱〔1〕结构完全相同的化合物应有完全相同的吸收光谱注意〔2〕吸收光谱完全相同的化合物不一定是同一个化合物*利用药物与杂质吸收光谱的明显差异，进行杂质检查〔二〕杂质检查中的应用*在一定波长处测定A，规定A〔三〕在含量测定中的应用1.对照品比较法2.吸收系数法3.计算分光光度法〔多组分的测定〕双波长分光光度法三波长分光光度法导数光谱法解联立方程法95：[121—125]受影响的物理常数A、吸收系数B、比旋度C、两者均可D、两者均不可121、受温度影响122、受光线波长影响123、受供试品浓度影响124、受时间影响125、受溶剂种类影响BCDDA95：138、紫外分光光度计应定期检查A、波长精度B、吸收度准确性C、狭缝宽度D、溶剂吸收E、杂散光97：76、某药物的摩尔吸收系数〔〕很大，那么表示A、光通过该物质溶液的光程长B、该物质溶液的浓度很大C、该物质对某波长的光吸收能力很强D、该物质对某波长的光透光率很高E、测定该物质的灵敏度低97：127、紫外分光光度法中，用对照品比较法测定药物含量时A、需药物的吸收系数B、供试品溶液和对照品溶液的浓度应接近C、供试品溶液和对照品溶液应在相同的条件下测定D、可以在任何波长处测定E、是中国药典规定的方法之一97：131、用紫外分光光度法鉴别药物时，常采用核对吸收波长的方法，影响本法试验结果的有A、仪器波长的准确度B、供试品溶液的浓度C、溶剂的种类D、吸收池的厚度E、供试品的纯度99：133、紫外分光光度计是由以下部件组成的A、氘灯B、光栅C、石英吸收池D、光电管E、真空热电偶01：78、含有某一发色团的药物，最大吸收波长为230nm，其跃迁类型为A、σ→σ*B、π→π*C、n→π*D、n→σ*E、以上跃迁类型都可能例1、摩尔吸收系数的表示符号是A、B、εC、αD、nE、Ka

例2、可见一紫外分光光度法测定的药物分子具有吸收特性的电磁波范围是A、10～400nmB、400～800nmC、800～400nmD、400m～1mE、200～760nm例3、分光光度法〔吸收光度法〕所依据的根本定律是A、Beer定律B、Lambert定律C、Nernst公式D、VanDeemter方程E、Beer-Lambert定律第二节荧光分析法一、根本原理荧光处于第一激发态的分子，跃迁回基态时发射的光称为荧光，其能量小于激发光，波长长于激发光；除去激发光源，荧光立即熄灭荧光为发射光。利用荧光的物理特性进行定性与定量测定的方法称为荧光分析法。

荧光法最主要的优点是测定灵敏度高，选择性好。荧光激发光谱〔激发光谱〕横坐标激发光波长纵坐标荧光强度荧光发射光谱〔荧光光谱〕横坐标荧光发射光波长纵坐标荧光强度定量测定原理当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件一定时，在较稀浓度范围内药物的荧光强度与溶液中该物质的浓度成正比二、荧光光度计1、光源汞灯或氙灯2、单色器滤光片或光栅〔两个〕[第二个位于激发光源垂直方向]3、吸收池低荧光玻璃或石英池[四面透明]4、检测器光电倍增管[在与激发光源垂直方向检测]五、应用1.鉴别2.含量测定对照品比较法95：72、在测量药物荧光强度时，要在与入射光成直角方向上进行测定，这是由于A、荧光的波长比入射光的波长长B、荧光强度比透射光强度小C、荧光强度比透射光强度大D、只在入射光成直角方向上才有荧光E、荧光是向多方向发射的，为了减少透射光影响96：74、荧光是指当用一定波长的紫外光或可见光照射某一物质时，此物质会在短时间内发射出A、波长较照射光波长为短的光B、波长较照射光波长为长的光C、波长与照射光波长相等的光D、波长较磷光波长为长的光E、波长与磷光波长相等的光00：77、光电荧光计中采用的第二块滤光片是为了A、获得一定的激发光波长B、获得一定的吸收光波长C、获得较纯的荧光D、滤去非平行光E、滤去荧光例、荧光分析法和紫外分光法的不同点A、测定药物特性B、原理C、光源和检测器的位置D、样品池E、单色器第三节红外分光光度法

红外吸收光谱是由分子的振动及转动能级的跃迁而引起的

将分子吸收红外光的情况用仪器记录下来，就是红外光谱图红外吸收光谱又称为分子的振-转光谱红外分光光度法是利用物质分子吸收波数在4000～400cm-1范围的红外光而产生的吸收光谱进行分析的方法，由分子的振动、转动能级跃迁引起一、根本原理纵坐标透光率〔T%〕横坐标波数或波长二、红外分光光度计1、光源硅碳棒、Nernst灯2、吸收池KBr岩盐窗池(液、气)片剂框〔KBr压片〕3、单色器光栅4、检测器真空热电偶高莱池〔Golay〕红外分光光度计的校正

以聚苯乙烯薄膜为测试样品，绘制其红外光谱图，对仪器进行校正，以确保测定波长的准确性和仪器的分辨率三、红外光谱与物质结构的关系分子中每个基团一般都有相应的吸收峰。药物分子的组成、结构、官能团不同时，其红外光谱也不同。药物的红外光谱能反映药物分子的结构特点，具有专属性强、准确度高的特点，是验证药物的有效方法。指纹区

1300～400cm-1密，高度敏感特征区4000～1300cm-1疏，易识别3750～3000

3300～3000

3000～2700

OH羟基

三CH炔基

CH

甲基

NH氨基＝CH苯环亚甲基次甲基

CHO

醛基2400～2100

1900～1650

1670～1500

C三C乙炔基C＝O

羰基C＝C苯环C三N腈基1300～1000

1000～650

C-O

醚＝CH

苯(单取代)酯四、应用〔一〕化合物的鉴别1、对照品法〔USP〕2、对照图谱法〔ChP〕用本法鉴别药物时，中国药典要求按指定条件绘制供试品的红外光吸收图谱，与?药品红外光谱集?中的相应标准图谱比照，如果峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一种药物阿司匹林羟基：O—H3300～2300

羰基：C＝O1760、1695

苯环：C＝C1610、1580

酯基：C—O1310、1190

邻位取代苯环：N—H750

盐酸普鲁卡因氨基：3315、32002585

N-H1645羰基：C=O1692苯环：C=C1604、1520酯基：C-O1271、1170、1115〔二〕药品的纯度检查用于药物中无效或低效晶型的检查如甲苯咪唑中A晶型的检查无味氯霉素中A晶型的检查〔三〕未知化合物的研究〔四〕含量测定仪器光源单色器吸收池检测器UV-Vis氘灯或氢灯,钨灯或卤钨灯棱镜或光栅石英玻璃光电管光电倍增管光二极管阵列检测器RF汞灯或氙灯滤光片光栅(两个)低荧光玻璃或石英池光电倍增管IR硅碳棒Nernst灯光栅KBr窗池KBr压片真空热电偶高莱池95：137、乙酰水杨酸与水杨酸的红外吸收光谱的主要区别是A、1610cm1

B、1460cm1

C、1755cm1

D、1420cm1

E、3230cm1

96：71、有一种含氮的药物，如用红外光谱判断它是否为腈类物质时，主要依据的谱带范围为A、3300～3000cm1

B、3000～2700cm1

C、2400～2100cm1

D、1900～1650cm1

E、1500～1300cm1

97：136、有一不饱和烃，如用红外光谱判断它是否为芳香烃，主要依据的谱带范围是A、3100～3000cm1B、3000～2700cm1

C、1950～1650cm1

D、1670～1500cm1

E、1000～650cm198：72、红外光谱图中1650～1900cm1

处具有强吸收峰的基团是A、甲基B、羰基C、羟基D、氰基E、苯环00：[116～120]A．紫外可见光谱