2023年安徽省安庆市怀宁二中高考压轴卷生物试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．现有纯种果蝇品系①～④，其中品系①的性状均为显性，品系②～④均只有一种性状是隐性，其他性状均为显性。这四个品系的隐性性状及控制该隐性性状的基因所在的染色体如下表所示：品系①②③④隐性性状残翅黑身紫红眼基因所在的染色体Ⅱ、ⅢⅡⅡⅢ若需验证自由组合定律，可选择交配的品系组合为A．①×④ B．①×② C．②×③ D．②×④2．果蝇的灰身（A）对黑身（a）为显性，且基因A/a位于常染色体上。现有甲、乙两试管果蝇，甲试管的果蝇全为灰身，乙试管的果蝇有灰身和黑身，甲、乙试管中的果蝇具有连续的亲子代关系，但是不知道谁是亲代，谁是子代。下列条件可以作为乙试管的果蝇为亲代，甲试管的果蝇为子代的判断依据的是（）①甲试管的灰身果蝇有纯合子和杂合子②乙试管的灰身果蝇全部为纯合子③乙试管的黑身果蝇全为雌性或全为雄性④乙试管的灰身果蝇既有雌性也有雄性A．①③ B．②③ C．①④ D．②④3．关于叶绿体中叶绿素和类胡萝卜素共性的叙述，错误的是（）A．合成都不需要光 B．都分布在类囊体薄膜上C．都能吸收和传递光能 D．都易溶于有机溶剂4．下列有关细胞生命历程的叙述，错误的是（）A．玉米种子发育成植株体现出胚细胞具有全能性B．有一类基因在所有分化的细胞中都会表达C．细胞癌变可能是细胞凋亡机制被破坏D．衰老细胞的核体积不断增大，核膜向内折叠5．与静坐状态相比，人体剧烈运动时，通常情况下会出现的是（）A．细胞呼吸产生的CO2与消耗的O2比值更大B．ATP分解速率更大，合成速率更小C．糖原分解速率更大，合成速率更小D．产热速率更大，散热速率更小6．公羊基因型AA、Aa表现为有角，aa表现为无角；母羊基因型AA表现为有角，Aa、aa表现为无角。两只羊繁殖多次，子代数量足够多，子代中有角：无角=3：1，有关叙述不正确的是（）A．子代无角基因型可能是AaB．子代无角基因型可能是aaC．可能是父本有角，母本无角D．亲本可能都有角二、综合题：本大题共4小题7．（9分）乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)基因的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。(1)培育双转基因奶牛涉及的生物技术有_______________________________________________(至少2项)。(2)牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时________的选择有关。据图可知，干扰素基因与____________基因可同时转录，基因工程过程中主要的工具酶有________________。(3)将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用________将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的________。(4)研究者利用________________技术筛选出____________(填“牛乳铁蛋白肽”或“干扰素”)基因成功表达的胚胎进行移植。8．（10分）某稻田生态系统中，放养的雏鸭可吃掉稻田里的杂草和害虫，同时雏鸭不间断活动产生的中耕浑水效果可以刺激水稻生长。稻秆可以培育蘑菇，生产沼气，鸭粪、沼渣等可以肥田。回答下列问题：（1）该生态系统中的生产者是______。鸭与害虫、杂草的关系是______。（2）如图表示同一块稻田用不同防治手段处理后，有害生物密度与防治成本或作物价值的关系。图中曲线______（填“Ⅰ”或“Ⅱ”）表示作物价值。若将有害生物密度分别控制在n、4n、7n三点，则在______点时收益最大。（3）农业生产上将蘑菇房与蔬菜大棚相通可提高蔬菜产量，原因是______。（4）从生态系统主要功能和生态环境保护的角度分析，科学规划和设计农业生态系统的主要目的是______。9．（10分）艾滋病药物能治疗新型冠状病毒肺炎吗?国家卫健委新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)中提供了用于一般治疗的抗病毒药物，其中洛匹那韦/利托那韦是原本用于艾滋病治疗的药物。为什么治疗艾滋病的药物能治疗新型冠状病毒引起的肺炎?HIV病毒和新型冠状病毒都具有包膜，包膜上有侵染宿主细胞所必需的蛋白质，其中，新型冠状病毒包膜上的S蛋白能识别并结合呼吸道上皮细胞表面的受体血管紧张素转化酶2(ACE2)，HIV病毒包膜上的gp120在宿主细地T细胞表面的受体则是C04蛋白。HIV病毒和新型冠状病毒的遗传物质均为RNA，但两种病毒进入宿主细胞后所经历的生化历程不尽相同。HIV病毒侵入宿主细胞后经过逆转录—整合—转录—翻译—装配的过程，最终出芽释放。其中，翻译时会先表达出一个多聚蛋白，该多聚蛋白在一种HIV蛋白酶的催化下被剪切成多个有功能的蛋白质。而新型冠状病毒侵入宿主细胞后，其RNA可以直接作为模板进行翻译，翻译时产生的多聚蛋白也需要在其自身蛋白酶的催化下进行剪切以形成RNA复制酶等有功能的蛋白质。随后，新型冠状病毒RNA在RNA复制酶的催化下进行复制，与转录、翻译所得的其他成分装配后释放。洛匹那韦/利托那韦的作用对象正是这种HIV蛋白酶。它们与HIV蛋白酶的活性中心结合进而抑制其活性。冠状病毒切割多聚蛋白的主要蛋白酶是3CLPro，研究者通过分子动力学模拟的方法发现洛匹那韦/利托那韦能与SARS病毒的3CLPro活性中心结合。而SARS病毒和新型冠状病毒的3CLPro蛋白氨基酸序列一致性达96%。此前洛匹那韦/利托那韦在SARS治疗中也表现出一定的有效性，但在新型冠状病毒肺炎中使用洛匹那韦/利托那韦仍需谨慎乐观，其疗效和疗效仍需更多的实验研究和临床数据支持。（1）根据HIV病毒和新型冠状病毒的结构可判断它们都可以在吸附后通过____方式进入宿主细胞，但两种病毒侵染的宿主细胞不同，原因是________________。（2）尽管HIV病毒和新型冠状病毒在进入宿主细胞后的生化过程差异很大，但其中却有一个共同之处，即___________________________。（3）洛匹那韦/利托那韦可能通过_________治疗新型冠状病毒肺炎，但治疗艾滋病的药物用于治疗新型冠状病毒肺炎具有局限性，体现在________。（4）治疗艾滋病还有其他几种药物，如AZT和雷特格韦，它们作用的对象分别是HIV的逆转录酶和整合酶，请问AZT和雷特格韦能否用于治疗新型冠状病毒肺炎，理由是________。（5）根据文中信息，新型冠状病毒治疗药物还有哪些其他可能的研发思路?请写出一种____。10．（10分）甜味蛋白Brazzein是从一种西非热带植物的果实中分离得到的一种相对分子质量较小的蛋白质，它含有54个氨基酸，是目前最好的糖类替代品。迄今为止，已己发现Brazzein基因在数种细菌、真菌和高等植物、动物细胞中都能表达。请回答下列问题：（1）Brazzein基因除了可从原产植物中分离得到外，还可以通过__________的方法获得，此方法在基因比较小，且__________已知的情况下较为适用。（2）将Brazzein基因导入细菌、真菌和高等植物细胞时都可使用的常用载体是__________，构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，其目的是__________________________________________________，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体中，除了目的基因外，还必须有____________________、复制原点等。（3）若受体胞是大肠杆菌，可先用Ca2+处理细胞使其______________，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与大肠杆菌混合；若受体是双子叶植物，则常采用的方法是_____________。若受体是哺乳动物，则可将Brazzein基因与________的启动子等调控组件重组在一起，以便从乳汁中获得大量的Brazzein蛋白。11．（15分）Hedgehog基因（H）广泛存在于无脊椎动物和脊椎动物中，在胚胎发育中起重要作用。我国科研工作者利用基因敲除和核酸分子杂交技术研究了H基因在文昌鱼胚胎发育中的作用。（1）在脊椎动物各个不同类群中，H基因的序列高度相似。H基因高度保守，是由于该基因的突变类型在_________中被淘汰。（2）研究者使用了两种TALE蛋白对文昌鱼的H基因进行敲除。TALE蛋白的结构是人工设计的，蛋白质的中央区能够结合H基因上特定的序列，F区则能在该序列处将DNA双链切开，如下图所示。①根据TALE蛋白的功能设计出其氨基酸序列，再根据氨基酸序列对应的mRNA序列推测出编码TALE蛋白的DNA序列，人工合成DNA序列之后再以其为模板进行______________生成mRNA。②将两种mRNA用________法导入文昌鱼的卵细胞中，然后滴加精液使卵受精。此受精卵发育成的个体为F0代。③F0代个体细胞内被两种TALE蛋白处理过的DNA重新连接后，H基因很可能因发生碱基对的_______而丧失功能，基因丧失功能则被称为“敲除”。（3）提取F0代胚胎细胞DNA，克隆H基因，用BsrGⅠ进行切割，电泳后用放射性同位素标记的H基因片段为探针进行___________，实验结果如图2所示。图中样品_________代表的F0个体中部分H基因已被敲除。（4）将F0代与野生型鱼杂交，再从F1代鱼中筛选出某些个体相互交配，在F2代幼体发育至神经胚期时进行观察和计数，结果如下表所示。F2中正常幼体数F2中畸形（无口和鳃，尾部弯曲）幼体数第一组10129第二组10633第三组9831根据杂交实验结果可知，F1代鱼中筛选出的个体均为__________（杂合子/纯合子），H基因的遗传符合_______定律。随着幼体继续发育，进一步检测到的各组中正常个体数与畸形个体数的比例将会_______。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【答案解析】

验证决定两对相对性状的基因是否位于两对同源染色体上，要用基因的自由组合定律；基因自由组合定律的实质是等位基因彼此分离的同时非同源染色体上的非等位基因自由组合；根据题意和图表分析可知：果蝇品系中只有品系①的性状均为显性，品系②～④均只有一种性状是隐性，其他性状均为显性；又控制翅形和体色的基因都位于Ⅱ号染色体上，控制眼色的基因位于Ⅲ号染色体上，所以选择位于两对染色体上的基因来验证基因的自由组合定律。【题目详解】A.①个体所有基因都是显性纯合的，④个体只有控制紫红眼的基因是隐性的，所以两个体杂交只产生一对基因杂合，只能验证基因的分离定律，不能验证基因的自由组合定律，A错误；B.①个体所有基因都是显性纯合的，②个体只有控制残翅的基因是隐性的，所以两个体杂交只产生一对基因杂合，只能验证基因的分离定律，不能验证基因的自由组合定律，B错误；C.②和③分别含有残翅和黑身的隐性基因，但是控制这两种性状的基因都都在Ⅱ号染色体上，不能验证基因的自由组合定律，C错误；D.要验证自由组合定律，必须两对或多对相对性状是在非同源染色体上，不能在同源染色体上；②和④分别含有残翅和紫红眼的隐性基因，且控制这两种性状的两基因分别在Ⅱ、Ⅲ号染色体上，杂交后两对基因都是杂合的，减数分裂过程中这两对等位基因分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合，D正确；故选D。2、B【答案解析】

果蝇的灰身（A）对黑身（a）为显性，且基因A/a位于常染色体上。如果乙试管的果蝇为亲代，甲试管的果蝇为子代，甲试管的果蝇全为灰身，乙试管的果蝇有灰身和黑身，则乙试管都为纯合子，乙试管的黑身果蝇只有一种性别，就此答题。【题目详解】①、若甲试管中的灰身果蝇既有纯合子也有杂合子，即存在、和的交配类型，后代有黑身和灰身，甲可能是乙的亲本，①错误；②③、若乙为甲的亲本，乙中黑身果蝇只能有一种性别，否则黑身雌雄果蝇自交，后代都为黑身；若乙试管中的灰身果蝇全部为纯合子，乙试管的黑身果蝇只有一种性别，此时若甲为乙的亲本，则甲要产生黑身子代必然存在的交配，后代灰身果蝇存在杂合子，与假设矛盾；若乙为甲的亲本，乙的灰身果蝇基因型全部为AA，后代全为灰身，②③符合题意；④、若乙试管的灰身果蝇有雌性和雄性，该灰身果蝇可能为甲的子代，④错误。综上所述，②③符合题意。故选B。3、A【答案解析】

叶绿体中的色素主要有叶绿素和类胡萝卜素，叶绿素又分为叶绿素a和叶绿素b，类胡萝卜素又分为胡萝卜素和叶黄素。光合作用中叶绿素主要吸收红光和蓝紫光；类胡萝卜素主要吸收蓝紫光。【题目详解】A、叶绿素的合成需要光照，类胡萝卜素的合成有光、无光均可进行，A错误；B、叶绿体中光合色素都分布在类囊体薄膜上，B正确；C、两种色素都能吸收和传递光能，C正确；D、叶绿体中的光合色素都易溶于有机溶剂，D正确。故选A。【答案点睛】本题考查光合色素的合成、分布和作用，要求考生掌握叶绿体中色素的种类、分布和功能，能结合所学的知识准确判断各选项。4、A【答案解析】

细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常的生命历程，对生物体是有利的。全能性是指个体某个器官或组织已经分化的细胞在适宜的条件下再生成完整个体的遗传潜力。【题目详解】A、玉米种子已经是幼体（有胚芽、胚轴、胚根等），发育成植株不能体现胚细胞具有全能性，A错误；B、有一类基因在所有分化的细胞中都会表达，如呼吸酶基因，B正确；C、细胞癌变可能是细胞凋亡机制被破坏，癌变的细胞无限增殖，不能发生正常凋亡，C正确；D、衰老细胞的核体积不断增大，核膜向内折叠，许多酶活性降低，D正确。故选A。5、C【答案解析】

人体细胞有氧呼吸的反应式是：6O2+C6H12O6+6H2O6CO2+12H2O+能量，无氧呼吸的反应式为：C6H12O62C3H6O3+能量。【题目详解】A、人体只能通过有氧呼吸产生二氧化碳，故细胞呼吸产生的CO2与消耗的O2比值等于1，A错误；B、人体剧烈运动时耗能多，产生的能量也多，故ATP分解速率和合成速率都更大，B错误；C、剧烈运动时消耗的葡萄糖增加，为补充血糖，糖原分解速率增大，合成速率减小，C正确；D、为维持体温恒定，产热速率和散热速率都增大，D错误。故选C。6、B【答案解析】

根据题意：AA为有角、aa为无角、Aa的公羊为有角而Aa的母羊为无角，说明羊的有角和无角为从性遗传，在表现型上受个体性别的影响，但其遗传遵循基因的分离定律。两只羊繁殖多次，子代数量足够多，子代中有角∶无角=3∶1，说明亲本两只羊的基因型最可能是AA×Aa，AA可以是公羊也可能是母羊，基因型为Aa的羊可能是母羊或者公羊。【题目详解】根据题干信息，两只羊繁殖多次，子代数量足够多，子代中有角∶无角=3∶1，说明亲本两只羊的基因型最可能是AA×Aa，子代基因型为AA∶Aa=1∶1，因为是常染色体遗传，后代性别比例为1∶1。其中基因型为AA的羊均为有角，基因型为Aa的羊雌雄各一半，母羊为无角，公羊为有角，后代有角∶无角=（1+1/2）∶1/2=3∶1，所以子代不会有aa个体，B错误。故选B。【答案点睛】本题考查了分离定律的相关知识，意在考查考生的分析能力和推理能力，要求学生能够从题干信息中进行假设，然后利用基因的分离定律进行解释。二、综合题：本大题共4小题7、基因工程、动物细胞培养、核移植、胚胎移植启动子新霉素抗性限制酶、DNA连接酶胰蛋白酶全能性抗原—抗体杂交干扰素【答案解析】

1、基因表达载体的构建：①过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。据图分析，图1为基因表达载体，含有复制原点、启动子、终止子、目的基因（牛乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因）、标记基因。图2为转基因奶牛的培育过程，该过程利用了动物细胞培养技术、转基因技术、核移植技术、胚胎移植技术等。【题目详解】（1）识图分析可知，图2为转基因奶牛的培育过程，该过程利用了动物细胞培养技术、转基因技术、核移植技术、胚胎移植技术等。（2）基因表达载体含有复制原点、启动子、终止子、目的基因和标记基因，启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时启动子的选择有关。据图可知，干扰素基因与新霉素抗性基因可同时转录，基因工程过程中主要的工具酶有限制酶和DNA连接酶。（3）将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要用去核的卵母细胞的细胞质诱导，以实现动物细胞核的全能性。（4）研究者利用抗原-抗体杂交技术筛选出干扰素成功表达的胚胎进行移植。【答案点睛】本题考查基因工程和细胞工程的知识点，要求学生掌握基因工程的操作工具和基因工程中基因表达载体的构建和组成，识记目的基因的检测和鉴定方法，掌握核移植技术的操作过程和原理，利用所学的知识点的综合性分析解决问题是该题的重点；要求学生能够正确识图分析获取有效信息，结合所学的基因工程和细胞工程中核移植过程解决问题。8、水稻、杂草捕食Ⅱ4n蘑菇呼吸产生的二氧化碳可以供蔬菜进行光合作用，使其光合作用增强。实现生态系统内能量的多级利用和物质的循环再生，提高农产品的产量；减少环境污染。（或合理地调整生态系统中的能量流动关系，提高能量利用率；减少环境污染）【答案解析】

生态系统的成分包括非生物的物质和能量、生产者、消费者、分解者，其中主要成分是生产者；生态农业的意义是实现对能量的多级利用，从而大大提高能量的利用率，减少环境污染。【题目详解】（1）该生态系统中的生产者是水稻、杂草。鸭捕食害虫、杂草，故鸭与害虫、杂草的关系是捕食。（2）经控制后的生物密度越小，防治成本越高，作物价值越大；反之，经控制后的生物密度越大，防治成本越小，作物价值越小，作物的价值与防治的成本差值为收益，因此曲线Ⅰ表示防治成本，曲线Ⅱ表示作物价值。种群密度为4n时，作物价值与防治成本的差值最大，收益最大。（3）蘑菇属于异养生物，蔬菜为自养生物，蘑菇呼吸产生的二氧化碳可以供蔬菜进行光合作用，使其光合作用增强，所以农业生产上将蘑菇房与蔬菜大棚相通可提高蔬菜产量。（4）科学规划和设计农业生态系统的主要目的是实现生态系统内能量的多级利用和物质的循环再生，提高农产品的产量；减少环境污染。【答案点睛】本题主要考查生态系统的结构、害虫的防治和生态农业的优点，意在考查考生能理解所学知识要点和图文转化能力。9、胞吞（膜融合）两种病毒表面的配体蛋白不同，特异性结合的宿主细胞表面受体蛋白也不同，因此侵染的宿主细胞不同在翻译时均先表达出多聚蛋白，然后通过蛋白酶催化剪切多聚蛋白获得多个功能蛋白抑制新型冠状病毒的3CLPro蛋白酶活性这两种药物并不是为新型冠状病毒的3CLPro量身定做的抑制剂。在亲和力和特异性上肯定不是最佳不能，因为新型冠状病毒不是逆转录病毒，不具有逆转录酶和整合酶言之有理即可【答案解析】

根据题干信息分析，HIV病毒和新型冠状病毒都具有包膜，包膜上有侵染宿主细胞所必需的蛋白质，其中新型冠状病毒包膜上的S蛋白能识别并结合呼吸道上皮细胞表面的受体血管紧张素转化酶2(ACE2)，HIV病毒包膜上的gp120在宿主的T细胞表面的受体则是C04蛋白。两种病毒都是RNA病毒，遗传物质都是RNA，但是遗传信息的传递途径不同，HIV病毒是逆转录病毒，期侵入宿主细胞后发生逆转录、转录、翻译的过程，而新型冠状病毒侵入宿主细胞后，其RNA可以直接作为模板进行翻译，也可以自我复制。【题目详解】（1）两种病毒的主要成分中的蛋白质和RNA都属于生物大分子，因此两种病毒进入宿主细胞的方式都是胞吞；由于两种病毒表面的配体蛋白不同，特异性结合的宿主细胞表面受体蛋白也不同，因此侵染的宿主细胞不同。（2）根据题干信息分析可知，两种病毒进入宿主细胞的相同之处是在翻译时均先表达出多聚蛋白，然后通过蛋白酶催化剪切多聚蛋白获得多个功能蛋白。（3）根据题意分析，洛匹那韦和利托那韦能与SARS病毒的3CLPro活性中心结合，即通过抑制新型冠状病毒的3CLPro蛋白酶活性治疗新型冠状病毒肺炎，但是这两种药物并不是为新型冠状病毒的3CLPro量身定做的抑制剂，在亲和力和特异性上肯定不是最佳。（4）已知AZT和雷特格韦作用的对象分别是HIV的逆转录酶和整合酶，而新型冠状病毒不是逆转录病毒，不具有逆转录酶和整合酶，因此AZT和雷特格韦不能用于治疗新型冠状病毒肺炎。（5）根据题干信息分析，新型冠状病毒治疗药物的研发思路还有：可以抑制病毒与细胞结合，或者抑制胞吞、抑制装配或释放等。【答案点睛】解答本题的关键是掌握病毒的相关知识点，了解病毒的基本结构，明确不同的病毒含有的侵染宿主细胞所必需的蛋白质的种类不同，识别的受体细胞也不同，同时不同的病毒进入受体细胞发生的遗传信息的传递过程也不同。10、人工合成）核苷酸序列质粒使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代启动子、终止子、标记基因处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（或成为感受态细胞）农杆菌转化法乳腺蛋白基因【答案解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【题目详解】（1）获取目的基因的方法主要有两种：一是从供体细胞（或基因文库）中获取，另一种是人工合成目的基因。人工合成目的基因的方法适合用于基因比较小、核苷酸序列已知的情况。（2）常用的基因载体是质粒，构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点等。（3）若受体细胞是大肠杆菌