免疫学检测技术基本原理课件

2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院1免疫诊断抗原或抗体的检测免疫细胞的检测免疫检测方法的应用2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院2抗原抗体反应的特点特异性可见性可逆性2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院3影响抗原抗体反应的其它因素电解质酸碱度温度2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院5凝集反应2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院6沉淀反应可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物，此类反应称为沉淀反应；多用半固体琼脂凝胶作为介质进行琼脂扩散或免疫扩散。即可溶性抗原与抗体在凝胶中扩散，在比例合适处相遇时形成可见的白色沉淀2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院7单向免疫扩散

(singleimmunodiffusion)2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院8双向免疫扩散

(doubleimmunodiffusion)2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院10对流免疫电泳2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院12补体参与的反应应用抗体与红细胞表面的抗原结合，激活反应体系中的补体成份，能导致红细胞溶解，则可根据溶血现象判定试验结果。如溶血空斑试验、HLA的血清学分型等2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院14

免疫荧光法(immunofluorescence,IF)2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院15酶免疫测定(enzymeimmunoassay,EIA)将抗原-抗体反应的特异性与酶催化作用的高效性相结合，通过酶作用于底物后的显色反应判定结果。可用目测定性，也可用酶标测定仪测定光密度（OD）值以反映抗原含量，灵敏度可达每毫升ng甚至pg水平。常用于标记的酶有辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,AP)等。2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院16酶联免疫吸附试验

(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院17其它常用标记方法放射免疫测定法(radioimmunoassay,RIA)

化学发光免疫分析：将发光物质（如吖啶酯、鲁米诺等）标记抗原或抗体进行反应，发光物质在反应剂（如过氧化阴离子）激发下生成激发态中间体，当激发态中间体回到稳定的基态时发射出光子，用自动发光分析仪接收光信号，测定光子产量，以反映待检样品中抗体或抗原含量。免疫胶体金法A\B分别粘贴吸水材料，免疫金复合物干片粘贴在近下端C处，紧贴其上为硝酸纤维素膜条CEMSDSAdditionofSDSEMCProteinbecomesrod-shapedwithuniformchargedistribution2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院21免疫细胞的检测免疫细胞的鉴定分离免疫细胞功能的测定2022/11/17电子科技大学生命科学与技术学院23免疫磁珠分离技术将特异性抗体与磁性微粒交联，称为免疫磁珠（immunemagneticbead,IMB）。IMB可与表达相应膜抗原的细胞结合，应用强磁场分离IMB及其所吸附的细胞，从而对特定的细胞进行分选，此为直接分离法。亦可用二抗包被磁性微珠，与任何已结合鼠源性一抗的细胞进行反应，从而对细胞进行分离，此为间接分离