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第二十四章病毒感染的检查方法与防治原则第一节病毒感染的检查方法(一)标本的采集与送检采集急性期标本根据感染性质取不同的标本标本置于病毒转运液使用抗生素以抑制标本中细菌或真菌等生长繁殖冷藏保存、快速送检采集双份血清(二)病毒的分离培养动物接种:尚无敏感细胞隐性感染、免疫抵抗力、接种量鸡胚培养:鸡胚对多种病毒敏感绒毛尿囊膜接种:天花病毒、痘病毒、人类疱疹病毒尿囊腔接种:流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔接种:流感病毒卵黄囊接种:嗜神经病毒细胞培养细胞培养原代细胞有限细胞系连续(或无限)细胞系悬浮型细胞贴附型细胞二倍体细胞异倍体/非整倍体细胞细胞病变红细胞吸附病毒干扰作用细胞代谢的改变Vero细胞,EV71MRC-5细胞,CoxA16Hep-2细胞,腺病毒病毒形态学检查病毒抗原检测免疫学标记技术蛋白印迹技术血凝抑制试验病毒核酸检测病毒形态学检查病毒抗原检测病毒核酸检测核酸扩增技术核酸杂交技术基因芯片技术基因测序技术TaqMan探针法CYBRGreen染料法病毒形态学检查病毒抗原检测病毒核酸检测核酸扩增技术核酸杂交技术基因芯片技术基因测序技术(四)病毒数量与感染性测定50%组织细胞感染量(TCID50)空斑形成试验(plaqueformationtest)有感染性的病毒经适当稀释后接种于单层细胞,经一定时间培养后,覆盖薄层未凝固的琼脂于细胞上,待其凝固后继续培养,由于单个病毒的复制增殖使局部单层细胞脱落,此即空斑,经染色后空斑可用肉眼观察空斑形成单位(plaqueformationunit,PFU)计算空斑数可推算出样品中活病毒的数量(pfu/ml)红细胞凝集试验/血凝试验(五)病毒感染的血清学诊断中和试验(neutralizationtest)血凝抑制试验(hemagglutinationinhibitiontest,HI)ELISA、IFA第二节病毒感染的特异性预防(一)人工主动免疫常用生物制品灭活疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗基因工程疫苗重组载体疫苗核酸疫苗(二)人工被动免疫常用生物制品免疫球蛋白血清丙种球蛋白特异性免疫球蛋白细胞免疫制剂细胞因子第三节病毒感染的治疗抗病毒化学制剂核苷类药物:碘苷/疱疹净、阿昔洛韦/无环鸟苷、阿糖腺苷、齐多夫定、双脱氧肌苷、双脱氧胞苷、dTC、拉米夫定、利巴韦林/病毒唑抑制病毒基因复制模拟核苷成分掺入病毒基因组竞争病毒复制酶抑制病毒基因转录非核苷类反转录酶抑制剂:柰韦拉平、吡啶酮蛋白酶抑制剂:沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦其他:金刚烷胺、甲基金刚烷胺;磷甲酸钠干扰素和干扰素诱生剂IFN干扰素诱生剂多聚肌苷酸和多聚胞啶酸
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