肾脏相关特种蛋白课件

与肾脏病相关的特种蛋白检查北京大学第一医院检验科王学晶ClinicalContinuumofAKIDeathComplicationsNormal↑

RiskKidney

failureDamage↓

GFRAntecedentsIntermediateStageAKIOutcomesBiomarkersofStructuralInjuryBiomarkersofFunctionalInjuryNGAL,IL-18,L-FABP,KIM-1SerumCystatinC,SerumCreatinine肾脏病的表现临床表现早期：没有任何症状，轻度水肿，多尿中期：乏力，虚弱，不适感，容易感染，贫血，低蛋白血症，水肿，高脂血症，高血压，晚期：肾功能衰竭，累及其他脏器实验室表现早期：尿常规正常，微量蛋白尿，炎性因子或蛋白，镜下血尿中期：尿常规异常，蛋白尿，肉眼血尿或镜下血尿晚期：肌酐升高，GFR下降肾脏病相关特种蛋白器质性损伤标志物肾小球：尿白蛋白，尿转铁蛋白，尿免疫球蛋白肾小管：尿NAG,尿NGAL功能性损伤标志物滤过：

血CystatinC重新收:尿α1-微球蛋白肾小球内跨毛细血管压力过高肾小球滤过屏障机制障碍，包括滤孔改变或电荷改变肾小球上皮足突细胞代谢障碍肾小管上皮细胞重吸收障碍##JAmSocNephrol2009,20(3):489-94白蛋白尿形成机制尿白蛋白,micro-albumin,mAlb分子特点：MW:69KD,带负电荷，不能通过肾小球滤膜。检测方法：免疫法（散射比浊，透射比浊，发光）检测仪器：特种蛋白仪，自动生化仪，POCT,化学发光仪参考值：成人8小时尿：AER<20ug/min24小时尿：<30mg/24h,或<30mg/L

任意尿白蛋白/肌酐<28mg/gcr2.26mg/mmolCrea临床意义：*标志电荷屏障功能受损*各型原发和继发肾小球疾病的滤过膜损伤评估：*治疗效果监测

IbsenH，DiabetesCare.2006Mar;29(3):595-600

尿白蛋白检测的临床意义CAP-PT尿液分析2010第二次尿白蛋白在不同系统间的检测差异尿白蛋白在不同系统间的检测差异开发参考测量程序(LC-MS)开发参考物质明确容器的吸附程度明确生物学变异明确需要测量的分子形式明确目前免疫测量法的性能不能单独报告尿白蛋白浓度尿试纸条结果需要解释应报告白蛋白肌酐比值ACR一个国家或地区应统一采用“mg/mmol”或“mg/g”尿转铁蛋白,urinetransferrin,TRU分子特点：MW:77KD,带负电荷，不易通过肾小球滤膜。检测方法：免疫法（散射比浊，透射比浊）检测仪器：特种蛋白仪，自动生化仪参考值：<1.6mg/gcr透射比浊法<2.0mg/L散射比浊法临床意义：较mAlb更敏感,同时检测支持肾小球损伤TRF为负性急性时相反映蛋白

小结1mAlb可以发现早期肾小球损伤:IMMAGE测定mAlb的下限为2mg/L,而尿试纸条测定总蛋白的敏感度为>150mg/LTR-U略敏感，佐证mAlb的升高。当尿总蛋白<2g/L时，mALB≈TRU×20(mg/L)选择性蛋白尿指数SPI=（尿IgG/血IgG）/（尿Alb/血Alb）参考值：SPI≤0.1，高度选择性蛋白尿；>0.2,非选择性蛋白尿意义：SPI反映滤过膜的通透性，SPI高则预后差肾小管损伤指标回吸收功能损伤指标LowMolecularWeightProtein器质性损伤指标溶酶体酶：NAG，N-乙酰-B-D-氨基葡萄糖苷酶刷状缘酶:AAP，丙氨酸氨基肽酶线粒体酶NAG分子特点：分子量140KD，为溶酶体酶，在肾皮质含量最高，髓质次之。在近曲小管细胞内含量最丰富。检测方法：化学法检测仪器：自动生化仪参考值：<16U/gcr以PNP为色原，终点法<21U/gcr以CNP为色原，速率法临床意义：肾小管细胞损伤指标

小结2a1-MG：升高原因

回吸收功能受损

其他原因导致超滤液内的蛋白含量超过其回吸收能力。NAG：代表肾小管细胞受损，各种原因均可导致其升高，常见于感染、药物、中毒及排异。二者常随mAlb和TRU的升高而升高；单纯肾小管受损也可见，仅a1-MG和NAG升高。常见于糖尿病早期。二者不同步时：

常见NAG升高，代表虽细胞受损，但剩余代偿功能尚可完成必需工作。肾小管代偿功能非常有限。Januar200326肾小球蛋白尿试纸条蛋白: 通常阳性,

但在微量蛋白尿阶段也可以为阴性

1M/alb<0.1少量选择性：TPU30~300mg/L，Alb轻度升高见于DM肾病、HP肾病、SLE肾病早期大量选择性:TPU300~3000mg/24h，Alb重度升高

IgG/Alb<0.03见于微小病变/局灶硬化/膜性/IgA肾病非选择性：

TPU300~3000mg/24h，

IgG/Alb>0.03

见于急性肾小球肾炎/急进性肾炎/SLE活动期/妊娠子痫/Goodpasture综合征/直立性蛋白尿TPU>3000mg/L，

IgG/Alb>0.03

见于溶血尿毒症综合征/先天性肾病综合征/Goodpasture综合征/进展性硬化

Januar200327肾小管蛋白尿试纸条蛋白通常阴性,

因为1M不能用试纸条进行测定TPU通常150~1500mg/24h1M>14mg/gCreaNAG>20U/gCrea1M/alb>0.1见于间质性肾炎、肾盂肾炎、排异、急肾衰、Fanconi

综合征、反流性肾病、Wilson病、急性肾衰恢复期Januar200328混合性蛋白尿试纸条蛋白 阳性TPU300~3000mg/24hAlb>20mg/gCrea1M>14mg/gCrea

IgG/Alb>0.03，1M/alb>0.1见于进展性肾小球肾炎、糖尿病肾病4期、进展性淀粉样变、高血压肾小球硬化合并肾盂肾炎、SLE活动期、IgA肾病、MM肾小球硬化期、移植排斥、直立性蛋白尿

Januar200330肾后性蛋白尿(=肾后性血尿)试纸条蛋白阳性

试纸条红细胞阳性TPU>100mg/LAlb>20mg/gCrea,

IgG>10mg/gCrea;

IgG/Alb>0.2

1M>14mg/gCrea

2M>10mg/gCrea

分子量720kD2M/Alb>0.02见于膀胱炎症和肿瘤、尿结石、尿路感染、前列腺疾病

蛋白尿类型疾病MW(kd)蛋白总量(g/24hr)标志物选择性炎症,肿瘤,DM,HPetc50-700.03-0.3Alb,Trf非选择性50-1501.5-20Alb,IgG肾小管性炎症,中毒等10-700.15-15a1-M,b2-MNAG混合型各种10-1500.15-20Alb,a1-MNAG肾前性溢出性<500.1-50依情况，a1-M肾后性出血，分泌各种各种a2-M,ApoA各种尿蛋白结果关系磺柳酸定性TP-Ug/LmALBmg/LIMMAGEdilTR-Umg/LIMMAGEdila1mGmg/LIMMAGEdilNAGU/L-<0.3<300-<15-<30-<20±0.3~1300~1000-15~50-0~50-0~501+1~2500~20001:650~100-0~100-0~702+2~82000~50001:36100~2001:6>501:6>20>3+>8>50001:216>1001:36>1001:36>20尿液稳定性第一天第二天第三天第四天第五天第八天MAmg/L200.0193.0214.0214.0203.0228.0TRUmg/L23.424.323.523.225.925.6A1MGmg/L11.612.513.013.013.313.4NAGU/L34.036.036.036.035.039.035胱抑素C-新的GFR标志物胱抑素C(CysC)是新的内源性GFR标志物由122个氨基酸组成的13.3KD的非糖基化的碱性蛋白质以相对稳定的水平转录并在所有有核细胞表达（管家基因），产生速率恒定不受肌肉量、饮食、方法学的影响可从肾小球自由滤过，在近端小管完全重吸收和分解代谢，只有很少部分排入尿液荟萃分析显示：CysC虽然未必优于血肌酐，但对于评价肾功能早期损伤更加敏感相关性比较CystatinCandCreatinine

inrelationtoageinapopulationof258children

PediatrNephrol1998;12(2):125-91-60岁之间水平恒定,受肌肉量影响小在儿童和老年人群中应用较Scr更有特色Xuguobing,etal.JClinLabAna.2000相关性比较43但是，Cys作为GFR的内源性标志物存在以下问题

在恶性肿瘤、HIV感染、糖皮质激素治疗时Cys血清水平也会升高其血清水平还受肾外排泄的影响CysC浓度与身高、吸烟和高水平的C反应蛋白显著相关虽然CysC的个体间变异很小，但个体内变异较大正常值范围很窄，与GFR变化的相关性难以拟合粒子增强的免疫散射比浊法（PENIA）用于测定Cys，但实验室间没有统一的参考方法检测肾小球滤过率（GFR）的方法测定肾小球滤过率（GFR）的意义胱抑素C存在的问题2004年，CysC作为肾脏功能的替代指标被美国食品药品监督管理局（FDA）通过。AKI生物学标志物——NGAL中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）,属脂质运载蛋白超家族成员。研究表明在急性肾损伤时血清及尿NGAL明显升高，是AKI特