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ICS65.020.01B61

DB63青 海 省 地 方 标 准DB63/T1716—2018黑果枸杞组织培养育苗技术规范2018-12-26发布 2019-03-20实施青海省市场监督管理局 发布DB63/T1716DB63/T1716—2018II前 言本规范按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本规范由中国科学院西北高原生物研究所提出并归口。本规范起草单位:中国科学院西北高原生物研究所。本标准起草人：王莉、李毅、胡延平、王溪、王均、王建科、石琳、杨文韬。DB63/T1716DB63/T1716—2018PAGEPAGE2黑果枸杞组织培养育苗技术规范范围本标准规定了黑果枸杞（LyciumruthenicumMurr）组织培养快繁育苗中的一般要求、前期准备、本标准适用于黑果枸杞优良单株或株系的快速育苗。规范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB63/T1714宁夏枸杞组织培养育苗技术规范一般要求对于试剂使用及溶液配制过程的要求,按照DB63/T1714第4章的规定执行。前期准备组织培养的前期准备，按照DB63/T1714第5章的规定执行；其中各种培养基的配方如下：——预培养基：MS基础培养基+6-BA0.20mg/L+2,4-D2.00mg/L+CH300.00mg/L+Vc2.00mg/L+3%+琼脂粉；——诱导培养基：MS基础培养基+6-BA3.00mg/L+NAA0.10mg/LCH300.00mg/L+Vc2.00mg/L+3%+琼脂粉；——增殖培养基：MS基础培养基+6-BA1.00mg/L+NAA0.05mg/LCH300.00mg/L+Vc2.00mg/L+3%+琼脂粉；生根培养基MS基础培养基+CH300.00mg/L++Vc2.00mg/L蔗糖3%+琼脂粉。外植体的处理方法母株选择植株作为母株。每年6月～7月剪取母株上无病虫危害、无病毒侵染、生长健壮的当年生嫩枝条。外植体消毒70.00%的酒精漂洗叶片30再转入0.10%的升汞中消毒6min～8min，用无菌水冲洗5次～8次。培养方法与程序外植体预培养将无菌叶片接种于预培养基上，叶片平放于培养基表面。在温度22℃～25℃，光照强度2000Lux～3000Lux、光照时间12h/d～14h/d的条件下培养2周。不定苗诱导培养22℃～253000Lux～5000Lux、光照时间14h/d～16h/d的条件下培养4周～6周，形成不定苗。不定苗增殖培养微扦插增殖培养株高大于3cm的不定苗，剪切成带有2片～4片叶的茎段，转接于增殖培养基中。每2周按照此方法进行转接或进行生根培养。增殖分化培养将生长至1cm～2cm的不定苗从基部进行单株分离，转接于增殖培养基中培养4周～6苗。重新转接至增殖培养基或进行生根培养。培养条件在温度为22℃～25℃、光照强度5000Lux～10000Lux、光照时间1

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