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文档简介

形态暨影像平台—流式细胞仪生理129室BDFACSCalibur全自动双激光四色流式细胞分析系统FACSCalibur检测器组(激光器)PMT位置(荧光光谱峰值范围)适用染料颜色488nm蓝色激光FL1(波长515-545nm)FITC绿FL2(波长564-606nm)PE,PI橙红FL3(波长>650nm)PerCP,PerCP-Cy5.5,Cy5红635nm红色激光FL4(波长640-680nm)APC深红流式细胞仪的检测范围细胞结构细胞大小细胞颗粒度细胞表面积核浆比例DNA含量与细胞周期RNA含量蛋白质含量……细胞功能细胞表面/胞浆/核的特异性抗原细胞活性细胞内/外的细胞因子激素结合位点、细胞受体蛋白磷酸化pH值钙离子浓度细胞膜电位、线粒体膜电位

……DNA细胞周期分析细胞周期G2MG0G1s2004006008001000G0G1sG2MDNA含量细胞数量2N4N细胞周期分析活体染料CFSE测定细胞增殖ProliferationWizardBasicModelFile:Dateacquired:14-Nov-08Dateanalyzed:19-Oct-2012Parent:63.73%at171.00Generation2:20.44%at151.81Generation3:12.01%at132.62Generation4:3.82%at113.43ProliferationIndex:1.29NonproliferativeFraction:0.82DivisionErrorIndex:1.00Spacingofgenerations:19.19Forcellsatgeneration>=3:UpperGenerationP.I.:4.55PrecursorFrequency:0.044944NumberofCellsAnalyzed:17445ReducedChi-Square:9.643CBA(微球阵列分析技术)胞内活性氧水平的检测与分析(ROS)细胞膜电位的检测与分析细胞内钙离子浓度的检测与分析细胞表面分子的检测与分析免疫细胞及亚群的检测与功能分析

血液系统细胞表面标志的研究细胞群体及细胞表面标志变化的监测细胞表面标志构成性质的分析其他常用检测与分析流式细胞仪的主要技术指标荧光测量灵敏度(衡量仪器检测微弱荧光信号的重要指标)

以能检测到单个微球上最少标有FITC或PE荧光分子数目来表示,一般可达到<600个荧光分子。仪器的分辨率(衡量仪器测量精度的指标)

用变异系数CV(CoefficientofVariation)值来表示。最佳状态时CV<2前向角散射光检测灵敏度

能够检测到的最小颗粒大小,一般可检测到0.2-0.5um左右分析速度

每秒可分析的细胞数。一般可达3000个/秒~6000个/秒,FACSCalibur的分析速度为10000个/秒实验流程1.

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