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文档简介

实验十一土壤微生物的分离及纯化目的要求初步掌握微生物的分离纯化和培养菌种的基本方法。

练习微生物接种、移植和培养的基本技术，掌握无菌操作技术。掌握微生物的鉴定技术。实验原理自然界中各种微生物混杂生活在一起，要研究某种微生物的特性，首先须使该微生物处于纯培养状态。从混杂的微生物群体中获得只含有某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。实验材料样品：新鲜土壤。培养基：灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、高氏一号培养基、马铃薯蔗糖培养基。无菌水：装有10mL无菌水三角瓶、装有9mL无菌水的试管。其它：无菌培养皿、无菌吸管、无菌三角刮子、电子天平、记号笔、接种环、酒精灯、火柴。实验步骤稀释涂板法稀释混合平板法（混菌法）划线分离微生物的培养制平板：每组有培养皿3付。

在无菌培养皿底部注明分离菌名、稀释度、组别、班级。图－1土壤稀释液的制备和稀释液的取样微生物的分离—平板涂抹法实验程序3（微生物的分离—平板划线法）制成平板。凝固后，用接种环取相应的菌液一环（10－1）在平板上划线。

1.连续划线法：将挑取有样品的接种环在平板培养基表面作连续划线。完毕后，倒置于28～300C温室培养。

2.分区划线法：用接种环以无菌操作挑取土壤稀释液1环，先在培养基的一边作第一次平行划线3—4条，再转动培养皿约600C角，并将接种环上剩余物烧掉，待冷却后通过第一次划线部分作第二次划线会，同法依次作第三次和第四次划线。划线完毕，盖上皿盖，倒置于温室培养。挑取单个菌落接种于斜面培养基上，如果不纯，再移植纯化，最后得到纯培养。平板划线法制备土壤稀释液时，要注意使土样均匀分散在稀释液中。注意无菌操作。注意事项思考题平板培养

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