药物分析第七章芳香胺类药物的分析课件

芳胺类:指氨基直接与苯环相连。

酰胺类、对氨基苯甲酸酯类芳烃胺类:指氨基在烃基侧链上。苯乙胺类.芳氧丙醇胺类第七章芳香胺类药物的分析§7.1

芳胺类药物的分析对氨基苯甲酸酯类:芳伯氨基未被取代,对位有取代.酰胺类:芳伯氨基被酰化,对位有取代.一、对氨基苯甲酸酯类1．结构特点：盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因2．性质：①

具有芳伯氨基，发生重氮化或重氮化-偶合反应②

碱性具有脂烃胺侧链—碱性，能与生物碱沉淀试剂发生反应。③

具有酯的结构，容易水解。④

紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收。2．性质：※利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加热才能水解）①

水解后可发生重氮化反应有酰胺结构共性。水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应。②

与FeCl3反应具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用呈色。③

碱性利多卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂或重金属离子反应。④

紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收。三、鉴别反应1、重氮化-偶合反应具有芳伯氨基药物，在酸性溶液中与NaNO2发生重氮化反应，再与碱性-萘酚（偶合染料）产生红色偶氮化合物。例：盐酸普鲁卡因猩红色苯佐卡因+盐酸+NaNO2+碱性-萘酚----猩红色对乙酰氨基酚红色

对乙酰氨基酚具有潜在芳伯氨基，如，水解后可得芳伯氨基，能发生类似反应。3、与重金属离子反应(1)．与铜离子的反应(2)．与钴盐反应2、三氯化铁反应具有酚羟基（如对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用显蓝紫色。具有酰胺结构的药物羟肟酸羟肟酸铁（紫红色----黑色）(3)．羟肟酸铁的反应具有酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。例：盐酸普鲁卡因胺。(2).盐酸普鲁卡因的鉴别试验

白色沉淀油状，五、含量测定1．亚硝酸钠滴定法①

原理具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。终点判断：用永停法或外指示剂法。例：盐酸普鲁卡因含量测定用此法。

③外指示剂法把指示剂放在反应系统外面.外指示剂：淀粉-KI糊剂或试纸。铺在白瓷板上，当近终点时用玻棒蘸少许测定液划过，立即显蓝色为终点。原理：当达到滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2在酸性条件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉显蓝色。③滴定条件：

(a)加入溴化钾，加快重氮化速度；

(b)滴定管尖端插入液面下2/3处滴定，可避免NaNO2挥发，并加快重氮化速度。近终点时提到液面上。

(c)反应温度20~30º。

(d)加过量盐酸，防止偶氮氨基化合物生成。而影响测定结果。如盐酸量增加，则反应向左进行。2、分光光度法

分光光度法测定人唾液中对乙酰氨基酚（解热镇痛药）含量：原理：

水解亚硝酰铁氰化钠对乙酰氨基酚-----------对氨基酚----------------------------络合物

OH-（蓝色）方法：①取样：6位健康受试者口服1.0g对乙酰氨基酚0.25g,0.75g.1.25g,服药后2,4,8,12小时取样.②标准曲线:用空白人唾液制成每1ml1,5,10,20,30,40μg,在工作上95.6nm测吸光度,绘制A~C曲线.③测定:测不同样品吸光度,以空白唾液为参比.在标准曲线中查出相应浓度.④绘制吸光度~时间曲线,得出动力学参数.3、体内药物分析采用HPLC测定病人血中对乙酰氨基酚浓度。①标准曲线：测已知浓度的峰面积得：峰面积~浓度②取样：③测定未知样峰面积，并在标准图中查出相应浓度。④判断是否超标。§7.2

苯乙胺类药物分析一．结构特点（P154表7-3）肾上腺素：R1=R2=-CH3R3=H盐酸去氧肾上腺素肾上腺素二．鉴别试验1.

三氯化铁反应、与甲醛-硫酸反应区别肾上腺素和去甲肾上腺素。三氯化铁甲醛—硫酸肾上腺素0.1mol/LHCl显绿色加氨液显紫色/紫红色红色盐酸去甲氧肾上腺素紫色玫瑰红---橙红---深棕红2.氧化反应三、特殊杂质检查肾上腺素:肾上腺酮盐酸去氧肾上腺素:酮体四、含量测定1、非水滴定法（肾上腺素含量测定）溶剂：冰醋酸指示剂：结晶紫终点：蓝绿色滴定液：高氯酸

3、高效液相色谱法灵敏度高，高效分离，高选择性。四.特殊杂质检查(一)对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查

对乙酰氨基酚中除检查酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣等一般杂质外，还需要检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质（对氯乙酰苯胺）、对氨基酚等特殊杂质。对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。(1)．乙醇溶液的澄清度与颜色对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）副反应副副反应对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯乙酰苯胺。副反应⑥

限量:④点样量样品液：200l

点于硅胶GF254薄层板上对照液：40l⑤

判断在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。(3)．对氨基酚制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚☆检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。检查方法：限量：0.005%(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。ⅰ．反应速度与药物结构的关系重氮化反应机制：a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。b.

当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如等。供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。ⅱ．反应速度与酸及酸度的关系a.

酸的种类重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍

用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。但HBr价格贵，用盐酸代替，为加快反应速度，需加入KBr（催化剂）。产生HBr与HNO2反应，可生成大量NOBr，加快反应速度。b.

盐酸的用量理论上:芳胺∶盐酸＝1∶1mol

实际上:芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6mol原因：＊强酸性可加速反应＊重氮盐在酸性下稳定＊酸性下避免副反应发生。

ⅲ．反应速度与滴定时温度的关系一般，温度升高反应速度加快。但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，温度升高重氮盐分解速度也加快。另外，温度高时，滴定液亚硝酸钠也容易分解逸失，而影响测定结果。所以，重氮化反应应在低温条件下进行。ⅳ．反应速度与滴定速度的关系重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定速度不能过快。尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时，游离芳伯胺浓度非常低，反应速度就更慢了。所以，每加一滴标准液后，要搅拌1~5分钟后再判断终点。②

操作中的主要条件＊重氮化反应属于分子反应＊滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定＊反应速度受多种因素影响③

指示终点的方法重氮化滴定法指示终点的方法有:永停法电位法外指示剂法内指示剂法我国药典主要采用永停滴定法指示终点ⅱ．电位法在被测溶液中插入甘汞-铂电极，到达滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2使电位产生突跃，从而指示终点。USP采用这个方法指示终点。使用方法：滴定时，把淀粉-KI试液滴在白磁板上，用玻