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文档简介
国内外沙门菌检测方法介绍中国疾病预防控制中心营养与食品安全所郭云昌国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第1页!DANIELELMERSALMON,(1850-1914)
美国兽医微生物和病理学家。是美国授予的位兽医学博士。1884年任美国农业部畜牧局首任局长。他首次从病猪中分离出猪霍乱沙门氏菌。在医学微生物中通用的沙门菌一词,就是为纪念他而以他的名字命名的。沙门菌(Salmonella)国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第2页!沙门菌(Salmonella)
沙门菌属(Salmonella)是一大群寄生于人类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌统称为沙门杆菌。国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第3页!
大小0.6~1.0×2~3um,无芽胞,一般有鞭毛(鸡沙门菌除外),无荚膜,多数有菌毛,革兰氏阴性杆菌,需氧或兼性厌氧,最适生长温度为35~37℃,最适pH值为6.8~7.8。沙门菌生物学性状
国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第4页!沙门菌常用生化试验三糖铁(TSI)尿素酶试验阴性(黄)阳性(红)国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第5页!沙门菌常用生化试验赖氨酸脱羧酶试验对照阳性(紫)阴性(黄)丙二酸盐试验阳性(兰)阴性(不变)国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第6页!国内外沙门菌检测方法(传统方法)
国家标准行业标准FDA(Food&DrugAdministration)
AOAC(AssociationofOfficialAnalyticalChemists)
FSIS(FOODSAFETYANDINSPECTIONSERVICE)
ISO加拿大官方食品微生物分析方法
国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第7页!
出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法
肉类、蛋品缓冲胨水(BPW)四硫磺酸盐煌绿(TTB)亚硒酸盐胱氨酸(SC)37
℃4hor20~24h直接选择性增菌亚硒酸盐胱氨酸(SC)四硫磺酸盐煌绿(TTB)37℃24±2h
BS&DHL(亚利桑那菌琼脂)
前增菌37℃24~48hTSI&赖氨酸脱羧酶TSI&尿素酶37℃24~48h生化试验血清学试验(“O”抗原,“Vi”抗原)42℃20±2h37℃24~48h结果判定检验检疫行业标准SN0170-92国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第8页!肉、禽和蛋品中沙门菌的分离和鉴定USDA/FSISMLG4.02样品BPWorBPW(含结晶紫)35±1℃20-24hBGS&DMLIAorXLT442±0.5℃22~24h0.5±0.05mL+10mLTT0.1±0.02mL+10mLmRV42±0.5℃22~24h35±1℃18~24h&48hTSI&LIA血清学试验商业生化试剂盒或自动鉴定系统or传统生化鉴定(AOACOfficialMethod967.27or"EdwardsandEwing'sIdentificationofEnterobacteriaceae")报告结果国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第9页!AOAC沙门菌检测方法AOACOfficialMethod967.25SalmonellainFoodsPreparationofCultureMediaandReagentsAOACOfficialMethod967.26SalmonellainProcessedFoodsDetectionAOACOfficialMethod967.27SalmonellainFoodsIdentificationAOACOfficialMethod967.28SalmonellainFoodsSerologicalTests国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第10页!25g样品225mLBPW35℃or37℃16~20h0.1mL+10mLRV10mL+100mLSC42℃24h35℃or37℃24h&48h酚红煌绿琼脂(亮绿琼脂)&第二种选择性平板35℃or37℃
20~24h无典型菌落再培养18~24h典型菌落(pinkred)营养琼脂纯化可疑菌落每个平板选5个菌落35℃or37℃
18~24hTSI,尿素酶,赖氨酸脱羧酶,ONPG,VP,吲哚血清学试验(O抗原,Vi抗原,H抗原)报告结果送参考实验室分型ISO6579:1993(E)
微生物-沙门菌检测的通用方法国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第11页!沙门菌仪器检测法VIDAS(生物梅里埃公司)BAX(杜邦公司)国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第12页!
VIDAS
国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第13页!
DUPONTQualiconBAXSystem
国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第14页!
VITEK
国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第15页!API20E第1位数第2位数第3位数第4位数第5位数第6位数第7位数结果判定ONPGADHLDCODCCITH2SURETDAINDVPGELGLUMANINOSORRGASACMELAMYARAOX124124124124124124124反应结果-+++++-----+++++-+-+-沙门菌应得树枝024124000004124104020组合编码
6
7
0
4
7
5
2国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第16页!沙门氏菌在CHROMagar显色培养基上的菌落特(紫)沙门氏菌在海博公司显色培养基上的菌落特征(红)沙门菌检测显色培养基国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第17页!沙门菌(Salmonella)
目前至少有67种O抗原和2000个以上血清型,所致疾病称沙门菌病。肠热症:是伤寒病和副伤寒病的总称,主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。
急性肠炎(食物中毒):是最常见的沙门杆菌感染。多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、肠炎杆菌等引起。
败血症:常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。
国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第18页!不分解乳糖(亚利桑那菌除外)。分解葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌产酸不产气)。多数产生H2S,不产生靛基质,不液化明胶,不分解尿素,不产生乙酰甲基甲醇,多数能利用枸橼酸盐,能还原硝酸盐为亚硝酸盐,在氰化钾培养基上不生长。沙门菌生物学性状
国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第19页!沙门菌常用生化试验吲哚试验阴性(液面黄)阳性(液面红)
VP试验阳性(红色)阴性(不变)国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第20页!ONPG试验阳性(黄)空白沙门菌常用生化试验国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第21页!冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品前增菌法25g+BPW225mL36℃
±
1℃一般4h,干蛋品18h~24h10mL+MM(或TTB)100mL10mL+SC100mL直接增菌法25g+灭菌生理盐水25mL检样匀液25mL+MM(或TTB)100mL检样匀液25mL
+SC100mLBSDHL(或HE、WS、SS)TSI(排除A/AH2S-结果),靛基质,尿素,KCN,赖氨酸沙门氏菌血清学试验甘露醇山梨醇H2S+靛+尿-KCN-赖+H2S-靛-尿-KCN-赖+/-非如左述的各种反应结果沙门氏菌血清学试验ONPG-沙门氏菌非沙门氏菌42℃18h~24h36℃
±
1℃18h~24h42℃18h~24h36℃
±
1℃18h~24h36℃
±
1℃40h~48h36℃
±
1℃18h~24h
微生物学检验沙门氏菌检验中华人民共和国国家标准GB/T4789.4-2003国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第22页!
样品(20类)25g225mL乳糖肉汤(LB)or胰酪胨大豆肉汤(TSB)or煌绿溶液(BG)or通用前增菌肉汤(UPB)or营养肉汤(NB)or再造脱脂奶粉or四硫酸盐煌绿(TT)pH6.8±0.224±2h35℃RVTT
43±0.2℃or35±2.0℃24±2h
24±2h42±0.2℃BS&XLD&HE24±2h35℃TSI&LIA非沙门菌沙门菌非沙门菌LIA+LIA-TSIK/ALIA-TSIA/A&尿素酶,H抗原(多价H抗血清或Spicer-Edwardsflagellar(H)test),赖氨酸脱羧酶,酚红卫矛醇肉汤,色氨酸肉汤(KCN,丙二酸盐,吲哚),O抗原酚红乳糖肉汤,酚红蔗糖肉汤,MR-VP,西蒙氏柠檬酸盐5种商业生化鉴定系统(API20E,EnterotubeII,
EnterobacteriaceaeII,MICRO-ID,orVitekGNI)&O抗原&H抗原细菌学分析手册(FDA/BAM)第五章沙门菌属国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第23页!肉制品中沙门菌的分离和鉴定FDA&USDA/FSIS乳糖肉汤缓冲蛋白胨水TTB肉汤RV肉汤TTB肉汤RV肉汤BSXLDHEXLT42倍改良LIABGS生化筛选(LIA,TSI)鉴定及确证试验葡萄糖脲酶试验卫矛醇动力试验吲哚MR-VP测试氰化钾粉红酒石酸盐琼脂乳糖水杨苷赖氨酸脱羧酶西蒙氏枸橼酸盐丙二酸蔗糖血清学试验国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第24页!食品中的沙门菌检测方法AOAC967.25-967.28处理样品1mL+10mLSC1mL+10mLTT35℃24±2hXLD&HE&BS35℃24±2h(BS24h&48h)35℃24±2hTSI&LIA35℃24±2h纯培养物不纯培养物纯培养物MACorXLDorHE尿素酶-尿素酶+非沙门菌H抗原,LIA,酚红卫矛醇肉汤,色氨酸肉汤(KCN,丙二酸盐,吲哚),O抗原吲哚+&H血清-KCN+&LIA-非沙门菌非沙门菌补充生化试验酚红乳糖肉汤,酚红蔗糖肉汤,MR-VP,西蒙氏柠檬酸盐非沙门菌沙门菌国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第25页!25g样品营养肉汤or缓冲胨水or煌绿水溶液or胰蛋白酶大豆肉汤35℃18~24h1mL+9mLSC1mL+9mLTBG35℃24±2h42.5℃24±2hBS&BGS35℃24±2h&48±2h纯培养物不纯培养物纯培养物MACTSI&LIA&尿素琼脂O多价血清,H多价血清食品中沙门菌的分离和鉴定加拿大HPB方法商业生化试剂盒或自动鉴定系统报告MFHPB-20国内外沙门氏菌检测方法共32页,您现在浏览的是第26页!沙门菌仪器检测法VIDAS应用酶联免疫技术制造的全自动免疫分析仪,用荧光分析技术通过固相吸附器,用已知抗体来捕捉目标生物体,然后以带荧光的酶联抗体再次结合,经充分冲洗,通过激发光源检测,即能自动读出发光的阳性标本,其优点是检测灵敏度高,速度快,可以在48
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