2023届云南省隆阳区高三下第一次测试生物试题含解析

2023学年高考生物模拟试卷注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列关于细胞生命历程的叙述，正确的是（）A．细胞分化会导致种群基因频率的改变B．癌症的发生并不是单一基因突变的结果C．细胞凋亡是不受环境影响的细胞编程性死亡D．减数第一次分裂后期同源染色体上的非等位基因自由组合可导致基因重组2．图为某种由常染色体上一对等位基因控制的隐性遗传病系谱图（深色代表的个体是该遗传病患者，其余为表现型正常个体）。已知Ⅱ－1、Ⅲ－1和Ⅲ－4都是纯合子，下列推断正确的是A．Ⅰ－2和Ⅰ－4一定都是纯合子B．Ⅱ－3和Ⅱ－4为杂合子的概率不同C．Ⅳ－1和Ⅳ－2基因型相同的概率为7/12D．Ⅳ－1和Ⅳ－2结婚，后代患病的概率是1/643．下列对细胞中蛋白质和核酸的叙述，错误的是（）A．两者在高温条件下都会发生变性B．两者的多样性都与空间结构有关C．两者都可具有降低反应活化能的作用D．两者的合成都需要模板、原料、能量和酶4．皮肤感受器接受刺激产生的兴奋沿反射弧的传入神经纤维传导，下列相关叙述正确的是（）A．兴奋在传入神经纤维上的传导是双向的B．兴奋部位膜内侧的Na+浓度低于膜外侧C．兴奋在神经纤维上以化学信号的形式传导D．兴奋在神经纤维上的传导不消耗能量5．小叶锦鸡儿是一种典型旱生豆科灌木，根部具有根瘤菌，对水分和养分需求大，使周围浅根系禾草及一二年生草本植物不能适应而退出群落，而根系发达的深根系丛生大禾草及轴根型杂草如灰绿藜等能适应这种环境。以下叙述正确的是（）A．根瘤菌与豆科植物是寄生关系B．小叶锦鸡儿灌木具有垂直结构C．小叶锦鸡儿参与其所在群落的演替过程D．小叶锦鸡儿一定导致生态系统的物种数增加6．下列关于特异性免疫的叙述，错误的是（）A．一种病原体只能被一种抗体特异性识别B．被病原体感染的体细胞上含有抗原—MHC复合体C．巨噬细胞吞噬处理细菌后能形成抗原—MHC复合体D．一个记忆B细胞上能与抗原特异性结合的受体只有一种7．下列关于真核细胞的结构和功能的叙述，正确的是（）A．生物膜是由“脂质一蛋白质一脂质”组成的统一结构B．细胞核由核糖体、中心体、染色体、纺锤体等结构组成C．伞藻嫁接实验的结果精确地说明了细胞核是系统的控制中心D．细胞的生物膜在结构和功能上紧密联系，构成了细胞的生物膜系统8．（10分）某课题组研究了植物生长调节剂甲和乙对微型月季插枝生根的影响，结果如下图。叙述错误的是（）A．该实验的自变量是植物生长调节剂的种类和浓度B．该实验表明甲促进生根的效果好于乙C．该实验表明植物生长调节剂的作用具有两重性D．甲可能是生长素类似物二、非选择题9．（10分）动物的反射活动之所以能协调，就是因为中枢内既有兴奋活动又有抑制活动；如果中枢抑制受到破坏，则反射活动就不可能协调。（1）图1表示一种神经中枢抑制产生的机制，图中若①先兴奋会导致③兴奋，但若②先兴奋后①再兴奋，③却不产生兴奋，这说明神经元②为___兴奋/抑制）性神经元，分析其产生作用可能的机理是___。（2）图2表示另一种神经中枢抑制产生机制，图中神经细胞①兴奋，传递至突触A处使其末梢释放___进入___，再与突触后膜上的___结合，导致③兴奋，传递至突触B时释放化学物质引起突触后膜上Cl-通道打开，大量Cl-进入细胞①、②上的突触后膜，带来的结果是细胞①、②产生___该过程对于细胞①体现了神经调节中典型的___调节机制。（3）破伤风杆菌产生的破伤风毒素可选择性阻止图2中细胞③释放神经递质，试推测破伤风患者可能出现肌肉___（松弛/痉挛）的症状。10．（14分）Ⅰ、最近哈尔滨因疫情变化管控升级，对境外入哈、国内疫情重点地区入哈人员，一律实行“14天集中隔离医学观察+14天居家隔离医学观察+2次核酸检测+1次血清抗体检测”的管控措施，做到凡进必检、不漏一人、万无一失。Ⅱ、同时，中国率先开启新冠疫苗二期临床研究！据研究新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在康复病人的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。下图为某机构研制疫苗的部分过程。请回答下列相关问题：（1）对疫情重点地区输入人员进行核酸检测需要用到_____________________做探针，进行血清抗体检测的方法是______________。（2）选择性扩增S基因需要的前提条件及原因是___________________________。（3）研究疫苗的步骤①用到的酶有______________，获得的表达载体除了S基因外，还有____________________________等组成部分。（4）S基因在培养的动物细胞中稳定遗传的关键是______________。（5）为了检验步骤③所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用动物细胞中表达的S蛋白与_____________进行抗原—抗体杂交实验，从而得出结论。11．（14分）为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。（1）将草甘膦抗性基因作为_____，与Ti质粒用相同的_____和DNA连接酶处理构建基因表达载体。（2）用_____处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'根据上述序列应选择引物_____（填字母）进行PCR。A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_____种引物，其原因是_____。（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_____。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____过程，获得转基因水稻。12．回答下列（一）、（二）小题。（一）镇江香醋素以“酸而不涩、香而微甜、色浓味鲜”而蜚声中外。下图是镇江香醋的生产工艺简化流程：（1）蒸煮的目的：使原料在高温下灭菌，同时_________，淀粉被释放出来，淀粉由颗粒状变为溶胶状态。（2）由于酵母菌缺少淀粉水解酶系，糯米需经蒸煮后在a-淀粉酶的作用下液化，后加入糖化酶糖化，目的是_________。30min后，装入发酵罐再接入酵母进行_________。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高_________的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。（3）醋酸发酵时酒精应先_________，否则会因浓度过高抑制醋杆菌的增殖。发酵过程需敞口操作，麸皮和糠等拌匀制作成松散的发酵料，其目的是_________。发酵过程中可通过高效液相色谱技术对多种有机酸组成及动态变化进行研究。将_________在相同的色谱条件下进行检测，绘制标准曲线。再根据其对发酵过程中的有机酸含量进行测算跟踪发酵进程。（4）黑曲霉可产生a-淀粉酶用于液化，还可以产生果胶酶将果胶彻底分解为_________。（二）请回答下列与基因工程和植物克隆有关的问题。（1）质粒的抗性基因是常用的_________标记，如果质粒的抗性基因内有若干单一的限制性酶切位点就更好。当外源基因插入这样的酶切位点时，会使该抗性基因失活，这时宿主菌变为对该抗生素_________的菌株，容易检测出来。（2）双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端，但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把_________连接起来，从而保证目的基因只以一个方向连接入载体。影响DNA连接反应的因素有_________（写出两点）。（3）花药培养是单倍体克隆的主要方法。花药再生植株的产生有两条途径：一是烟草等植物通过形成花粉胚的_________途径，二是水稻等植物通过产生芽和根的_________途径，最后发育成单倍体植物。水稻花药培养除了得到单倍体植物，还可以得到来源于花药体细胞的_________植株，因此需要对后代进行进一步的筛选。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】

1、细胞凋亡是由基因决定的细胞编程性死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常的生命历程，对生物体是有利的，而且细胞凋亡贯穿于整个生命历程。细胞凋亡是生物体正常发育的基础、能维持组织细胞数目的相对稳定、是机体的一种自我保护机制。在成熟的生物体内，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除，是通过细胞凋亡完成的。2、衰老细胞的特征：（1）细胞内水分减少，细胞萎缩，体积变小，但细胞核体积增大，染色质固缩，染色加深；（2）细胞膜通透性功能改变，物质运输功能降低；（3）细胞色素随着细胞衰老逐渐累积；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度减慢，新陈代谢减慢。3、癌细胞的主要特征：（1）无限增殖；（2）形态结构发生显著改变；（3）细胞表面发生变化，细胞膜上的糖蛋白等物质减少，易转移。【详解】A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，不会导致种群基因频率的改变，A错误；B、癌变的发生并不是单一基因突变的结果，具有累积效应，细胞至少要发生5-6处基因突变才能成为癌细胞，B正确；C、细胞凋亡是由基因决定的，但也受环境影响，C错误；D、减数第一次分裂后期，非同源染色体上的非等位基因自由组合可导致基因重组，D错误。故选B。【点睛】本题考查细胞的分化、细胞衰老、细胞凋亡和细胞癌变的相关知识，要求考生识记细胞分化的概念；掌握细胞衰老和个体衰老之间的关系；识记细胞凋亡的意义；识记细胞癌变的原因，能结合所学的知识准确判断各选项。2、C【解析】

分析系谱图，图示为某种单基因常染色体隐性遗传病的系谱图（用A、a表示），则Ⅰ-1和Ⅰ-3的基因型均为aa，Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的基因型均为Aa，Ⅲ-3的基因型及概率为1/3AA、2/3Aa。【详解】Ⅰ－2和Ⅰ－4都可能是纯合子AA或杂合子Aa，A错误；由于父亲是患者aa，所以Ⅱ－3和Ⅱ－4都肯定为杂合子Aa，B错误；已知Ⅱ－1、Ⅲ－1和Ⅲ－4都是纯合子AA，且Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4的基因型均为Aa，Ⅲ-3的基因型及概率为1/3AA、2/3Aa，则Ⅳ－1是杂合子Aa的概率=1/2×1/2=1/4，Ⅳ－2是杂合子Aa的概率=2/3×1/2=1/3，因此Ⅳ－1和Ⅳ－2基因型相同的概率=1/4×1/3+3/4×2/3=7/12，C正确；Ⅳ－1和Ⅳ－2结婚，后代患病的概率=1/4×1/3×1/4=1/48，D错误。【点睛】解答本题的关键是掌握基因的分离定律及其实质，能够根据遗传方式和表现型写出遗传图谱中相关个体的基因型，并结合题干要求进行相关的计算。3、B【解析】

蛋白质结构多样性决定功能多样性，有的蛋白质具有催化功能，如大多数酶是蛋白质；有的具有运输功能，如载体蛋白；有的具有调节机体生命活动的功能，如胰岛素，有的具有免疫功能，如抗体；核酸是遗传信息的携带者，对生物的遗传、变异和蛋白质的合成具有重要作用；酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，大多数酶的本质是蛋白质，还有少量RNA。【详解】A、蛋白质和核酸在高温条件下空间结构发生改变，所以两者在高温条件下都会发生变性，A正确；B、蛋白质的多样性与空间结构有关，而核酸的多样性主要与碱基的排列顺序有关，B错误；C、大多数酶的本质是蛋白质，还有少量RNA，所以二者都可以降低化学反应活化能，C正确；D、蛋白质的合成需要mRNA作为模板，氨基酸作为原料，核酸中的DNA的合成以DNA为模板，脱氧核苷酸为原料，RNA的合成以DNA为模板，核糖核苷酸为原料，蛋白质的合成和核酸的合成需要消耗能量和酶，D正确。故选B。【点睛】本题考查蛋白质和核酸之间的区别和联系，考生可以结合基因表达的知识对蛋白质和核酸进行综合分析。4、B【解析】

神经冲动的产生：静息时，神经细胞膜对钾离子的通透性大，钾离子大量外流，形成内负外正的静息电位；受到刺激后，神经细胞膜的通透性发生改变，对钠离子的通透性增大，钠离子内流，形成内正外负的动作电位。兴奋部位和非兴奋部位形成电位差，产生局部电流，兴奋传导的方向与膜内电流方向一致。

2、兴奋在神经元之间需要通过突触结构进行传递，突触包括突触前膜、突触间隙、突触后膜，其具体的传递过程为：兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将兴奋传递到下一个神经元。【详解】A、在生物体内，机体感受器产生的兴奋沿反射弧传导，即：感受器→传入神经→神经中枢→传出神经→效应器，兴奋在反射弧中的传导是单向的，所以在传入神经上也是单向传导的，A错误；B、神经纤维静息时，膜外Na+浓度高于膜内，K+浓度膜内高于膜外，兴奋时，膜上的Na+通道开放，Na+内流，形成动作电位，此时膜外Na+浓度仍高于膜内，B正确；C、神经纤维兴奋部位与未兴奋部位之间形成了电势差，兴奋以局部电流的方式沿神经纤维传导，C错误；D、兴奋在神经纤维上的传导需要消耗能量，D错误。故选B。【点睛】本题考查神经冲动的产生和传导，要求考生识记神经冲动的产生过程，掌握神经冲动在神经纤维上的传导过程及神经冲动在神经元之间的传递过程，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。5、C【解析】

生物种间关系有①共生、②寄生、③捕食、④种间竞争几种方式；生物群落的结构包括空间结构——垂直结构和水平结构；生物群落的演替是群落内部因素（包括种内关系、种间关系等）与外界环境因素综合作用的结果，人类活动往往会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行。【详解】A、根瘤菌与豆科植物是互利共生关系，A错误；B、小叶锦鸡儿灌木是种群层次，不具有群落才具有的垂直结构，B错误；C、小叶锦鸡儿是群落中的一种植物，参与其所在群落的演替过程，C正确；D、小叶锦鸡儿能使周围浅根系禾草及一二年生草本植物不能适应而退出群落，导致生态系统的稳定性降低，D错误。故选C。【点睛】本题考查种间关系、群落的演替和生态系统的稳定性，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，运用所学知识，准确判断问题的能力。6、A【解析】

特异性免疫包括体液免疫和细胞免疫，其具体过程如下：【详解】A、一种病原体含有多种抗原，一种抗原只能被一种抗体特异性识别，A错误；B、体细胞被感染后形成抗原-MHC复合体，这种复合体移动到细胞的表面，呈递出来，B正确；C、病原体侵入人体后由巨噬细胞处理抗原，形成抗原-MHC复合体，被T细胞识别，C正确；D、受体具有特异性，一个记忆B细胞膜上能与抗原特异性结合的受体只有一种，D正确。故选A。7、D【解析】

1、生物膜系统由细胞膜、细胞器膜和核膜组成，生物膜系统在组成成分和结构上相似，在结构和功能上联系，生物膜系统使细胞内的各种生物膜既各司其职，又相互协作，共同完成细胞的生理功能。2、细胞核的结构组成：（1）核膜：具有双层膜结构，功能上具有选择透过性的特点；（2）核孔：是细胞质与细胞核进行物质和信息交流的通道，是某些大分子的运输通道；（3）核仁：细胞核内折光性较强的结构，与某种RNA和核糖体的形成有关；（4）染色质或染色体：能够被碱性染料染成深色的物质，主要成分是蛋白质和DNA。【详解】A、罗伯特森认为生物膜的结构应为“蛋白质一脂质一蛋白质”，A错误；B、核糖体、中心体、纺锤体为细胞质中的结构，并非细胞核中的结构，B错误；C、伞藻嫁接实验操作的对象为不同部位（“假根”和“伞柄”），因变量为不同部位，并没有直接操作细胞核，所以不能得出与细胞核相关的结论，C错误；D、细胞内磷脂双分子层构成的生物膜，在结构和功能上紧密联系。构成了一个整体（即生物膜系统），D正确。故选D。8、C【解析】

分析图解：图中浓度为0的第一组属于对照组，根据与对照组的比较可知：在一定浓度范围内，激素类似物甲对微型月季生根具有促进作用，并且其最适浓度在10～50μmol/L范围内；而曲线中激素类似物乙的实验浓度对微型月季生根均具有抑制作用。【详解】A、由图可知，该实验中有两个自变量：生长调节剂的种类和浓度，A正确；B、在实验浓度范围内，各浓度的甲对生根数的影响均好于乙，B正确；C、图中不同浓度的生长调节剂甲作用下的生根数均高于不施用时的值，故只能体现其促进作用而不能体现其两重性；不同浓度的生长调节剂乙作用下的生根数均低于不施用时的值，故只能体现其抑制作用而不能体现其两重性，C错误；D、生长素类似物是指人工合成的，其有与生长素相似生理效应的物质，是植物生长调节剂的一类，在相对较低浓度范围内，浓度越高，甲促进生根的效果越好；在相对较高浓度范围内，浓度越高，甲促进生根的效果越差，与生长素的生理效应相似，所以甲可能是生长素类似物，D正确。故选C。【点睛】本题考查了探究植物生长调节剂对植物生根的影响的实验，根据对照实验的原则设计实验，需要考生理解生长素作用的两重性。二、非选择题9、抑制性②兴奋后会抑制①释放递质(神经)递质突触间隙(特异性)受体抑制(负)反馈痉挛【解析】

1、兴奋在神经纤维上的传导：以电信号的形式沿着神经纤维的传导，传导是双向的。2、兴奋在神经元之间的传递--突触（1）突触：神经元之间接触的部位，由一个神经元的轴突末端膨大部位--突触小体与另一个神经元的细胞体或树突相接触而形成。（2）过程：轴突→突触小体→突触小泡→神经递质→突触前膜→突触间隙→突触后膜（与突触后膜受体结合）→另一个神经元产生兴奋或抑制。（3）神经递质：是指神经末梢释放的特殊化学物质，它能作用于支配的神经元或效应器细胞膜上的受体，从而完成信息传递功能。（4）信号变化：①突触间：电信号→化学信号→电信号；②突触前膜：电信号→化学信号；③突触后膜：化学信号→电信号。（5）传递特征：单向传导。即只能由一个神经元的轴突传导给另一个神经元的细胞体或树突，而不能向相反的方向传导，这是因为神经递质只存在于突触小体中，只能由突触前膜释放，通过突触间隙，作用于突触后膜，引起突触后膜发生兴奋性或抑制性的变化，从而引起下一个神经元的兴奋或抑制。【详解】（1）根据题意可知，②产生的神经递质会抑制①释放神经递质而使③不能产生兴奋，说明②为抑制性神经元。其产生作用可能的机理是②产生兴奋后会抑制①释放递质。（2）图2中神经细胞①兴奋，传递至突触A处使其未梢释放的神经递质进入突触间隙，经过扩散与突触后膜上的特异性受体结合使神经元自产生兴奋，兴奋传递至突触B时释放化学物质引起突触后膜上Cl-通道打开，大量Cl-进入细胞①、②上的突触后膜，使①②神经元的静息电位增大，说明会抑制①②神经元产生兴奋；该过程是典型的负反馈调节机制。（3）破伤风杆菌产生的破伤风毒素可选择性阻止图2中细胞③释放神经递质，说明负反馈调节被阻断，患者的肌肉会持续兴奋而产生痉挛。【点睛】本题结合图解，考查神经冲动的产生及传导，要求考生识记神经冲动的产生过程，掌握兴奋在神经纤维上的传导过程及兴奋在神经元之间的传递过程，能根据图中和题中信息准确答题。10、用含放射性同位素的目的基因抗原—抗体杂交找到S基因核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物限制酶和DNA连接酶启动子、终止子、标记基因、复制原点S基因需要整合到细胞核中的DNA分子康复病人血清【解析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点第三步：将目的基因导入受体细胞第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。【详解】（1）利用探针检测病毒的原理是碱基互补配对，所以需要用含放射性的S基因作为探针，进行血清抗体检测的方法是抗原—抗体杂交。（2）选择性扩增S基因的技术是PCR技术，关键是找到S基因核苷酸序列，原因是根据这一序列合成引物。（3）步骤①是构建基因表达载体，需要限制酶和DNA连接酶，表达载体上有目的基因（S）基因，启动子、终止子、标记基因和复制原点。（4）基因要在细胞中稳定表达的关键是基因需要整合到细胞核中的DNA分子，随着核基因传递。（5）为检测通过基因工程表达出的S蛋白是否与病S蛋白有相同的免疫反应特性，而肺炎疫情中康复病人血清中含有抗体，所以可以用动物细胞中表达的S蛋白与肺炎疫情中康复病人血清进行抗体—抗原杂交实验。【点睛】本题以“新冠肺炎”为材料重点考查基因的检测，需要考生理解检测的方法进行解答。11、目的基因限制性核酸内切酶CaCl2潮霉素BD2保证基因的两条反向平行的链都做模板，且其上碱基序列不同表达再分化【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）用相同的限制性内切酶切割目的基因和质粒后露出相同的黏性末端再用DNA连接酶连接，从而构建基因表达载体，题中以草甘膦抗性基因作为目的基因。（2）依据图中信息，农杆菌用CaCl2处理后变成感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在含有标记基因表达的潮霉素培养基中筛选，从而获得含目的基因表达载体的农杆菌。（3）根据已知草甘膦抗性基因的部分序列以及双链DNA分子的结构特点（反向平行），再结合DNA复制（PCR中）的特点，即子链合成的方向是从5’到3’，应选择引物B、D进行PCR扩增。（4）为使基因的两条反向平行的链都做模板，而且其碱基序列不同，所以，PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计2种引物。（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否表达。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过再分化过程，获得转基因水稻。【点睛】本题主要考查基因工程的应用相关知识，识记和理解目的基因的获取、表达载体的构建以及目的基因的检测等知识是解答本题的关键。12、使植物细胞破裂将淀粉分解成糖酒精发酵酵母菌（用水）稀释增加通气性各种有机酸的标准溶液半乳糖醛酸筛选敏感相同的粘性末端温度