牛病毒检验具体操作方法指导操作者按本程序进行正确_第1页
牛病毒检验具体操作方法指导操作者按本程序进行正确_第2页
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文档简介

分发研发部[]质量管理部[]综合管理部[]生产管理部[]市场销售部[]财务部[]目规定牛检验的具体操作方法，指导操作者按本程序规定进行正确操适用范本程序包括检验的操作前准备、培养法和免疫荧光法的具体操作职操作者执行本程序，复核人复核具体操作，质量检定室负责监督本定无标《中民药典》三部现行材料及设供试品：阳性对照：牛腹泻、牛腺、牛细小、呼肠孤、狂犬病病细胞营养液（包括谷胺酰氨、抗生素、NaOH）400ml长成单层的二倍体细胞（MRC-5）、Vero、MBCK，1010ml、5ml、1ml36℃生物安全柜，使用前记录型号， 生物安全柜A级，为C级无操作程配制84液，方法参《1:250的84液配制程序供试品表面处后的对照、供试品、75%棉放入缓冲间 进入培养间，参见《进出洁净厂房程序》，供试品、培养基、灭 点燃灯加配制好的无营养液，4.5ml/瓶其中每种细胞的二瓶补加对照，1.5ml/瓶。六瓶补加供试品血余下的各两瓶接种相应的36℃培养21天，阳性对照出现病变，对照未出现，实验成立将上述接种供试品的每种细胞取2瓶进行血吸附检0.2～0.5%2～8℃3020～25℃30品检查结果均应为。将接种副流感的细胞做阳性对照。取培养21天后未病变的细胞瓶，消化后将细胞悬液滴到96孔细胞CO237℃培养过夜。PBS（0.01MpH7.2～7.4）滴加标记了荧光素的牛腹泻、牛腺、牛细小、呼肠孤、狂犬病、牛副流感单克隆抗体的直接荧光抗体，荧光显微镜下观察，细胞核和细胞浆不显示任何荧光灶，结果为滴加牛腹泻、牛腺、牛细小、呼肠孤、狂犬病、牛副流感抗或单克隆抗体，置密闭湿盒中37℃作用30～50分钟，取出飞片，弃去，用PBS反复冲洗数次，去离子水冲洗一次，自然晾干滴加与上述抗相应的荧光抗体，如抗免IgG荧光或抗鼠IgG荧，置密闭湿盒中37℃作用30～50分钟，取出飞片，弃去，用荧光显微镜下观察，细胞核和细胞浆不显示任何荧光灶，结果 注意事认真检

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