血液透析内毒素检测的意义详解演示文稿

血液透析内毒素检测的意义详解演示文稿第一页，共二十三页。（优选）血液透析内毒素检测的意义第二页，共二十三页。热原反应的相关因素透析器因素复用的透析器和血路管透析液和透析用水净化剂和消毒剂:次氯酸钠、双氧水、氢氧化钠等常用净化剂，对透析膜有腐蚀作用，会增大膜孔径甚至引起破膜；过氧乙酸是高效、广谱、速效的消毒剂，但其化学性质不稳定，消毒效果受配制浓度、储藏时间和室温的影响。透析机的消毒和使用:在需要连续工作十几个小时的状态下，两班之间往往人为忽略消毒程序的运行，有造成医源性交叉感染之嫌。患者自身因素:有些患者潜在感染，血液透析时血流动力学发生改变，加之肝素抗凝，容易造成局部感染扩散而在透析中出现寒颤、发热等症状。透析患者并发败血症，也表现为透析中高热、寒颤，而48％～72％的败血症是由血管通路感染引起的。第三页，共二十三页。内毒素检测的重要性因此，保证透析液微生物质量是对现代血液透析的基本要求。血液透析中对内毒素检测势在必行。使患者产生低血压，肌肉痉挛，头痛，发热等症状，严重的可导致休克。而长期内毒素刺激，会造成透析的长期并发症如腕管综合症和慢性炎症反应等。尤其是内毒素，由于其水解后可以穿过透析膜进入到患者的体内，导致急性热源性反应。使用被微生物污染的透析用水和透析液可引起患者的多种急、慢性并发症，直接影响患者的透析质量和生存质量，严重的甚至危及生命。第四页，共二十三页。▲

2005年8月卫生部颁布了委托中华医学会制定的《血液透析器复用操作规范》中明确规定：

水质要求：应定期检测复用用水细菌和内毒素的污染程度。内毒素含量不得超过2EU/ml，干预限度为1EU/ml。▲《中华人民共和国医药行业标准》YY0572-2005《血液透析和相关治疗用水》（ISO13959：2002，MOD）中明确规定：在水处理装置的输出端的细菌内毒素，应不得超过1EU/ml；在血液透析装置入口的输送点上的细菌内毒素不应得超过5EU/ml。▲《中华人民共和国医药行业标准》YY0598-2006《血液透析及相关治疗用浓缩物》（ISO13958：2002，MOD）中明确规定：浓缩物以细菌内毒素检查用水配成透析液后，透析液细菌内毒素含量应小于0.5EU/ml。国家相关标准解读

第五页，共二十三页。各国标准美国医疗仪器协会（AmericanAssociationofMedicalInstrument，AAMI/CDC）的标准：

细菌生长数：透析用水不超过200CFU/ml，透析液中不超过100CFU/ml。内毒素浓度：透析用水和透析液中不超过0.25EU/ml。德国肾病协会建议标准：

透析用水：细菌生长数和内毒素浓度分别不超过100CFU/ml、0.25EU/ml。透析液：细菌生长数和内毒素浓度分别不超过1000CFU/ml、0.5EU/ml。欧洲药典用水标准：

细菌生长数不超过100CFU/ml。内毒素浓度不超过0.25EU/ml。

第六页，共二十三页。内毒素的定义什么是内毒素？内毒素（Endotoxin,ET）是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分，其化学成分为脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS），由类脂A、核心寡聚糖O及多肽侧链组成。第七页，共二十三页。体内内毒素的来源菌体死亡或人工裂解革兰氏阴性杆菌的释放肠道内毒素的吸收败血症时血中细菌的释放外源性输入体内内毒素的来源第八页，共二十三页。

内毒素的作用机理LPSLPS-LBP（LPS结合蛋白）LPS-SCO14（细胞膜上的受体）信号传递信号传递CD14+细胞（Mф，PMN，单核核细胞）CD14－细胞（上皮细胞等）吞噬作用杀菌活性一级介质释放粘附分子表达→细胞反应第九页，共二十三页。TNF、IL-1IL-6、IL-8瀑布样反应，全身炎性反应综合症急性炎症PG、TXA、LTC、PAG、C5a、O2-、NO，弹力酶（二级介质）脓毒综合征（发热、低温、心动过速、尿少、酸中毒、低血压）DIC内毒素休克MOSF（多器官功能衰竭）死亡第十页，共二十三页。Shwartzman（什瓦茨曼现象）5内毒素的生物学效应

发热反应1白细胞反应2内毒素血症（ETM）与内毒素休克（ETS）3弥漫性血管内凝血（DIC）4第十一页，共二十三页。内毒素检测方法目前内毒素检测的方法主要有鲎试验自动化动力学方法化学发光法光纤维生物传感法毛细管电泳法ELISA结合免疫鲎试验法第十二页，共二十三页。

仪器简介北京金山川科技发展有限公司MB-80SMB-80VMB-80DMB-80EMB-80M第十三页，共二十三页。

MB－80微生物快速动态检测系统

天津一瑞生物工程技术公司生产第十四页，共二十三页。MB-80六大特点快速：1个小时完成检测动态：动态检测定量：定量检测灵敏：内毒素最低检测量1pg/ml防干扰：检测不受血中抗生素等的影响应用范围：血液透析液，透析用水,血液、尿液、脑积液、胸积液、腹水等

第十五页，共二十三页。

细菌内毒素

因子C 活化因子C

因子B 活化因子B

凝固酶原 凝固酶

凝固蛋白原凝固蛋白（凝胶鲎试剂与内毒素的反应机理

第十六页，共二十三页。仪器检测原理：

动态比浊法：

动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖），系统通过测定生物试剂与检测样品中抗原抗体反应生成浊度，采用动态比浊法，连续检测浊度的变化建立时间（T）与微生物含量（C）关系的标准曲线，通过光电转换原理，经软件系统分析得出具体检测值，得出检测样品中含内毒素含量。

第十七页，共二十三页。检测方法内毒素/葡聚糖定量测定

MB－80微生物快速动态诊断分析仪天津一瑞生物工程技术公司生产1.血液标本的处理：抽取新鲜肝素抗凝血2ml，0.1ml血浆加0.9ml血液前处理液，放70℃水浴10min，取出后备用。2.取鲎试剂一支加处理后的血浆0.2ml放混匀器上振荡30秒.3.放入检测器，1小时后报告结果。第十八页，共二十三页。内毒素检测的临床意义正常参考值：正常人血浆内毒素含量<10pg/ml。10-20pg/ml：不能确定有感染，为病变观察期，需根据病情连续监测2-3次才可确认。

第十九页，共二十三页。那种病人需要连续检测（1）检测值在10pg/ml—20pg/ml之间的病人，连续检测的目的是为最终确诊。（2）检测值在500pg/ml以上的病人，连续检测的目的是为防止脓毒血症的发生。（3）需要观察药物疗效的病人。（4）用常规方法难以确诊的病人。（5）有血液透析、血浆置换或介入治疗的病人。第二十页，共二十三页。内毒素检测的临床意义内毒素检测的临床意义革兰阴性菌败血症的诊断呼吸道感染肝脏感染及肝硬化胆道疾病急性胰腺炎溃疡性结肠炎细菌性感染的辅助性诊断、治疗和预后判断原因不明的发热外源性输注的内毒素血症的诊断第二十一页，共二十三页。1.革兰阴性菌败血症的诊断:

通过测定人血浆中的内毒素即可对G－菌所引起的临床菌血症及败血症进行确诊，而且对病原菌的分辨及各种感染症状治疗及预后判定都具有很大帮助。2.呼吸道感染：

由革兰阴性菌所引起的肺炎、胸膜炎及慢性支气管炎时，一般在血中的内毒素水平均较高。因此在综合诊治的情况下因该考虑内毒素在疾病中的作用，适当的应用拮抗内毒素的药物在减少死亡,降低并发症方面都是十分重要的。内毒素检测的临床意义第二十二页，共二十三页。3.肝脏感染甲肝：甲肝的内毒素血症发生率为58％，平均内毒素浓度为54.7pg/ml。在发病的前3周内毒素最低水平为37.7pg