明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则解读

背景资料检测方法方法学验证注意事项4月15日，央视《每周质量报告》栏目披露了国内部分医药生产企业使用皮革明胶制胶囊，空心胶囊铬超标，在社会上反响巨大。工业明胶违法用于生产药用明胶内幕：4月15日晚国家药监局发出紧急通知，要求对媒体报道的13个铬超标产品暂停销售和使用。待监督检查和产品检验结果明确后，合格产品继续销售，不合格产品依法处理。对违反规定生产销售使用药用空心胶囊的企业，将依法严肃查处。4月16日中检院组织召开《关于对部分胶囊剂产品开展监督抽验》的紧急会议，成立了以李云龙为组长的应急工作领导小组，成立了应急检验技术专家组，安排部署应急检验的具体事宜。

4月27日国家食品药品监管局在全国范围内对药用明胶和胶囊生产企业进行了全面排查，对18家药用明胶生产企业抽验了166批明胶，检出1批产品铬超标；对117家药用胶囊生产企业抽验了941批药用胶囊，检出15家企业74批胶囊铬超标，不合格率为7.9%。并责成相关省食品药品监管局依法从重从快处理严重违法企业。4月27日国家食品药品监管局发布第25号公告，药监局表示自2012年5月1日起，凡药用明胶、胶囊和胶囊剂药品生产企业必须对购进的原辅料和销售的产品逐品种、逐批次严格检验（具体要求已另文通知），否则不得生产和销售相关产品。胶囊壳分类硬胶囊软胶囊:成膜材料和内容物同时加工成产品(海藻酸盐、明胶)

明胶空心胶囊植物来源：主要是植物纤维素动物来源:明胶空心胶囊（VacantCapsules）系由胶囊用明胶加辅料制成的空心硬胶囊。由帽、体两节胶囊壳组成，可容纳各种药粉、液体、半固体和药片。可掩饰药物的异味，易于吞服，具良好的崩解能力，较长的保质期等优点。规格尺寸：从大到小依次为000#、00#、0#、1#、2#、3#、4#、5#等8种型号。主要原材材料：由由明胶、甘甘油、水水以及其其它的药药用材料料(TiO2)组成。明胶约占所有有原辅料料的90%以上）。。明胶是从从动物（（牛、马马、猪、、鱼、驴驴）的皮皮、骨、、腱、鳞鳞等含胶原蛋白白的组织织，经过酸、碱碱或酶水水解处理理以后降解解生成的的非均匀多多肽混合合物，由多种种氨基酸酸所组成成。明胶成分分：85～～90%蛋白质质，0.3%～～0.2%矿物物质，9%～12%水水分。外观近于于无色或者者呈淡黄黄色，为透明、、无特殊殊臭味的的固体，，分子量为为1.75-45万。。明胶的生生产和安安全性明胶：以以新鲜牛牛皮和猪皮为原料，，采用全全套不锈钢设备，严严格筛选选鲜骨皮，通过反反复洗浸浸、脱脂脂中和、、蒸煮液液化、灭菌过滤、浓浓缩烘干干等几十十道工序序流水线线制成。。生产出出的明胶胶为一种种无味、、无色（（略带浅浅黄色））、半透透明、坚坚硬的非非晶态物物，其不不溶于有有机溶剂剂，它吸吸水性强强、粘度高，明胶胶是肽分分子聚合合物质，，是胶原蛋白白质的水解解产物，，所以可可作为一一种添加加剂，它它可以直直接制成成浓汤、、肉皮冻冻子、水水晶冻、、色拉、奶油糖糖、巧克力、饮料等等供人们们食用。。工业明胶胶为无色色至淡黄黄色透明明或半透透明等薄薄片或粉粉粒。无无味，无无臭。在在冷水中中吸水膨膨胀。广广泛用于于纺织、、印刷、印染、塑料、、电子、国防、航空，，等工业业和部门门中。明胶(Gelatin）是胶原的水解产产物，是是一种无无脂肪的的高蛋白白，且不不含胆固醇，是一种种天然营营养型的的食品增稠稠剂。食用后后既不会会使人发发胖，也也不会导导致体力力下降。。明胶还还是一种种强有力力的保护护胶体，，乳化力力强，进进入胃后后能抑制制牛奶、、豆浆等等蛋白质质因胃酸酸作用而而引起的的凝聚作作用，从从而有利利于食物物消化。。铬的危害害皮革在工工业加工工鞣制时时使用含含铬的鞣鞣制剂，，会导致致铬残留留，使用用这种““蓝矾皮皮”加工工的工业业明胶，，重金属属铬的含含量一般般都会超超标。铬是一种种毒性很很大的重重金属，，容易进进入人体体细胞，，对肝、、肾等内内脏器官官和DNA造成成损伤，，在人体体内蓄积积具有致致癌性并并可能诱诱发基因因突变。。根据用途途分为三类：药用明明胶，食食用明胶胶和工业业明胶(照相明明胶)。。有关标准准胶囊用明明胶：《中国药药典》2010年版（（二部））（Cr:2.0mg/kg）Gelatin：EP7.0/BP2010（Cr:10ppm）USP34（Cr:没有规定定）JP16（Cr:没有规定定）药用明胶胶：QB2354-2005（Cr:2.0mg/kg）(QB:轻工行行业标准准)食品添加加剂明明胶：GB6783-94（A级：1.0mg/kg，B级：2.0mg/kg）食用明胶胶：QB/T4087-2010（（Cr:2.0mg/kg）工业明胶胶：QB/T1995-2005（Cr:没有规定定。用途：1，火柴柴的起火火剂；2，粘合合剂；3，电解解工业；；4，纺纺织工业业；5，，感光耐耐蚀膜；；）《中国药药典》2010年版（（二部））明胶空空心胶囊囊项下铬铬检查项项（P1204）取本品0.5g，置聚聚四氟乙乙烯消解解罐内，，加硝酸酸5~10ml，混混匀，浸浸泡过夜夜，盖上上内盖，，旋紧外外套，置置适宜的的微波消解解炉内，进行行消解。消解完完全后，，取消解解内罐置置电热板上缓缓加加热至红红棕色蒸蒸汽挥尽并近近干，用2%硝酸转转移至50ml量瓶中中，并用用2%硝硝酸稀释释至刻度度，摇匀匀，作为为供试品溶溶液；同法制制备试剂剂空白溶液液；另取铬铬单元素素标准溶溶液，用用2%硝硝酸稀释释制成每每1ml含铬1.0μμg的铬铬标准贮贮备液，，临用时时，分别别精密量量取铬标标准贮备备液适量量，用2%硝酸酸溶液稀稀释制成成每1ml含含铬0~80ng的对照品品溶液。。取供试品品溶液与与对照溶溶液，以以石墨炉炉为原子子化器，，照原子子吸收分分光光度度法（附录IVD第第一法），在357.9nm的波长处处测定，，计算，，即得。。含铬不不得过百百万分之之二（2mg/kg）。仪器原子吸收收分光光光度计（（含石墨墨炉原子子化装置置）电子天平平微波消解解仪电热板或或其他赶赶酸设备备，如：：恒温消消解仪、、赶酸器器等。试剂硝酸（优优级纯,国药集集团）铬单元素素标准溶溶液（1000µg/ml，，国家标标准物质质）检验样品品：胶囊剂（（由明胶胶空心胶胶囊壳装装载的胶胶囊）检验项目目：明胶空心心胶囊中中的铬检验所需需检品量量的参考考值：空心胶囊囊壳的制制备：参考附录录IE胶囊囊剂装量量差异项项（附录录8）具体制备备方法：：倾出胶胶囊剂的的内容物物，胶囊囊壳用棉棉棒或小小刷试净净（不得损坏坏囊壳），放置置，待用用。胶囊剂中中明胶空空心胶囊囊壳中铬铬的测定定方法：：铬标准贮贮备液的的制备：取铬单单元素标标准溶液液（1000µg/ml）），用2%硝酸酸稀释制制成每1ml含含铬1.0μg的铬标标准贮备备液(不得超过过一个月月)。标准溶液液的制备备：分别精精密量取取铬标准准贮备液液适量，，用2%硝酸溶溶液稀释释制成每每1ml含铬0~80ng的的对照品品溶液。。临用时现现配。胶囊剂中中明胶空空心胶囊囊壳中铬铬测定方方法(过夜)：供试品溶溶液的制制备：精密称称取本品品0.5g(胶囊整体体称重，，如1号号胶囊约约7个，，精密称称定)，置聚聚四氟乙乙烯消解解罐内，，加硝酸酸5~10ml，混混匀，浸泡过夜夜，盖上内内盖，旋旋紧外套套，置适适宜的微微波炉内内消解。。消解完完全后，，取消解解内罐置置电热板板上缓缓缓加热至至红棕色色蒸汽挥挥尽并近近干(1~2mL)，用2%硝酸酸转移至至50ml量瓶瓶中，并并加2%硝酸稀稀释至刻刻度，摇摇匀，作作为供试品溶溶液；同法制备备试剂空空白溶液液，作为为空白校校正。测定法： 取供供试品溶溶液与对对照品溶溶液适量量，以石石墨炉为为原子化化器，照照原子吸吸收分光光光度法法（《中中国药典典》2010年年版（二二部）附附录IVD第第一法，，标准曲线线法），在357.9nm的波长处处测定，，计算，，即得。。胶囊剂中中明胶空空心胶囊囊壳中铬铬新测定方方法(不不过夜)：取样品0.5g，置聚四四氟乙烯烯消解罐罐中，加加硝酸5ml，100℃℃30分分钟使溶解，，补加硝酸酸2ml，加水1mL，待冷却却至室温温，加0.5ml氢氢氟酸，进行第一次微微波消解解（参考程程序为10min升温温至120℃，，保持5min，10min升温至至140℃℃，保持15min）。。冷却放气气（无需完完全打开开消解罐罐盖，只只需扭松松即可））。随后后进行第二次消消解（参考程程序为10min升温温至150℃，，保持5min，10min升温至至185℃℃，保持15min）。。冷却后后，加热赶酸酸至1~2ml，2%硝酸酸溶液至至50ml，作为供试品溶溶液。同法制备备试剂空空白溶液液；另取铬铬单元标标准溶液液，用2%硝酸酸稀释制制成每1ml含含铬1.0ug的铬标标准储备备液，临用时，分别精精密量取取铬标准准贮备液液适量，，用2%硝酸溶溶液稀释释制成每每1ml含铬0~80ng的的对照品品溶液。。测定法：取供试品品溶液与与对照品品溶液适适量，以以石墨炉炉为原子子化器，，照原子子吸收分分光光度度法（《《中国药药典》2010年版（（二部））附录IVD第一法法，标准曲线线法），在357.9nm的波长处处测定，，计算，，即得。。线性：制备含铬铬的对照照品溶液液至少5份，浓度依依次递增增，最高高浓度吸吸收值应在0.8以下下，保证具具有较好好的线性性范围，，相关系数数（r））≥0.99。检测波波长：357.9nm。准确性：：应进行整个实验验过程的（包括括前处理理）方法法学回收收率验证证，暂定定回收率率应为80%-120%的范围内内。每波次测测定需进进行随行行回收试试验，每每10个个样品加加一个质质控样品品。2ppmLOQ:0.5ppm重复性取限度浓度度的标准品品溶液重复复测定5次，吸收收度（测定定值）的变变化范围（（RSD））不得过5%。定量限（LOQ）本方法定量量限应不低低于0.5mg/kg。消解：样品前处理理是试验中中的关键步步骤，既要要保证消解解完全，又又要保证消消解过程样样品中的铬铬不损失，，因此试验验中建议加加入10ml硝硝酸（优级纯）），并需要浸泡泡过夜后一一步消解/或不过夜二二步消解。参考消解程程序为：5min由由室温升至至120℃℃，维持3min；；6min由120℃升至150℃，，维持2min；6min由由150℃℃升至180℃，维持20min。为避免玻璃璃容器的干干扰，试验验中宜采用用塑料容量量瓶（聚丙烯材质质）定容。不同原子吸吸收仪试验验参数可能能不同，可可根据原子子吸收仪说说明书中推荐程序设设定测定参参数（国产参考考石墨炉升升温程序如如下：5s升温至100℃，，保持10s；5s升温至500℃，，保持10s；0s升温至2100℃℃，保持3s；0s升温至2200℃，保持2s）含钛白粉的胶胶囊壳（不透明胶囊囊）建议在微微波消解时时，样品中中除加硝酸酸外可另加加0.5ml氢氟酸，其他同供供试品溶液液制备，注意空白校校正和方法法学验证。实验用水：：应采用纯化水，储藏水的的容器宜用用聚乙烯塑塑料材料制制成，不宜宜选用玻璃璃容器长期期储存。试剂应采用用优级纯及以以上级别试试剂。试验中所用用容器及器器皿均需在在每次使用用前用盐酸酸溶液（浓浓盐酸：水水/1:1）浸泡1h，再用用硝酸溶液液（浓硝酸酸：水/1:1）浸浸泡1h，，再用纯化水水冲洗干净净后使用。。微波消解解容器应采采用仪器清清洗程序清清洗，不得采用铬酸清清洗液洗涤容器。。可供选择的的铬元素标标准溶液（（1000µg/mL）由国家有色金金属及电子子材料分析析测试中心心提供（电话话传真真：010-82