月季的花药培养

练习：小麦高杆（D）对矮杆（d）为显性，抗锈病（T）对不抗锈病（t）为显性，现有高杆抗锈病和矮杆不抗病的两种纯合体，如何快速获得矮杆抗锈病的纯种？

高杆抗锈病（DDTT）×矮秆不抗锈病（ddtt）

F1：的基因型和表现型

a各种配子的种类

a

↓符合要求的单倍体的基因型

良种的基因型表现型

单倍体育种方法的主要优点是

。1可以明显缩短育种年限2后代为纯合子↓P：DdTt，高秆抗锈病DT，Dt,dT,dtddTT矮秆锈病杂交花药离体培养DT，Dt,dT,dt↓秋水仙素处理月季的花药培养花中皇后月季又称“月月红”，自然花期5至11月，开花连续不断，通常扦插就可以成活。

一、基础知识（一）被子植物的花粉发育花药花丝柱头花柱子房雄蕊雌蕊胚珠1.被子植物的花的结构：花药的结构花粉囊药隔花粉囊花粉被子植物子房的结构胚珠的结构卵细胞极核子房壁珠被珠孔2.植物的双受精作用：花雄蕊雌蕊花药花粉粒精子精子子房胚珠胚囊子房壁珠被卵细胞两个极核受精卵受精极核胚胚乳种皮种子果皮果实有丝分裂有丝分裂1n1n2n1n3n2n2n2n2n胚是一个新个体的幼体4.发育结果（胚芽胚根子叶胚轴）花粉管细胞核生殖细胞核花粉发育过程图小孢子母细胞花粉母细胞4个小孢子减数分裂小孢子四分体时期单核居中期单核靠边期双核期____分裂__个精子2有丝_____分裂有丝营养细胞单核期生殖细胞小孢子母细胞小孢子花粉囊花药花粉粒（双核期）成熟花粉思考：：1.一个小小孢子母细细胞产生几几个精子？？1个4个4个4个8个花粉管细胞核生殖细胞核花粉发育过过程图小孢子母细细胞花粉母细胞胞4个小孢子子减数分裂小孢子四分体时期单核居中期期单核靠边期期双核期____分裂__个精子子2有丝_____分裂有丝营养细胞单核期生殖细胞思考：：2.如果生生殖细胞完完成分裂，，则一个成成熟的花粉粉粒含几个个细胞核？？3个①花粉粒类类型一个成熟的的花粉粒即为为雄配子体：二核花粉粒粒:成熟的花粉粉粒中，只只含花粉管管细胞核和和生殖细胞胞核。（精精子在花粉粉管中形成成）三核花粉粒粒:有些植物的的花粉，在在成熟前，，生殖细胞胞进行一次次有丝分裂裂，形成两两个精子，，这样的花花粉在成熟熟时，含有有一个营养养核和两个个精子。知识拓拓展②营养养细胞胞在花花粉萌萌发过过程中中的作作用：：控制花花粉的的萌发发并提提供营营养1、关关于被被子植植物花花粉发发育的的说法法，不不正确确的是是（））A、花花粉粒粒是在在花药药中的的花粉粉囊里里形成成的B、被被子植植物精精子的的形成成是直直接减减数分分裂的的结果果C、被被子植植物的的花粉粉的发发育要要经历历四分分体时时期、、单核核期、、双核核期等等阶段段D、花花粉粒粒在发发育过过程中中，核核先位位于细细胞一一侧，，再移移到细细胞中中央BD一、基基础知知识（二））产生生花粉粉植株株的两两种途途径阅读P38教材材内容容，说说出产产生花花粉植植株的的两种种途径径及原原因1.产产生花花粉植植株的的两条条途径径2.产产生花花粉植植株具具有两两条途途径的的原因因：花粉花粉丛芽丛芽移栽脱分化化诱导胚状体体愈伤组组织分化再分化化生根主要取取决于于培养养基中中的种类类及其其的配比比。激素浓度体细胞胞类似合子发发育成成的胚胚的结构构（具有有胚根根、胚胚芽、、胚轴轴等结结构））体细胞胞胚植物组组织培培养过过程中中单倍体体性细细胞花粉胚胚知识拓拓展①胚状体体②胚状状体的的结构构及其其发育育过程程与种种子相相似植株，，植株株，一般般高度度。分化胚状体丛芽再分化化愈伤组织丛芽2.花花粉植植株的的特点点？思考考：3.花花粉植植株弱弱小，，高度度不育育，是是否就就没有有利用用价值值？用于单单倍体体育种种技术术，可可明显显缩短短育种种周期期，培培育纯纯合新新品种种。1.分分化和和再分分化？？单倍体体弱小不育（类似似种子子中的的胚））（三））影响响花药药培养养的因因素月季的的为MS培培养基基一、基基础知知识阅读教教材P38—39页页，找找出哪哪些因因素能能够影影响花花药的的培养养？1、材材料的的选择择2、培培养基基的组组成植物的的种类类亲本植植株的的生理理状况况花粉的的发育育期亲本植植株生生长条条件、、材料料的低低温预预处理理、接接种密密度等等3、其其他因因素（）（）花期早早期单核居居中期期与靠靠边期期之间间为什么么不选选择使使用单单核期期之前前或之之后的的花药药接种种？想一想想单核期期之前前的花花药，，质地地幼嫩嫩，极极易破破碎。。单核期期之后后的花花药，，花瓣瓣已有有些松松动，，又给给材料料的消消毒带带来困困难。为什么么花瓣瓣松动动会给给材料料的消消毒带带来困困难？？想一想想为了挑挑选到到单核核期的的花药药，选择什什么样样的材材料？该材材料还还有什什么优优点？？花瓣松松动后后，微微生物物就可可能侵侵入到到花药药，给给材料料的消消毒带带来困困难。。菌少、、易消消毒。完全未未开放放花蕾蕾材料的的选取取实验操操作的的流程程包括括：（一））____________；（二））____________；；（三））____________。。材料的的消毒毒接种和和培养养二、实实验操操作1．选选择花花药时时一般般通过过____确定定花粉粉发育育时期期，此此时需需要对对花粉粉细胞胞核进进行染染色，，最常常用的的染色色剂是是_________和和___________，，它们们分别别可以以将细细胞核核染成成____色和和_____色色。2．在在使用用焙花花青－－铬钒钒溶液液时，，需要要首先先将花花药用用______________处理理20min。。该试试剂的的配制制方法法是将将__________________按体体积比比为_______的比比例混混合均均匀。。（一））材料料的选选取焙花青青-铬铬矾活动1：阅读““（一一）材材料的的选取取”，，回答答下列列问题题：镜检醋酸洋洋红蓝黑红卡诺氏氏固定定液无水酒酒精与与冰醋醋酸3：1（二））材料料的消消毒活动2：阅读““（二二）材材料的的消毒毒”，，填写写下列列流程程图：：花蕾（_______）清洗吸干水水分消毒2～4min冲洗3～5次浸泡约约30s（______）（__________）（____________）（_______）70%酒精精无菌吸吸水纸纸无菌水水无菌水水1%氯氯化汞汞溶液液1%次次氯酸酸钙溶溶液饱和漂漂白粉粉溶液液1%氯氯化汞汞溶液液说明：：用于培培养的的花药药，实实际上上多数数未熟熟，由由于它它的外外面有有花萼萼、花花瓣或或颖片片保护护，通通常处处于无无菌状状态，，所以以只要要将整整个花花蕾或或幼穗穗消毒毒即可可。想一想想月季花花蕾的的消毒毒与菊菊花外外植体体的消消毒相相比较较，二二者有有何不不同？？在酒精消毒前前，花药不需需要预先用流流水冲洗、洗洗衣粉洗涤和和软刷刷洗。。（三）接种和和培养活动3：阅读“（三））接种和培养”，回答下列问题题：1．剥取花药药：消毒后的的花蕾，要在在______条件下除除去花萼、花花瓣。2．接种花药药：剥取的花花药要立刻接接种到______上。。每个培养瓶瓶接种______个花花药。3．培养：花花药培养利用用的培养基是是______培养基，，pH为______，温度为______℃，幼苗形成成之前（需要要、不需要））光照。无菌培养基7～10MS5.825√（三）接种和和培养活动3：阅读“（三））接种和培养”，回答下列问题题：4．培养20－30d后后，花药开裂裂，长出______或或释放出______。前者还要转转移到________上进行分分化培养成再再生植株；后后者要尽快______________________并转移移到新的培养养基上。5．通过愈伤伤组织形成的的植株，常常常会出现____________的变化，因因而需要鉴定定和筛选。愈伤组织胚状体分化培养基在花药开裂后将幼小小植株分开染色体组数目目剥取花药时，，一是注意不不要损伤花药药，原因是___________________________；二是要要彻底除去花丝，原原因是________________________________________。想一想在花药培养基基中，用量最最高的激素是是_____；在诱导丛芽芽或胚状体培培养基中，用用量最高的激激素是________________；在在诱导生根的的培养基中，，用量最高的的激素是______________。BA（细胞胞分裂素）IAA（生长长素）IAA（生长素）与花丝相连的的花药不利于于愈伤易从受伤部位位诱导出非花花粉愈伤组织织组织或胚状体体的形成为什么通过愈愈伤组织形成成的植株会发发生染色体倍倍性的变化？？主要原因是营营养核和生殖殖核融合造成成的。想一想1、选材是否否恰当2、无菌技术术是否过关3、接种是否否成功选材是否成功功是花药培养养成功的关键键。如果出现了污污染现象，说说明某些操作作步骤，如培培养基灭菌、、花蕾消毒或或接种等有问问题。如果接种的花花药长出愈伤伤组织或释放放出胚状体，，花药培养的的第一步就成成功了。要适适时转换培养养基，以便愈愈伤组织或胚胚状体进一步步分化成再生生植株。三、结果分析析与评价植物组织培养养技术与花药药培养技术的的异同点：项目相同点不同点植物组织培养技术培养基配制方法、无菌技术、接种操作、培养的基本过程（离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽）等基本相同。外植体为体细胞，染色体数无需加倍。花药培养技术取材及培养基组成等要求更严。培养的结果为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，才能获得正常可育的个体。知识拓展知识拓展被子植物花粉粉发育过程中中的四分体时时期是指4个单倍体细胞胞连在一起的的时期；减数分裂过程程中的四分体体时期是指同同源染色体配配对后，一对对同源染色体体含有四条染染色单体的阶阶段。被子植物花粉粉发育过程中中的四分体时时期与减数分分裂过程中的的四分体时期期的含义1、月季花药药培养时的花花粉粒最好是是（））A、四分体时时期B、单核居中中期C、单核靠边边期D、二核或三三核花粉粒C练一练2、关于花药药培养产生花花粉植株的途途径，下列叙叙述错误的是是()A．花粉可通过过愈伤组织发发育成植株B．花粉可通过过胚状体进一一步分化成植植株C．主要由培养养基中激素的的种类及用量量决定途径D．产生胚状体体是花药离体体培养中特有有的途径D3、关于月季季的花药培养养技术与菊花花的组织培养养技术的不同同，下列说法法不正确的是是()A．花药培养需需发育时期适适宜的花蕾B．花药培养对对培养基配方方的要求更为为严格C．培养基配制制方法完全不不同D．花药裂开后后长出的愈伤伤组织或释放放的胚状体要要及时换培养养基C4、下面是被子植植物花粉发育育过程的简略略表示，请回回答：小孢子母细胞胞→①→②→③③→双核期(1)①是指________时期，由小孢孢子母细胞经经________分裂形成。(2)