《生物化学实验》课程教学大纲

《生物化学实验》课程教学大纲一、课程基本情况课程代码：1061149029课程名称：生物化学实验/ExperimentofBiochemistry课程类别：专业基础课开课学期：第3学期总学分：1.5总学时：24实验/实践学时：24适用专业：生物技术适用对象：本科先修课程：无机及分析化学、有机化学、普通生物学开课学院：环境工程与化学学院二、课程简介《生物化学实验》是生物技术专业本科生的一门重要的专业技术基础课,通过本课程的学习,使学生加深理解生物化学的理论知识，熟练掌握生物化学实验的原理、基本实验操作技术和研究生物大分子的基本方法，树立实验室工作的安全意识，掌握规范化的实验操作要领；培养学生的分析解决问题的能力和创新意识,使其具备一定的科学实验能力及严格认真的科学素养，为生物化学理论知识和基本操作技能在生命科学领域的研究和应用工作打下比较牢固的基础。三、课程教学目标1．课程对毕业要求的支撑指标点3.2掌握基因、蛋白质、细胞等操作的基本原理及方法，具备相关的实验技能。指标点6.2具备准确采集、整理实验数据，对实验结果与实际问题进行关联分析和讨论，获取合理有效的结论。指标点9.2能够充分理解个人、成员和团队之间的相互关系与团队协作的意义和作用。2.课程教学目标（1）掌握与生产实践相关的生化检测的实验原理，熟练掌握分光光度法、层析法、电泳法、离心法等基本操作技能和基本实验原理。（2）能够运用生物化学知识解释实验现象并分析实验数据，掌握实验报告的正确书写，为能够顺利实现在本领域就业奠定基础。（3）能够对实践过程的生化现象进行解释和分析，具有一定的实验室安全和创新意识，并能够充分理解个人、成员和团队之间的相互关系与团队协作的意义和作用。3.主要教学内容与课程教学目标之间的对应关系课程教学目标教学内容教学方法目标1：掌握与生产实践相关的生化检测的实验原理，熟练掌握分光光度法、层析法、电泳法、离心法等基本操作技能和基本实验原理.蛋白质盐析和沉淀的基本原理及其一般操作步骤与流程，酶的特性以及影响因素，仪器设备如离心机、分光光度计、电泳的规范操作，琼脂糖凝胶板的制作，薄板的制板。1.理论讲授2.启发式教学3.操作指导目标2：能够运用生物化学知识解释实验现象并分析实验数据，掌握实验报告的正确书写，为能够顺利实现在本领域就业奠定基础。标准曲线的绘制，糖、脂、蛋白质三大物质的提取及含量测定，酶液的制备与酶促反应，琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶，薄层层析法转氨酶活性的鉴定，并能够正确分析实验数据和撰写规范的实验报告。1.启发式教学2.案例分享3.翻转课堂与讨论4.操作指导目标3：能够对实践过程的生化现象进行解释和分析，具有一定的实验室安全和创新意识，并能够充分理解个人、成员和团队之间的相互关系与团队协作的意义和作用。实践过程中生化现象的解释与分析，并遵守实验规则和实验室安全制度，有毒药品的规范使用以及实验过程中小组成员之间的协作和友爱。1.理论授课2.操作指导3.案例分享与讨论4.教学视频四、教学内容及重难点实验一蛋白质的沉淀反应与等电点的测定实验目的：1、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识2、掌握沉淀蛋白质的几种方法及变性与沉淀的关系3、学习测定蛋白质等电点的一种方法实验内容及步骤：1、蛋白质的盐析作用2、乙醇沉淀蛋白质3、有机酸沉淀蛋白质4、重金属盐沉淀蛋白质5、生物碱试剂沉淀蛋白质6、酪蛋白等电点的测定实验所需主要设备及材料：材料及试剂：鸡蛋、硫酸铵、醋酸铅、硫酸铜、三氯乙酸、黄基水杨酸、醋酸、鞣酸、酪蛋白。实验二酶的特性实验实验目的：理解酶催化的高效性、特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响实验内容及步骤：1、酶催化的专一性2、温度对酶活力的影响3、pH对酶活力的影响4、激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验所需主要设备及材料：设备：恒温水浴（37℃）、沸水浴（100℃）、冰浴（0℃）、试管、吸管。材料及试剂：唾液淀粉酶溶液、蔗糖酶溶液蔗糖溶液、纯蔗糖、淀粉、班乃德试剂、碘液、磷酸缓冲液、CuSO4•5H2O溶液、NaCl。实验三双缩脲法测定蛋白质含量实验目的：1、掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理和方法2、掌握分光光度计的使用方法实验内容及步骤：1、标准曲线绘制2、37oC水浴3、分光光度计测定吸光度4、样品测定实验所需主要设备及材料：设备：分光光度计、恒温水浴箱、试管、试管架材料及试剂：新鲜血清或新鲜蛋清、标准蛋白溶液、双缩脲试剂、NaOH实验四总糖与还原糖的测定实验目的：1、掌握分光光度计的分析原理、操作步骤及使用范围，并能熟练运用分光光度计测定溶液中物质的含量（标准管法和标准曲线法）。2、掌握3，5-二硝基水杨酸法测定还原糖含量的方法实验内容及步骤：1、样品中还原糖的提取2、样品中总糖的提取3、葡萄糖标准曲线绘制4、还原糖和总糖含量的测定实验所需主要设备及材料：设备：水浴锅、分光光度计材料及试剂：DNS、NaOH、酒石酸钾钠、亚硫酸钠、葡萄糖、浓盐酸、碘、碘化钾、酚酞、乙醇。实验五植物叶片衰老过程中过氧化脂质含量的变化实验目的：1、掌握丙二醛含量测定的基本原理和方法2、理解脂质过氧化作用实验内容及步骤：1、材料的采样及处理2、样品的制备3、样品的脂质过氧化处理4、样品中丙二醛吸光度的测定实验所需主要设备及材料：设备：分光光度计、水浴锅材料及试剂：新鲜植物叶片、硫代巴比妥酸、三氯乙酸实验六琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶实验目的：1、学习和掌握琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶的原理2、掌握用琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶的方法实验内容及步骤：1、琼脂糖凝胶板的制作2、点样及电泳3、显色4、固定实验所需主要设备及材料：设备：水平电泳槽、电泳仪、冰箱、恒温培养箱、移液枪材料及试剂：血清、巴比妥钠、巴比妥、琼脂糖、乳酸钠、氯化氮蓝四唑、氧化性辅酶Ⅰ、吩嗪硫酸甲酯实验七薄层层析板的制备及转氨酶活性鉴定实验目的：1、掌握薄层层析板的制备2、掌握薄层层析法鉴定转氨酶活性的实验原理和操作3、理解转氨酶的作用实验内容及步骤：1、酶液的制备2、酶促反应3、薄板的制板4、点样5、展层实验所需主要设备及材料：设备：恒温培养箱、电炉、烘箱、离心机、层析缸材料：绿豆芽子叶及胚轴或鸡的肝组织、碘乙酸、磷酸缓冲液、蔗糖、ɑ-酮戊二酸、三氯乙酸、正丁醇、乙酸、茚三酮、丙酮。五、实验项目及学时安排序号实验项目名称实验学时实验类型实验要求每组人数备注1蛋白质的沉淀反应与等电点的测定2验证性12酶的特性实验4验证性23双缩脲法测定蛋白质含量4综合性24总糖与还原糖的测定4综合性25植物叶片衰老过程中过氧化脂质含量的变化4设计性25、6选其一6琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶4设计性25、6选其一7薄层层析板的制备及转氨酶活性鉴定6设计性3合计24六、考核方式与评分标准1.课程考核方式本课程成课程总成绩按优（90以上）、良（80-89）、中（70-79）、及格（60-69）和不及格（59以下）五个等次评定。总成绩包括形成性评价和结果性评价，形成性评价：包括学习习惯（5%）、课前预习提问(5%)，实验操作过程(10%)、实验报告撰写情况(20%)。结果性评价：期末考核（60%）。2.课程教学目标的考核方式序号课程教学目标考核内容考核方式1掌握与生产实践相关的生化检测的实验原理，熟练掌握分光光度法、层析法、电泳法、离心法等基本操作技能和基本实验原理，生化检测的基础理论和知识，仪器设备的规范操作及注意事项，琼脂糖凝胶板的制作，薄板的制板。课前预习提问，课堂操作过程，实验报告撰写，期末考核2能够运用生物化学知识解释实验现象并分析实验数据，掌握实验报告的正确书写，为能够顺利实现在本领域就业奠定基础。标准曲线的绘制，糖、脂、蛋白质三大物质的提取及含量测定，酶液的制备与酶促反应，琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶，薄层层析法转氨酶活性的鉴定等实验项目的实验操作技能及结果的识别和判断。课前预习提问，实验报告撰写，期末考核3能够对实践过程的生化现象进行解释和分析，具有一定的实验室安全和创新意识，并能够充分理解个人、成员和团队之间的相互关系与团队协作的意义和作用。对实践过程中生化现象做出合理的解释与分析。课堂操作过程，课堂预习提问，期末考核3.成绩评定标准评价细则考核环节考勤与课前预习提问实验操作过程以及实验报告撰写期末考核优秀（90-100分）每节课按时出勤，通过课前预习能够很详细了解实验原理和实验过程，对老师提出的问题回答完整，并有自己独到的见解。实验过程中操作仔细规范，小组分工明确，实验结果准确可靠；实验报告内容完整充实，书写工整规范，实验结果描述准确，并结合实验过程中的出现的问题进行有效的分析和讨论。实验操作技能考试规范、熟练，能准确地判断实验结果的有效性，理论考试成绩在90-100分为优秀。良好（80-90分）出勤率较好，通过课前预习能够详细了解实验原理和实验过程，能够运用所学知识和理论回答老师提出的问题。实验操作过程中仔细认真，操作规范，小组分工明确，实验结果可靠；实验报告内容完整，书写规范，实验结果描述准确，简单对实验结果进行分析和讨论。实验操作技能考试基本规范，熟练，可判断实验结果的有效性，理论考试成绩在80-90分为良好。中等（70-80分）有迟到现象（三次以内），基本掌握实验课程中涉及的实验原理和操作技术，基本能够运用所学知识和理论回答老师提出的问题但不够完整，但在老师的引导下能够补充完整。实验操作过程中仔细认真，操作规范性不够，小组分工明确，实验结果基本可靠；实验报告内容完整，书写规范，实验结果描述准确，未对实验结果进行分析和讨论。实验操作技能考试基本规范但不太熟练，对于实验结果不能准确判断，理论考试成绩在70-80分为中等。及格（60-70分）有迟到现象（三次以上），不能很好的掌握实验课程中涉及的实验原理和操作技术，在老师的引导下才能够回答老师提出的问题。实验操作过程中不严谨，操作规范性不够，小组分工不明确，实验结果不准确；实验报告内容不完整，书写不规范，实验结果描述不清楚，且存在明显问题。实验操作技能不够规范和熟练，不能判断实验结果，理论考试成绩在60-70分为及格。不及格（＜60分）缺课次数较多，无预习，不了解实验流程不能掌握实验课程中涉及的实验原理和操作技术。实验操作过程中有明显敷衍现象，实验报告内容不完整，实验结果存在严重错误或报告全文抄袭迹象明显。不能有效进行实验操作技能考试，理论考试成绩在60分以下为不及格。七、教学资源实验指导书、参考