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文档简介

实验二、大肠杆菌的分离鉴定及生化实验山东农大禽病学实验室2011年04月22日目的要求熟悉选择和鉴别培养基的原理了解大肠杆菌的主要培养特性熟悉掌握大肠杆菌生理生化特性鉴别培养大肠杆菌沙门氏杆菌麦康凯培养基红色菌落无色或浅黄色菌落SS琼脂培养基红色菌落浅黄色菌落伊红美兰琼脂培养基紫红色或紫黑色并带有金属光泽菌落粉红色菌落三塘铁培养基斜面和深层均为红色斜面为红色；深层为黄色；若产生H2S，为黑色培养基类别菌种术式

两试管斜面移植时，左手斜持菌种管和被将接种琼脂斜面管，使管口相齐，管底放在拇指和食指间，松动两管棉塞，将管口进行火焰灭菌，使其靠近火焰，将接种环深入管内，现在无菌生长的培养基上接触使之冷却，再挑取少量的细菌后，拉出接种环，立即伸入另一管斜面培养基上，勿碰到斜面和管壁，直达斜面底部，从底部开始划曲线，向上到斜面顶端，管口火焰灭菌，塞好棉塞，接种完毕。接种环火焰灭菌后，放下接种棒最后在斜面管壁上注明日期、接种者。置370C，温箱培养结果判定鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润药敏试验方法：取一菌种，用灭菌的接种环致密划线于琼脂表面（可重复来回划线），用无菌镊子，将各种抗菌药物圆纸片，分别贴于培养基表面。各片距离相等，370C，24h后，观察结果。结果判定抑菌直径（mm）敏感性>20极敏感15-20高敏感10-14中敏感<10低敏感0不敏感生化实验——糖发酵试验结果：培养液不变色----无变化（—）陪养液变为黄色----产酸（+）培养液变黄并有气泡----产酸产气（+）生化实验—硫化氢实验结果：培养基变黑为阳性，不产生黑色为阴性。大肠杆菌为阴性，沙门氏菌为阳性生化实验—硝酸盐还原实验结果：再加试剂甲、乙各2滴，在30S内

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