微生物各论第十一章等used

第十一章支原体/霉形体

(Mycoplasma)夏春中国农业大学动物医学院预防兽医学2012.04.27AM10:10p2281霉形体（Mycoplasma）

霉形体又译作支原体，是一类无细胞壁的细菌，是目前已知能在无生命的培养基中繁殖的最小微生物。2概述

霉形体又称支原体(望梅止渴)；是一类无细胞壁的原核单细胞微生物；多形性，能通过细菌滤器，是目前所知的能够在无生命人工培养基中生长繁殖的最小微生物。基因组小（0.58-1.35Mb），含有DNA和RNA，二分裂或芽生方式繁殖；GC含量低（E.coli1/5）。3一、主要特征⑴缺乏细胞壁；三层结构C膜，C外胞浆膜。⑵在固体培养基上形成“煎荷包蛋”状菌落；⑶能通过200-450nm的细菌滤器；⑷基因组富含A、T；⑸在任何条件下不能回复为具有细胞壁的细菌.

（与L型细菌/Amp有本质上的区别

）4无细胞壁，故具有多形性和滤过性。常呈球状、两极状、环状、杆状和丝状，球状细胞直径在300nm以内。革兰氏染色呈阴性。姬姆萨染色呈淡紫色。C膜1,形态染色52,培养特性营养要求较高

培养基中除基础营养外，需牛心浸液，酵母膏，辅酶I、氨基酸等，有的需要加10％-20％的动物血清。为抑制细菌生长，常加入青霉素、醋酸铊、叠氮钠等药物。培养时间较长

在琼脂培养基(1-1.5%)上孵育2-6d，才长出低倍显微镜下可见的

微小菌落（10-600m）。培养条件有氧生长良好，但用固体培养基基分离培养时，在5％CO2和95％N2的环境中，生长为佳。适宜温度为36℃。菌落特征典型菌落呈“煎荷包蛋状”。可在鸡胚卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长，也能在细胞培养中生长。6生长缓慢，菌落呈“荷包蛋状”（猪肺炎霉形体除外），菌落中心深入培养基中，致密、色暗；周围长在培养基表面，较透明。73,生理生化特性

根据对糖类分解能力，分为两群。一群能分解多种糖类产酸不产气，称发酵型。另一群不能分解糖，称为非发酵型，但能利用精氨酸作为碳素和能量来源。某些菌株在含血液的培养基中其菌落周围可形成β型或α型溶血。禽败血支原体、肺炎支原体的菌落能吸附禽类红细胞。“附红细胞体”84，抗原与分型主要抗原：膜蛋白、类脂

交叉很少、签定

ELISAPCR95、生态自生热原体是严格自生共生专性厌氧的厌氧原体栖息于牛羊瘤胃内寄生

支原体广泛寄生于人体、动物和植物。多种支原体能侵染人类和畜禽的消化道、呼吸道、泌尿生殖道和关节等部位，引起各种炎症和流产、不育等。支原体的粘附能力相当强，营粘附式“外寄生”，很少侵染到血液和组织内。106,抵抗力支原体对理化因素敏感。对热敏感。对醋酸铊、结晶紫等有较强的抵抗力。

对青霉素、先锋霉素有抵抗作用；对影响蛋白质合成的抗生素敏感:如泰乐菌素、强力霉素、红霉素、支原净等。117,微生物学诊断分离培养 将无污染病料用液体培养基稀释，稀释至10-5-10-6，37℃培养2-7d。初代培养未发生颜色变化时可盲目传代2-3次。初代分离时在含有5％-10％CO2的环境中生长更佳。

固体培养基接种后须置高湿环境培养。生理生化性状测定 毛地黄苷敏感性测定、葡萄糖、精氨酸分解试验。直接镜检意义不大12血清学鉴定

生长抑制试验(GIT)

支原体在固体培养基上生长可被相应的抗血清所抑制，常用圆纸片法。表面免疫荧光法(ep-IF)

用已知抗血清制成荧光抗体，直接染色琼脂块上的支原体菌落，在荧光显微镜下观察菌落的特异性荧光。代谢抑制试验(MIT)

支原体的代谢活性可被相应的抗血清抑制。常用的有精氨酸、脲酶代谢抑制试验以及发酵抑制试验。13一、禽类支原体根据病原性差异，可将禽支原体分为三组：明显具有病原性

鸡毒支原体

M.gallisepticum;

慢性呼吸道疾病（CRD),难以根除新城疫（ND）,E.coli

继发具有N毒素。p237

滑液支原体M.synoviae;

火鸡支原体M.meleagridis。

在某些情况下具有致病性的支原体鸡支原体、鸭支原体、莱氏无胆甾原体、尿原体

和鹅支原体；14二、猪支原体猪肺炎支原体

（M.hyopneumoniae）猪地方流行性肺炎.“猪喘气病”猪鼻支原体

小猪呼吸道，特别是鼻腔的正常寄居菌，某些条件下能从肺组织中发现，主要是起继发性病原菌作用。猪滑液支原体

引起关节炎其他动物支原体，如牛、羊、马、实验动物等15二、猪支原体猪肺炎支原体

（M.hyopneumoniae）猪地方流行性肺炎.“猪喘气病”猪鼻支原体

小猪呼吸道，特别是鼻腔的正常寄居菌，某些条件下能从肺组织中发现，主要是起继发性病原菌作用。猪滑液支原体

引起关节炎其他动物支原体，如牛、羊、马、实验动物等16猪肺炎支原体

（M.hyopneumoniae）猪地方流行性肺炎.“猪喘气病”17三、嗜血支原体

附红细胞体（Eperythrozoon）嗜血巴通体（Haemobartonella）

16SrRNA与肺炎支原体密切；新定为嗜血支原体。附红细胞表面、昆虫媒介、多无临床症状。猪、犬、附红细胞体，猫血巴通体更名为猪支原体、犬血支原体、猫血支原体。p24018

附红细胞体（Eperythrozoon）嗜血巴通体（Haemobartonella）

自身性免疫病、贫血Romanovsky-type蓝紫色吖啶橙19附红细胞体（Eperythrozoon）嗜血巴通体（Haemobartonella）PCR法

20第十二章立克次体与衣原体p243立克次体和衣原体都是专性细胞内寄生的原核微生物，结构及繁殖方式与细菌类似，生长要求类似病毒。介于细菌与病毒之间的微生物。21

立克次体首先由美国医师HowardTaylorRicketts发现，为纪念他在研究斑疹伤寒时不幸感染而献身，故以他的名字命名。22第一节立克次体（Rickettsia）

立克次体是一类严格细胞内寄生、介于细菌和病毒之间的原核细胞型微生物。主要寄生于节肢动物，以其为传播媒介。许多成员对动物和人有致病性传染.

如Q热、斑疹伤寒、恙虫病等。23共性

1.多数为专性细胞内寄生、以二分裂方式繁殖；

2.含有RNA和DNA3.多形，G-,大小介于细菌和病毒之间；

4.节肢动物作为寄生宿主，或储存宿主，或同时为传播媒介。

5.多种抗生素敏感等。24一、生物学特性

1.多形性，主要是球杆状。2.大小介于细菌和病毒之间，多数不能通过细菌滤器。3.革兰氏阴性，有细胞壁4.专性细胞内寄生5.以二分裂方式繁殖6.对理化因素抵抗力不强，尤对热敏感7.主要寄生于节肢动物中，通过叮咬感染人和动物25电镜26二、培养特性

大多数只能在活的宿主细胞内生长

（严格的真核细胞内寄生）。

立克次体酶系统不够完整，必须依赖于宿主细胞提供

ATP、辅酶I、辅酶A、NAD等才能生长繁殖。

（书：罗沙利马体和巴通体可以在培育基中生长）

常用的培养方法有动物接种：豚鼠、大鼠、小鼠

鸡胚（卵黄囊）接种：传代

细胞培养

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三、抗原结构

立克次体有两种主要抗原：

群特异性抗原和型特异性抗原

1.群特异性抗原—脂多糖：为可溶性抗原，耐热，与细胞壁表面的粘液层有关；

2.型特异性抗原—外膜蛋白：为颗粒性抗原（外膜），不耐热，与细胞壁成分有关。28动物的淋巴细胞，红色的是寄生的立克次氏体四、诊断防治

菌血症、血管内皮细胞坏死。1、特异性预防接种灭活疫苗2、灭虱、蚤、螨、鼠和注意个人卫生3、治疗用广谱抗生素4、磺胺类药物能刺激立克次体生长29五、微生物学诊断

一）病原检查

1.将病料制成血片或组织抹片，染色镜检或荧光抗体法检查；

2.病料培养后，利用荧光抗体技术、血清中和实验或补体结合实验等。二）抗体检查

1.特异性试验可应用可溶性抗原和/或颗粒性抗原进行补体结合试验和/或凝集试验。

2.非特异性试验：魏-斐二氏反应（Weil-Felixreaction)30第二节衣原体（Chlamydia）

一类能通过细菌滤器、严格细胞内寄生，并经独特发育周期的原核细胞型微生物。

P25231一、主要特性1.革兰氏阴性，圆形或椭圆形；2.含DNA和RNA以及核糖体；3.具有由黏肽组成的细胞壁，其结构和组成类似于

G-，但细胞壁酸缺少或只含微量；4.有较复杂的、能进行一定代谢活动的酶系统，但

不能合成带高能键的化合物，须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源，必须在活细胞内生存；5.具有独特的发育周期，并以二等分裂方式繁殖，形成包涵体。6.对许多抗生素、磺胺药敏感，能抑制生长。32二、生物学特征（一）形态结构与发育周期

在光学显微镜下可见到两种不同的颗粒衣原体：

1.较小的称元体（EB）/原体：直径约为0.3μm，卵圆形，电子密度大，是有感染性的形态。有致密的类核结构，有胞壁，发育成熟。

Giemsa-紫色，Macchiavello-红色，无繁殖能力，胞外稳定性强。（马基维洛）

2.较大的称为网状体(RB)

：直径约0.5-0.3μm，呈圆形或不规则形，电子密度较小，是无感染性形态，也称为始体。体大电子致密度较低，无胞壁。Macchiavello-蓝色。代谢活泼，以二分裂方式繁殖。胞外稳定性弱。333.包涵体：

指在易感细胞内含增殖的网状体和子代元体的空泡。由于发育时期不同，包涵体的形态和大小都有差别。成熟的包涵体含有大量的元体。

含有繁殖型始体和子代原体的膜包裹吞噬体或胞浆吞噬泡称为衣原体包涵体。34

姬姆萨染色油镜10×100见到一个大单核细胞，胞浆内有球形和椭圆形的包涵体——衣原体衣原体包涵体Giemsa染色衣原体包涵体荧光显示包涵体含糖原，被碘液染为棕褐色35（二）培养特性

对衣原体的培养目前仍只能用鸡胚（鸭胚）或细胞培养及动物接种3种方法。（三）抵抗力

1.衣原体对热、脂溶剂和去污剂以及常用的消毒药

液均十分敏感。

2.对煤酚类化合物及石炭酸等一般较能抵抗。

3.

对利福平、四环素、红霉素、磺胺敏感;

对青霉素不敏感

治疗选用利福平、强力霉素等36

其中较重要的衣原体有：

1.沙眼衣原体

2.鹦鹉热亲衣原体;“鸟疫”

3.牛羊亲衣原体

4.肺炎亲衣原体三、分类人肺炎37四、所至疾病流产综合症衣原体肺炎反刍动物衣原体肠道感染衣原体性