细胞工程1(一轮复习)课件

细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过

水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。细胞细胞器植物细胞工程主要技术1、植物组织培养2、植物体细胞杂交动物细胞工程1、动物细胞培养2、动物细胞核移植3、动物细胞融合4、单克隆抗体植物细胞工程的理论基础是：植物细胞的全能性

原因：每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质及发育为完整个体所必需的全部基因（1）细胞的全能性大小与

有关。（2）细胞全能性大小的比较：a受精卵生殖细胞体细胞

b植物细胞动物细胞

c全能干细胞多能干细胞专能干细胞细胞分化程度植物组织培养成功条件：

形态：适宜的培养基成分：无菌条件离体适宜的温度和光照（培养后期）固体无机盐，有机营养（蔗糖），琼脂，激素（生长素和细胞分裂素）分裂方式：有丝分裂（遗传物质不改变）繁殖方式：无性繁殖植物体细胞杂交的过程原生质体制备（酶解法去细胞壁）原生质体融合

再生细胞壁，形成杂种细胞杂种植株（终点）纤维素酶、果胶酶等物理法：离心、振动、电刺激等化学法：聚乙二醇等试剂（PEG）2N4C植物组织培养2N+4C2N+4C问题：1、植物体细胞杂交过程中，所依据的生物学原理

是：

。2、原生质体融合成功的标志是

，

与此有关的细胞结构有等。3、若两二倍体细胞杂交，培育出杂种植物变异类型：染色体组数：是否可育：是否为新物种：4、若两二倍体的花药细胞杂交，培育出杂种植株，以上结果如何？染色体变异6可育是细胞膜具有流动性和细胞的全能性再生细胞壁，形成杂种细胞高尔基体、线粒体二、作物新品种的培育1、单倍体育种、基因工程育种、

植物体细胞杂交2、突变体的利用-----组织培养过程中不断发生细胞分裂，易诱导突变）3、细胞产物的工厂化生产-----愈伤组织阶段）例：紫草素、人参皂甙等2、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：（1）①表示

，它能被培养成为④的根本原因是：

，原理是

。（2）②表示

，它与①相比分化程度

，全能性

。（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号）

。（4）若①是花药，则④是

植株，继续对其使用

处理可获得

正常植株，该过程属于

育种方式。离体的植物器官、组织或细胞含有本物种的全部遗传信息植物细胞的全能性愈伤组织低高③单倍体秋水仙素纯合单倍体3、下图是植物体细胞杂交示意图，请据此回答：(1)图中完成植物体细胞融合的过程是(填编号)________。(2)图中④过程是_________，⑤过程是_________，

④⑤过程合称___________。(3)图中①过程用到的酶是_______________，作用的结果是形成_________。除去细胞壁的原因是：____________________________。(4)在②过程中，可用的化学诱导剂是_________，①①②③脱分化再分化植物组织培养纤维素酶和果胶酶原生质体细胞壁阻碍了原生质体的融合聚乙二醇_____3、下图是植物体细胞杂交示意图，请据此回答：（5）若在容器中放置若干a和b结构，诱导完成且假设所有细胞都发生了融合，然后经③过程，形成的d细胞的类型有_________种(这里仅考虑2个原生质体的相互融合)，从中选出_________进行培养。(6)c细胞的形态是______________________。(7)e称为_________，f称为_________，该植株具有_____________。(8)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？3杂种细胞正在进行原生质体融合愈伤组织杂种植株双亲遗传物质不遵循。因为只有生物进行有性生殖的过程中，才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体细胞杂交育种的过程属于无性生殖动物细胞工程1、动物细胞培养2、动物细胞核移植3、动物细胞融合4、单克隆抗体（一）动物细胞培养转入培养瓶内培养（贴壁生长长成单层细胞。有接触抑制现象）。1、动物细胞培养的过程原代培养（10代）传代培养（10-50代）能否用胃蛋白酶?细胞悬液胰蛋白酶处理取出组织胚胎或幼龄动物器官组织剪碎单个细胞+培养液转入培养瓶内培养1、贴壁生长2、细胞的接触抑制（细胞株、细胞系）3、植物组织培养和动物细胞培养的比较植物体培养结果获得细胞或细胞分泌蛋白培养目的葡萄糖动物血清蔗糖植物激素液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖细胞的全能性原理比较项目大量相同细胞植物体快速繁殖、培育无病毒植株细胞增殖动物细胞培养植物组织培养培养结果培养目的培养基特有成分培养基性质原理比较项目4、动物细胞培养的应用1）大规模生产有价值的细胞产品2）转基因动物的早期培养3）检测有毒物质4）生理、病理、药理研究供体细胞培养（MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期去核的卵母细胞供体细胞注入去核卵母细胞激活受体细胞，完成分裂、发育胚胎移植代孕牛子宫克隆牛3、过程：1、该过程用到了哪些生物技术？问题1、该过程用到了哪些生物技术？核移植细胞培养胚胎移植2、该过程体现了什么原理？细胞核的全能性3.取卵母细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,且营养丰富①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育②保护濒危物种，增加存活数量③克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白④器官的移植4、应用前景：⑤医学研究，了解胚胎发育及衰老过程以及疾病的发展及治疗（三）动物细胞融合与单克隆抗体

荧光标记的鼠细胞和人细胞融合示意图不同DNA的两个细胞灭活病毒诱导细胞融合融合后的细胞进行有丝分裂1、动物细胞融合过程2、概念（杂交细胞）:

指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞（也称：杂交细胞)的过程.4、融合方法：物理法：离心、振动、电激等化学法：聚乙二醇（PEG）生物法：灭活的病毒3、原理：----利用细胞膜的流动性6、用途：

主要用于诱导形成杂交瘤细胞，制备单克隆抗体5、优点:

打破物种间的生殖隔离,使远缘杂交成为可能6、植物体细胞杂交与动物细胞融合比较主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性植物体细胞杂交比较项目动物细胞融合细胞融合的原理诱导方法用途单克隆抗体由能产生特定抗体的单个B淋巴细胞克隆成细胞群这群细胞产生的化学性质单一、特异性强的抗体。1、产生抗体的途径如何？2、传统制备抗体的方法是？3、传统制备抗体的缺点是？回忆复习：杂交细胞灭活的病毒等手段小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞经免疫的小鼠提取第二次筛选能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞杂交瘤细胞第一次筛选用特定的选择性培养基体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体问题1、B淋巴细胞的优点？2、骨髓瘤细胞的优点？3、杂交瘤细胞的特点？4、单克隆抗体的特点？5、可否用已免疫的B淋巴细胞培养，获得单克隆抗体？既能无限增殖，又能产生抗体特异强，灵敏度高不能，高度分化细胞，不能增殖能分泌特异性抗体能无限增殖“生物导弹”：6、单克隆抗体的应用:1）作为诊断试剂：2）用于治疗疾病和运载药物在单克隆抗体上带上抗癌药物制成5、单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、可大量制备1．下列用动物细胞工程技术获取单克隆抗体的实验步骤中，正确的是（多选）A．将抗原注人小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤

细胞C．用灭活的病毒作诱导剂，促使B淋巴细胞

与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需

抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体ACD2．将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选）A.B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖

B.B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能

产生抗体C.骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体

D.骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增

殖AC3．“白菜—甘蓝”杂种植株是将白菜与甘蓝的原生质体进行融合得到杂种细胞，再经组织培养而获得的。对此下列说法不正确的是（多选）A．培育出的“白菜—甘蓝”植株不能结籽B．该培育过程不遵循孟德尔的遗传定律C．培育过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减

数分裂等过程D．动物细胞融合技术与上述培育过程所应用的

基本技术完全相同ACD15、下列属于单克隆抗体在实践上应用的实例是（多选）A．将抗药菌的某基因引入小鼠细胞内B．培育成功转基因抗虫棉C．利用免疫毒素清除异体骨髓移植中的供体骨髓T细胞D．制成“生物导弹”，将药物定向地带到癌细胞所在部位CD17.对下列有关实例形成的原理的解释，错误的是（多选）A、无子番茄的获得是利用了多倍体育种的原理B、多莉羊的获得是利用了杂交育种的原理C、单克隆抗体的制备是利用了细胞融合的原理D、抗虫棉的获得是利用了基因突变的原理ABD下图是制备单克隆抗体过程，回答：1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得

______细胞，该细胞能够产生__________。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。B淋巴特异性抗体特定抗原2)鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过______（有丝/减数）分裂方式大量繁殖。细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？______；要观察融合后的细胞中的染色体形态、数目,可用一定浓度的_______处理。有丝加倍龙胆紫4）制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从___（器官）细胞中采集。用于筛选杂交瘤细胞的是特定的______培养基。3）B过程是一个__________过程，该过程的进行需要灭活的_______或________的诱导。细胞融合病毒聚乙二醇脾脏选择5）单克隆抗体是指__________________________________在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_____________________________。特异性强、灵敏度高,并可大量制备能产生化学性质单一,特异性强抗体某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风