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文档简介

药学微生物基础教案授课内容:

第九章常用血清学试验上课时间:2006年月日授课人:汪穗福任教班级:2005级班课时:课型:教学媒体:药学微生物基础教案授课内容:1教学目标:1、熟记抗原、抗体、变态反应、疫苗、凝集反应、沉淀反应等基本概念;2、理解并掌握抗原的基本特征、构成条件、特异性;抗体基本结构、产生规律;四种变态反应的特点及防治;常用疫苗及其优缺点;3、熟练掌握凝集试验、沉淀反应、免疫标记技术等几种常用的血清学试验的理论知识及相关操作;4、了解抗原、抗体、各类变态发应、几种血清学试验与医药学的关系,在医学中的作用。教学重点、难点:1、免疫学相关定义概念、特点2、几个易混淆的知识点的比较:抗体与Lg、五种Lg、四种变态反应、死疫苗与活疫苗等。3、几种常用的血清学试验的原理4、相关知识和实验操作与医药学的联系教学目标:2内容概述第一节免疫基础知识

1.抗原与抗体

1.1抗原1.2抗体2.变态反应3.疫苗3.1传统疫苗3.2新型疫苗第二节血清学试验

1.凝集试验2.沉淀试验3.免疫标记技术内容概述第一节免疫基础知识第二节血清学试验31.1.1抗原的概念及基本特征

抗原(Ag):是一类能刺激机体的免疫系统引起特异性免疫应答,产生抗体和(或)致敏淋巴细胞,并能在体内或体外与之发生特异性结合的物质。

免疫原:(抗原性)

反应原性:抗原的基本特性抗原刺激机体免疫系统引起特异性免疫应答,产生抗体和(或)致敏淋巴细胞的特性。抗原能与相应的免疫应答产物(抗体或致敏淋巴细胞)发生特异性结合的特性。1.1.1抗原的概念及基本特征抗原(Ag):4抗原的分类免疫原性反应原性分子量、结构例子完全抗原有有较大、较复杂大多数蛋白质和病原微生物等半抗原/不完全抗原无有较小(一般小于4000)、简单青霉素、磺胺等化学药物

半抗原/不完全抗原:单独存在只有反应原性而无免疫原性的物质。

完全抗原:兼有免疫原性和反应原性的抗原,是由载体和半抗原两部分组成,前者赋予抗原以免疫原性,后者赋予抗原以反应原性。

两者关系:两者通属抗原,半抗原与蛋白质载体结合就可成为完全抗原。抗原的分类免疫原性反应原性分子量、结构例子完全抗原有51.1.2构成抗原基本的条件

①异种物质:如病原微生物

异物性

②同种异体物质:A型血的红血细胞是B型血的抗原;③自身隐蔽成分解除隐蔽状态或在某种因素下变性物质:

如晶状体蛋白外伤后

抗原必须是非己的异物抗原的分子量一般在10000以上a.一般分子量越大抗原性越强b.天然蛋白质分子量都在10000以上复杂的表面结构:一般是抗原的抗原决定簇,才能刺激机体的免疫系统a.明胶的分子量105,结构简单,抗原性弱b.胰岛素分子量只有5734,表面结构中含芳香族氨基酸,故具有免疫原性表面化学结构复杂的大分子胶体1.1.2构成抗原基本的条件6胰岛素结构胰岛素结构71.1.3抗原的特异性抗原的特异性:指抗原诱导机体产生免疫应答及与免疫应答产物发生反应均具有专一性。即特定抗原只能刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞,且仅能与该特异性抗体或致敏淋巴细胞发生反应。特异性是免疫应答最基本的特点,也是免疫学防治和诊断的理论基础。决定抗原特异性的物质基础是抗原决定簇。1.1.3抗原的特异性抗原的特异性:指抗原诱导机体产生8抗原决定簇----免疫细胞识别的“标志”作用原理:当抗原进入机体后免疫细胞通过它与抗原结合,并产生有特异性的抗体,特异性抗体又通过抗原决定簇和抗原发生特异性结合。种类:很多,一个抗原也可以有多个抗原决定簇特异性抗原——其特有的刺激机体

特异性抗体共同抗原——其它物质共有的刺激机体共同抗体存在部位:抗原分子表面组成:由5~15个氨基酸残基、5~7个多糖或核苷酸残基组成。抗原决定簇----免疫细胞识别的“标志”作用原理:当抗原进入9交叉反应含有共同抗体的血清不但能和特异性抗原反应,也能与共同抗原发生反应。生物学意义:①某些情况下,针对病原微生物的免疫应答可导致对人体的免疫损伤②在进行特异性免疫学诊断或鉴定时,必须排除共同抗原可能产生的干扰。交叉反应含有共同抗体的血清不但能和特异性101.1.4医学上重要的抗原1、病原微生物:病毒、细菌的抗原既有特异性抗原,也有共同抗原。如O抗原、H抗原、表面结构抗原等

2、外毒素和类毒素加0.3%~0.4%甲醛外毒素:本质为蛋白质,抗原性很强,刺激机体抗毒素抗体类毒素:没有毒性而保持抗原性的,刺激机体抗毒素,能预防由外毒素引起的传染病

来源:类毒素免疫动物后,动物血清中大量抗毒素,即是1.1.4医学上重要的抗原1、病原微生物:病毒、细菌113、动物免疫血清用途:临床上用于相应疾病的特异性治疗和紧急预防4、同种异型抗原:指同一种属个体之间存在的不同的抗原物质。利:中和人体内相应的外毒素,发挥抗体作用弊:异种动物蛋白,致敏,发生变态反应(血清病)双重性红细胞血型抗原,包括ABO血型及Rh血型抗原白细胞抗原(HLA),也称组织相容性抗原人体中3、动物免疫血清用途:临床上用于相应疾病的特异性治疗121.1.4医学上重要的抗原隐蔽抗原的释放:某些器官或组织,如脑、眼晶状体、睾丸等,正常情况下不与免疫细胞接触的成分感染、外伤等,释放入血液或淋巴系统如:甲状腺球蛋白、眼球晶状体蛋白、精子5、自身抗原:指能诱导机体发生自身免疫应答的自身组织成分自身物质的结构改变:自身组织细胞感染、烧伤、辐射、药物等分子结构发生变化形成新的抗原决定簇如:某些人服用甲基多巴后,可引起自身免疫性溶血1.1.4医学上重要的抗原隐蔽抗原的释放:某些器官或136、异嗜性抗原:指与血缘无关,存在于人、动物、植物和微生物之间的性质相同的共同抗原。a.其中任一抗原所诱发的抗体可与其它类抗原发生交叉反应b.有些病原微生物与人体组织的异嗜性(共同)抗原可引起免疫性疾病7、其它:肿瘤细胞、药物、化学物质、植物花粉等6、异嗜性抗原:指与血缘无关,存在于人、动物、植物和微生物之14(二)抗体

1、抗体的概念抗体(Ab)是机体在抗原刺激下产生的,能与抗原发生特异性结合的具有免疫活性的球蛋白。因为抗体主要存在于血清中,故习惯又称之为抗血清或免疫血清。1964年世界卫生组织(WHO)专门会议决定,将具有抗体活性或者化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白(Ig)。所有的抗体都是免疫球蛋白,但是少部分异常免疫球蛋白不具抗体的生物活性,即免疫球蛋白并非都是抗体。(二)抗体

1、抗体的概念抗体(Ab)是机体在抗原刺激下产生15Ig的基本结构

(1)Ig分子的基本结构每个免疫球蛋白的单体都是由4条多肽链通过链间二硫健连接而成。其中有两条链每条约含450个氨基酸残基称重链(H链);另两条链每条约含214个氨基酸残基称轻链(L链)。两条H链由链间二硫健连接呈“Y”字形,两条L链由二硫健对称地连接在两条H链N末端的两侧。Ig的基本结构(1)Ig分子的基本结构每个免疫球蛋白的单16Ig的基本结构

N端:氨基端每个Ig单体有两个端C端:羧基端

Fab段:靠近N端H链的1/2和一个完整的链通过链间二硫健构成

F(ab’)2:两个Fab段通过H链间的二硫健连接成

Fc段:靠近C端两条H链的1/2合称

a.部位:肽链的N端(L链的1/2与H链的1/4)可变区b.特征:氨基酸的种类和排列顺序随抗体特异性不同而变化(V区)c.功能:是抗体和抗原发生特异性结合的部位a.部位:肽链的C端(L链的1/2和H链的3/4)稳定区b.特征:氨基酸的种类和排列顺序较稳定(C区)c.功能:使Ig具有抗原性及激活补体、活化K细胞、增强吞噬细胞的吞噬能力等功能。每条肽链的两个区三个片断Ig的基本结构17免疫球蛋白的种类

根据其重链抗原性的不同分:IgGIgE

血清型IgAIgA

分泌型IgA(SIgA)-双体(含两个基本结构)IgDIgM-五聚体(由5个Ig基本结构通过J链聚合而成)人类免疫球蛋白单体(只含一个基本结构)免疫球蛋白的种类根据其重链抗原性的不同分:人类免疫球蛋白单18IgG

IgG

IgM

IgAIgDIgEIgG

IgG

IgMIgAIgDIgE19种类分子量(万)分布作用IgG16存在于血清中,占血清Ig总量的75%~80%,能通过胎盘。①具有抗菌、抗毒素、抗病毒活性;②通过胎盘,使胎儿被动获得母体免疫力;③参与Ⅱ、Ⅲ型变态反应。IgA17~39①血清型IgA存在于血清中,占血清Ig总量的10%~20%;②分泌型IgA存在于黏膜及分泌液中。①血清型IgA有抗菌、抗病毒作用;②分泌型IgA(SIgA)在呼吸道、消化道黏膜等局部有抗菌、抗病毒作用。IgM90存在于血清中,占血清Ig总量的6%左右,形成最早,但消失较快。①最早发挥抗菌、抗病毒、中和毒素作用,并且效能高,但作用时间短;②参与Ⅱ、Ⅲ型变态反应。IgD17存在于血清中,占血清Ig总量的0.2%功能不清。IgE20存在于血清中,占血清Ig总量的参与Ⅰ型变态反应。五类Ig主要特性

种类分子量(万)分布203、抗体产生的一般规律

意义:可以指导预防接种。一般需两次或两次以上进行疫苗或类毒素接种,可起到加强免疫的效果。初次应答

2.再次应答

a.相同抗原再次进入时,潜伏期大大缩短(2-3天)b.抗体产生量大幅上升,种类主要为IgGc.维持时间长再次应答产生的抗体多且快,与体内记忆细胞有关。抗原初次进入机体后,需经一定的潜伏期(1-4周)才能产生抗体,而且抗体效价低,持续时间短,免疫作用不强。抗体产生的顺序也有一定规律,即IgM产生最早,IgG产生稍晚。3、抗体产生的一般规律意义:可以指导预防接种。一般需两21抗体变态反应课件22抗体变态反应课件23布置作业:1、解词:抗原、异嗜性抗原、抗体、2、构成抗原的条件有哪些?抗原的特异性指什么?3、初次应答和再次应答有何区别?有什么指导意义?

布置作业:1、解词:抗原、异嗜性抗原、抗体、24抗原的两种基本性能是---和----。半抗原的特点是(

)A.

大分子B.

通常是多肽C.

本身无免疫原性D.仅能刺激B细胞活化E.

只能与载体结合才能与相应抗体反应抗原的两种基本性能是---和----。25抗体变态反应课件26选择题(在下列备选答案中选取一个正确答案,将其序号填在括号里)1、再次应答时抗体产生的特点是()A.IgM抗体显著升高B.产生快,维持时间长C.潜伏期长D.浓度低E.亲和力低2、初次应答时抗体产生的特点是()A.潜伏期短B.抗体亲和力高C.抗体维持时间短D.抗体含量高E.以IgG为主3、再次应答时抗体产生的特点不包括()A.潜伏期短B.抗体亲和力高C.抗体维持时间长.以IgM类抗体为主E.迅速产生大量IgG类抗体选择题(在下列备选答案中选取一个正确答案,将其序号填在括号里27药学微生物基础教案授课内容:

第九章常用血清学试验上课时间:2006年月日授课人:汪穗福任教班级:2005级班课时:课型:教学媒体:药学微生物基础教案授课内容:28教学目标:1、熟记抗原、抗体、变态反应、疫苗、凝集反应、沉淀反应等基本概念;2、理解并掌握抗原的基本特征、构成条件、特异性;抗体基本结构、产生规律;四种变态反应的特点及防治;常用疫苗及其优缺点;3、熟练掌握凝集试验、沉淀反应、免疫标记技术等几种常用的血清学试验的理论知识及相关操作;4、了解抗原、抗体、各类变态发应、几种血清学试验与医药学的关系,在医学中的作用。教学重点、难点:1、免疫学相关定义概念、特点2、几个易混淆的知识点的比较:抗体与Lg、五种Lg、四种变态反应、死疫苗与活疫苗等。3、几种常用的血清学试验的原理4、相关知识和实验操作与医药学的联系教学目标:29内容概述第一节免疫基础知识

1.抗原与抗体

1.1抗原1.2抗体2.变态反应3.疫苗3.1传统疫苗3.2新型疫苗第二节血清学试验

1.凝集试验2.沉淀试验3.免疫标记技术内容概述第一节免疫基础知识第二节血清学试验301.1.1抗原的概念及基本特征

抗原(Ag):是一类能刺激机体的免疫系统引起特异性免疫应答,产生抗体和(或)致敏淋巴细胞,并能在体内或体外与之发生特异性结合的物质。

免疫原:(抗原性)

反应原性:抗原的基本特性抗原刺激机体免疫系统引起特异性免疫应答,产生抗体和(或)致敏淋巴细胞的特性。抗原能与相应的免疫应答产物(抗体或致敏淋巴细胞)发生特异性结合的特性。1.1.1抗原的概念及基本特征抗原(Ag):31抗原的分类免疫原性反应原性分子量、结构例子完全抗原有有较大、较复杂大多数蛋白质和病原微生物等半抗原/不完全抗原无有较小(一般小于4000)、简单青霉素、磺胺等化学药物

半抗原/不完全抗原:单独存在只有反应原性而无免疫原性的物质。

完全抗原:兼有免疫原性和反应原性的抗原,是由载体和半抗原两部分组成,前者赋予抗原以免疫原性,后者赋予抗原以反应原性。

两者关系:两者通属抗原,半抗原与蛋白质载体结合就可成为完全抗原。抗原的分类免疫原性反应原性分子量、结构例子完全抗原有321.1.2构成抗原基本的条件

①异种物质:如病原微生物

异物性

②同种异体物质:A型血的红血细胞是B型血的抗原;③自身隐蔽成分解除隐蔽状态或在某种因素下变性物质:

如晶状体蛋白外伤后

抗原必须是非己的异物抗原的分子量一般在10000以上a.一般分子量越大抗原性越强b.天然蛋白质分子量都在10000以上复杂的表面结构:一般是抗原的抗原决定簇,才能刺激机体的免疫系统a.明胶的分子量105,结构简单,抗原性弱b.胰岛素分子量只有5734,表面结构中含芳香族氨基酸,故具有免疫原性表面化学结构复杂的大分子胶体1.1.2构成抗原基本的条件33胰岛素结构胰岛素结构341.1.3抗原的特异性抗原的特异性:指抗原诱导机体产生免疫应答及与免疫应答产物发生反应均具有专一性。即特定抗原只能刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞,且仅能与该特异性抗体或致敏淋巴细胞发生反应。特异性是免疫应答最基本的特点,也是免疫学防治和诊断的理论基础。决定抗原特异性的物质基础是抗原决定簇。1.1.3抗原的特异性抗原的特异性:指抗原诱导机体产生35抗原决定簇----免疫细胞识别的“标志”作用原理:当抗原进入机体后免疫细胞通过它与抗原结合,并产生有特异性的抗体,特异性抗体又通过抗原决定簇和抗原发生特异性结合。种类:很多,一个抗原也可以有多个抗原决定簇特异性抗原——其特有的刺激机体

特异性抗体共同抗原——其它物质共有的刺激机体共同抗体存在部位:抗原分子表面组成:由5~15个氨基酸残基、5~7个多糖或核苷酸残基组成。抗原决定簇----免疫细胞识别的“标志”作用原理:当抗原进入36交叉反应含有共同抗体的血清不但能和特异性抗原反应,也能与共同抗原发生反应。生物学意义:①某些情况下,针对病原微生物的免疫应答可导致对人体的免疫损伤②在进行特异性免疫学诊断或鉴定时,必须排除共同抗原可能产生的干扰。交叉反应含有共同抗体的血清不但能和特异性371.1.4医学上重要的抗原1、病原微生物:病毒、细菌的抗原既有特异性抗原,也有共同抗原。如O抗原、H抗原、表面结构抗原等

2、外毒素和类毒素加0.3%~0.4%甲醛外毒素:本质为蛋白质,抗原性很强,刺激机体抗毒素抗体类毒素:没有毒性而保持抗原性的,刺激机体抗毒素,能预防由外毒素引起的传染病

来源:类毒素免疫动物后,动物血清中大量抗毒素,即是1.1.4医学上重要的抗原1、病原微生物:病毒、细菌383、动物免疫血清用途:临床上用于相应疾病的特异性治疗和紧急预防4、同种异型抗原:指同一种属个体之间存在的不同的抗原物质。利:中和人体内相应的外毒素,发挥抗体作用弊:异种动物蛋白,致敏,发生变态反应(血清病)双重性红细胞血型抗原,包括ABO血型及Rh血型抗原白细胞抗原(HLA),也称组织相容性抗原人体中3、动物免疫血清用途:临床上用于相应疾病的特异性治疗391.1.4医学上重要的抗原隐蔽抗原的释放:某些器官或组织,如脑、眼晶状体、睾丸等,正常情况下不与免疫细胞接触的成分感染、外伤等,释放入血液或淋巴系统如:甲状腺球蛋白、眼球晶状体蛋白、精子5、自身抗原:指能诱导机体发生自身免疫应答的自身组织成分自身物质的结构改变:自身组织细胞感染、烧伤、辐射、药物等分子结构发生变化形成新的抗原决定簇如:某些人服用甲基多巴后,可引起自身免疫性溶血1.1.4医学上重要的抗原隐蔽抗原的释放:某些器官或406、异嗜性抗原:指与血缘无关,存在于人、动物、植物和微生物之间的性质相同的共同抗原。a.其中任一抗原所诱发的抗体可与其它类抗原发生交叉反应b.有些病原微生物与人体组织的异嗜性(共同)抗原可引起免疫性疾病7、其它:肿瘤细胞、药物、化学物质、植物花粉等6、异嗜性抗原:指与血缘无关,存在于人、动物、植物和微生物之41(二)抗体

1、抗体的概念抗体(Ab)是机体在抗原刺激下产生的,能与抗原发生特异性结合的具有免疫活性的球蛋白。因为抗体主要存在于血清中,故习惯又称之为抗血清或免疫血清。1964年世界卫生组织(WHO)专门会议决定,将具有抗体活性或者化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白(Ig)。所有的抗体都是免疫球蛋白,但是少部分异常免疫球蛋白不具抗体的生物活性,即免疫球蛋白并非都是抗体。(二)抗体

1、抗体的概念抗体(Ab)是机体在抗原刺激下产生42Ig的基本结构

(1)Ig分子的基本结构每个免疫球蛋白的单体都是由4条多肽链通过链间二硫健连接而成。其中有两条链每条约含450个氨基酸残基称重链(H链);另两条链每条约含214个氨基酸残基称轻链(L链)。两条H链由链间二硫健连接呈“Y”字形,两条L链由二硫健对称地连接在两条H链N末端的两侧。Ig的基本结构(1)Ig分子的基本结构每个免疫球蛋白的单43Ig的基本结构

N端:氨基端每个Ig单体有两个端C端:羧基端

Fab段:靠近N端H链的1/2和一个完整的链通过链间二硫健构成

F(ab’)2:两个Fab段通过H链间的二硫健连接成

Fc段:靠近C端两条H链的1/2合称

a.部位:肽链的N端(L链的1/2与H链的1/4)可变区b.特征:氨基酸的种类和排列顺序随抗体特异性不同而变化(V区)c.功能:是抗体和抗原发生特异性结合的部位a.部位:肽链的C端(L链的1/2和H链的3/4)稳定区b.特征:氨基酸的种类和排列顺序较稳定(C区)c.功能:使Ig具有抗原性及激活补体、活化K细胞、增强吞噬细胞的吞噬能力等功能。每条肽链的两个区三个片断Ig的基本结构44免疫球蛋白的种类

根据其重链抗原性的不同分:IgGIgE

血清型IgAIgA

分泌型IgA(SIgA)-双体(含两个基本结构)IgDIgM-五聚体(由5个Ig基本结构通过J链聚合而成)人类免疫球蛋白单体(只含一个基本结构)免疫球蛋白的种类根据其重链抗原性的不同分:人类免疫球蛋白单45IgG

IgG

IgM

IgAIgDIgEIgG

IgG

IgMIgAIgDIgE46种类分子量(万)分布作

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