第六章胺类药物的分析优质课件

第六章胺类药物的分析第六章胺类药物的分析1优选第六章胺类药物的分析优选第六章胺类药物的分析2常见的芳胺类药物

对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构常见的芳胺类药物对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构3盐酸丁卡因有无芳香第一胺？盐酸丁卡因有无芳香第一胺？4苯佐卡因有无芳香第一胺？苯佐卡因有无芳香第一胺？5一性质（一）水解后具有芳香第一胺特性，（均具有芳酰胺基），可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色，弱碱性。（二）酯键或酰胺键易水解

尤其是药物受光、热或碱性条件的影响，更易促进其水解一性质（一）水解后具有芳香第一胺特性，（均具有芳酰胺基）6（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。

（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。

（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应7芳酰胺类药物的基本结构芳酰胺类药物的基本结构8与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；盐酸布比卡因ChP（2000）在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：①重氮化反应速度加快；利多卡因和布比卡因②重氮盐在酸性溶液中稳定；盐酸布比卡因ChP（2000）取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。电位法重酒石酸去甲肾上腺素注射液滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；尤其是药物受光、热或碱性条件的影响，更易促进其水解具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。盐酸布比卡因ChP（2000）（一）亚硝酸钠滴定法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）对乙酰氨基酚（扑热息痛）有无芳香第一胺？水解之后呢？与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺9醋氨苯砜醋氨苯砜10盐酸利多卡因有无酚羟基?有无芳香第一胺？盐酸利多卡因有无酚羟基?有无芳香第一胺？11盐酸布比卡因盐酸布比卡因12性质1.水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基利多卡因和布比卡因在酰胺基邻位存在两个甲基，受空间位阻的影响，较难水解，因此其水溶液较稳定。2.水解产物易酯化：对乙酰氨基酚和醋氨苯酯，水解后生成醋酸，可在酸性介质中与乙醇反应，生成醋酸乙酯。

性质1.水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基2.水解产物易酯133.酚羟基的特性：对乙酰氨基酚具有酚羟基4.弱碱性：利多卡因和布比卡因叔胺氮原子

对乙酰氨基酚和醋酸苯砜不具此侧链5.与重金属离子发生沉淀反应：

利多卡因和布比卡因3.酚羟基的特性：对乙酰氨基酚具有酚羟基4.弱碱性：利多14二、鉴别试验

（一）重氮化—偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应

二、鉴别试验（一）重氮化—偶合反应芳香第一胺类鉴别反应15（一）亚硝酸钠滴定法尤其是药物受光、热或碱性条件的影响，更易促进其水解对乙酰氨基酚ChP（2000）取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。（二）酯键或酰胺键易水解已黄的注射液不仅疗效下降，且毒性增加第二节苯乙胺类药物的分析（六）氯化物的鉴别反应[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.杂质来源水解产生（一）非水溶液滴定法原料药I2+Na2S2O3NaI+Na2S4O6在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：（2）酸的种类及其浓度盐酸布比卡因ChP（2000）取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。脂烃胺基侧链，显弱碱性检查方法：TLC中高低浓度对比法水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠、苯佐卡因（一）亚硝酸钠滴定法直接：盐酸普鲁卡因、对氨16盐酸普鲁卡因ChP（2000）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。

盐酸普鲁卡因ChP（2000）17间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯

间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺18对乙酰氨基酚ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。对乙酰氨基酚ChP（2000）19

此反应是重氮化偶合反应吗？盐酸丁卡因（N-亚硝基化合物）

此反应是重氮化偶合反应吗？盐酸丁卡因（N-亚硝基化20（二）水解产物的反应

1.盐酸普鲁卡因ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。

（二）水解产物的反应1.盐酸普鲁卡因ChP（2021盐酸普鲁卡因NaOH普鲁卡因白色沉淀油状物（普鲁卡因）2-二乙氨基乙醇↑对氨基苯甲酸钠使湿润的红色石蕊试纸变蓝+HCl对氨基苯甲酸↓（白色）盐酸普鲁卡因NaOH普鲁卡因白色沉淀油状物（普鲁卡因）2-22（三）三氯化铁反应

对乙酰氨基酚+FeCl3

蓝紫色（三）三氯化铁反应23（四）与重金属离子反应1.与铜和钴离子反应

（四）与重金属离子反应

24

2．与汞离子的反应

2．与汞离子的反应25

（五）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP（2000）[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2000）（五）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物盐酸利多卡因262.硫氰酸盐衍生物

盐酸丁卡因ChP（2000）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。2.硫氰酸盐衍生物盐酸丁卡因ChP（20027（六）氯化物的鉴别反应盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因、盐酸利多卡因的水溶液。供试品+稀硝酸+Ag+

白色凝乳状+氨试液溶解+稀硝酸沉淀（六）氯化物的鉴别反应盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因、盐酸利多卡28与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。（六）氯化物的鉴别反应在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：原料药吸收系数法酚羟基的特性：对乙酰氨基酚具有酚羟基利多卡因和布比卡因在酰胺基邻位存在两个甲基，受空间位阻的影响，较难水解，因此其水溶液较稳定。盐酸布比卡因ChP（2000）（一）重氮化—偶合反应杂质来源水解产生盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺I2+Na2S2O3NaI+Na2S4O6（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。利多卡因和布比卡因5mg的溶液，作为供试品溶液。[鉴别]（2）取本品约0.常用碘化钾-淀粉指示剂（显蓝色）外指示剂法NaNO2+HCl→HNO2+NaCl弱碱性：利多卡因和布比卡因叔胺氮原子杂质来源中间体、水解产物

盐酸布比卡因ChP（2000）[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。（七）UV

与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺29（八）IR

盐酸布比卡因ChP（2000）[鉴别]（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。（八）IR盐酸布比卡因ChP（2000）301.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查

检查方法TLC杂质对照品法杂质来源水解产生三、杂质检查1.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查检查方31盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸+

2-二乙氨基乙醇水解对氨基苯甲酸苯胺醌类化合物（黄色）

-CO2[O]

已黄的注射液不仅疗效下降，且毒性增加《中国药典》2005年版规定，TLC法检查对氨基苯甲酸盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸+水解对32

精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各10l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2％对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐33（二）对乙酰氨基酚

1.有关物质杂质来源中间体、副产物及分解产物

对氯乙酰苯胺杂质对照品法

检查方法TLC

其他杂质参比杂质对照品法

（二）对乙酰氨基酚1.有关物质杂质来源342.对氨基酚杂质来源中间体、水解产物反应原理3.乙醇溶液的澄清度与颜色2.对氨基酚杂质来源中间体、水解产物反应原理3.35（一）亚硝酸钠滴定法1.原理具芳伯氨基的药物四、含量测定

（一）亚硝酸钠滴定法四、含量测定36具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。

具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在37水解还原水解还原382.主要测定条件（1）反应速度加入适量KBr加速反应KBr为催化剂NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：2.主要测定条件NaNO2+HCl→HNO2+NaCl39检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。与重金属离子发生沉淀反应：（二）酯键或酰胺键易水解《中国药典》2005年版规定，TLC法检查对氨基苯甲酸已黄的注射液不仅疗效下降，且毒性增加4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。对氯乙酰苯胺杂质对照品法4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.原料药吸收系数法[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.具手性碳原子，具旋光性在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基（一）非水溶液滴定法原料药杂质来源水解产生检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身40（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2

加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度（1）K1（2）K2∵K1≈300K241（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3价格高（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：价格高42盐酸1:2.5～6；加入盐酸：①重氮化反应速度加快；②重氮盐在酸性溶液中稳定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果盐酸1:2.5～6；43第六章胺类药物的分析优质课件44（3）室温条件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定（3）室温条件下滴定10～30℃45（2）外指示剂法

3.指示终点的方法（1）永停滴定法线路中有电流通过，电流计指针突然偏转，并不再回零，即为滴定终点。常用碘化钾-淀粉指示剂（显蓝色）（2）外指示剂法3.指示终点的方法常用碘化钾-淀粉指示464.测定方法盐酸普鲁卡因ChP（2000）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl4.测定方法47（三）紫外分光光度法

对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。

（二）非水溶液滴定法

脂肪烃胺侧链，具弱碱性

（三）紫外分光光度法（二）非水溶液滴定法48对乙酰氨基酚ChP（2000）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。对乙酰氨基酚ChP（2000）49原料药

吸收系数法

USP（24）对照法

原料药吸收系数法USP（24）对照法50亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（B）A.添加BrB.生成NO+·Br

C．生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行

亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（B）51中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（B）A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法

中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方52亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法

亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）53以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（E）A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液

以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（E）54例3.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（ABCDE）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点

例3.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是55第二节苯乙胺类药物的分析

第二节苯乙胺类药物的分析56苯乙胺类药物的基本结构*苯乙胺类药物的基本结构*57常见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物58第六章胺类药物的分析优质课件59第六章胺类药物的分析优质课件60第六章胺类药物的分析优质课件61盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗62硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇63一、结构与性质

1.脂烃胺基侧链，显弱碱性

2.酚羟基特性，易氧化变色，可发生三氯化铁反应

3.具手性碳原子，具旋光性一、结构与性质1.脂烃胺基侧链，显弱碱性64

4.溶解性游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水

5.UV6.IR7.取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。4.溶解性游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐65二、鉴别试验1.三氯化铁反应2.与甲醛—硫酸反应3.氧化反应4.UV与IR二、鉴别试验1.三氯化铁反应665.与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应5.与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪67三、杂质检查

杂质来源原料残存检查方法紫外-可见分光光度法（一）酮体三、杂质检查杂质来源原料残存（一）酮体68

检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。检查原理利用酮体在310nm波长处有最69（二）有关物质检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物检查方法：TLC中高低浓度对比法配制两种浓度对照溶液（二）有关物质检查70四、含量测定

（一）非水溶液滴定法原料药

脂烃胺基侧链，显弱碱性

利用本类药物分子结构中的芳香第一胺或側链烃胺基的弱碱性，以冰醋酸位溶剂，加醋酸汞试液以消除氢卤酸的干扰，并用结晶紫指示液指示终点。四、含量测定（一）非水溶液滴定法原料药71（二）溴量法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺反应摩尔比为1∶6

分子结构中均有苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的硫代硫酸钠滴定液的量，即可计算出供试品的含量。（二）溴量法分子结构中均有苯酚结构，在酸性72

Br2+2KIKBr+I2I2+Na2S2O3NaI+Na2S4O6(剩余）Br2+2KIKBr+I2I2+Na273（三）HPLC法重酒石酸去甲肾上腺素注射液

（三）HPLC法重酒石酸去甲肾上腺素注射液74例1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为（D）A.浓硫酸B.甲醛试液C.氨试液D.甲醛—硫酸试液E.茚三酮试液

例1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为（D）75例2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（E）A.有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体

例2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（E）76第三节丙胺类药物的分析第三节丙胺类药物的分析77丙胺类的基本结构

CHCH2CH2N

CH3

CH3R1R2丙胺类的基本结构 CH3 CH3R1R278第六章胺类药物的分析第六章胺类药物的分析79优选第六章胺类药物的分析优选第六章胺类药物的分析80常见的芳胺类药物

对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构常见的芳胺类药物对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构81盐酸丁卡因有无芳香第一胺？盐酸丁卡因有无芳香第一胺？82苯佐卡因有无芳香第一胺？苯佐卡因有无芳香第一胺？83一性质（一）水解后具有芳香第一胺特性，（均具有芳酰胺基），可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色，弱碱性。（二）酯键或酰胺键易水解

尤其是药物受光、热或碱性条件的影响，更易促进其水解一性质（一）水解后具有芳香第一胺特性，（均具有芳酰胺基）84（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。

（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。

（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应85芳酰胺类药物的基本结构芳酰胺类药物的基本结构86与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；盐酸布比卡因ChP（2000）在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：①重氮化反应速度加快；利多卡因和布比卡因②重氮盐在酸性溶液中稳定；盐酸布比卡因ChP（2000）取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。电位法重酒石酸去甲肾上腺素注射液滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；尤其是药物受光、热或碱性条件的影响，更易促进其水解具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。盐酸布比卡因ChP（2000）（一）亚硝酸钠滴定法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）对乙酰氨基酚（扑热息痛）有无芳香第一胺？水解之后呢？与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺87醋氨苯砜醋氨苯砜88盐酸利多卡因有无酚羟基?有无芳香第一胺？盐酸利多卡因有无酚羟基?有无芳香第一胺？89盐酸布比卡因盐酸布比卡因90性质1.水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基利多卡因和布比卡因在酰胺基邻位存在两个甲基，受空间位阻的影响，较难水解，因此其水溶液较稳定。2.水解产物易酯化：对乙酰氨基酚和醋氨苯酯，水解后生成醋酸，可在酸性介质中与乙醇反应，生成醋酸乙酯。

性质1.水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基2.水解产物易酯913.酚羟基的特性：对乙酰氨基酚具有酚羟基4.弱碱性：利多卡因和布比卡因叔胺氮原子

对乙酰氨基酚和醋酸苯砜不具此侧链5.与重金属离子发生沉淀反应：

利多卡因和布比卡因3.酚羟基的特性：对乙酰氨基酚具有酚羟基4.弱碱性：利多92二、鉴别试验

（一）重氮化—偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应

二、鉴别试验（一）重氮化—偶合反应芳香第一胺类鉴别反应93（一）亚硝酸钠滴定法尤其是药物受光、热或碱性条件的影响，更易促进其水解对乙酰氨基酚ChP（2000）取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。（二）酯键或酰胺键易水解已黄的注射液不仅疗效下降，且毒性增加第二节苯乙胺类药物的分析（六）氯化物的鉴别反应[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.杂质来源水解产生（一）非水溶液滴定法原料药I2+Na2S2O3NaI+Na2S4O6在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：（2）酸的种类及其浓度盐酸布比卡因ChP（2000）取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。脂烃胺基侧链，显弱碱性检查方法：TLC中高低浓度对比法水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠、苯佐卡因（一）亚硝酸钠滴定法直接：盐酸普鲁卡因、对氨94盐酸普鲁卡因ChP（2000）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。

盐酸普鲁卡因ChP（2000）95间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯

间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺96对乙酰氨基酚ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。对乙酰氨基酚ChP（2000）97

此反应是重氮化偶合反应吗？盐酸丁卡因（N-亚硝基化合物）

此反应是重氮化偶合反应吗？盐酸丁卡因（N-亚硝基化98（二）水解产物的反应

1.盐酸普鲁卡因ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。

（二）水解产物的反应1.盐酸普鲁卡因ChP（2099盐酸普鲁卡因NaOH普鲁卡因白色沉淀油状物（普鲁卡因）2-二乙氨基乙醇↑对氨基苯甲酸钠使湿润的红色石蕊试纸变蓝+HCl对氨基苯甲酸↓（白色）盐酸普鲁卡因NaOH普鲁卡因白色沉淀油状物（普鲁卡因）2-100（三）三氯化铁反应

对乙酰氨基酚+FeCl3

蓝紫色（三）三氯化铁反应101（四）与重金属离子反应1.与铜和钴离子反应

（四）与重金属离子反应

102

2．与汞离子的反应

2．与汞离子的反应103

（五）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP（2000）[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2000）（五）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物盐酸利多卡因1042.硫氰酸盐衍生物

盐酸丁卡因ChP（2000）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。2.硫氰酸盐衍生物盐酸丁卡因ChP（200105（六）氯化物的鉴别反应盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因、盐酸利多卡因的水溶液。供试品+稀硝酸+Ag+

白色凝乳状+氨试液溶解+稀硝酸沉淀（六）氯化物的鉴别反应盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因、盐酸利多卡106与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。（六）氯化物的鉴别反应在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：原料药吸收系数法酚羟基的特性：对乙酰氨基酚具有酚羟基利多卡因和布比卡因在酰胺基邻位存在两个甲基，受空间位阻的影响，较难水解，因此其水溶液较稳定。盐酸布比卡因ChP（2000）（一）重氮化—偶合反应杂质来源水解产生盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺I2+Na2S2O3NaI+Na2S4O6（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。利多卡因和布比卡因5mg的溶液，作为供试品溶液。[鉴别]（2）取本品约0.常用碘化钾-淀粉指示剂（显蓝色）外指示剂法NaNO2+HCl→HNO2+NaCl弱碱性：利多卡因和布比卡因叔胺氮原子杂质来源中间体、水解产物

盐酸布比卡因ChP（2000）[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。（七）UV

与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺107（八）IR

盐酸布比卡因ChP（2000）[鉴别]（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。（八）IR盐酸布比卡因ChP（2000）1081.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查

检查方法TLC杂质对照品法杂质来源水解产生三、杂质检查1.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查检查方109盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸+

2-二乙氨基乙醇水解对氨基苯甲酸苯胺醌类化合物（黄色）

-CO2[O]

已黄的注射液不仅疗效下降，且毒性增加《中国药典》2005年版规定，TLC法检查对氨基苯甲酸盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸+水解对110

精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各10l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2％对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐111（二）对乙酰氨基酚

1.有关物质杂质来源中间体、副产物及分解产物

对氯乙酰苯胺杂质对照品法

检查方法TLC

其他杂质参比杂质对照品法

（二）对乙酰氨基酚1.有关物质杂质来源1122.对氨基酚杂质来源中间体、水解产物反应原理3.乙醇溶液的澄清度与颜色2.对氨基酚杂质来源中间体、水解产物反应原理3.113（一）亚硝酸钠滴定法1.原理具芳伯氨基的药物四、含量测定

（一）亚硝酸钠滴定法四、含量测定114具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。

具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在115水解还原水解还原1162.主要测定条件（1）反应速度加入适量KBr加速反应KBr为催化剂NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：2.主要测定条件NaNO2+HCl→HNO2+NaCl117检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。与重金属离子发生沉淀反应：（二）酯键或酰胺键易水解《中国药典》2005年版规定，TLC法检查对氨基苯甲酸已黄的注射液不仅疗效下降，且毒性增加4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。对氯乙酰苯胺杂质对照品法4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.原料药吸收系数法[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.具手性碳原子，具旋光性在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：水解后显芳香第一胺特性：芳酰氨基（一）非水溶液滴定法原料药杂质来源水解产生检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身118（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2

加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度（1）K1（2）K2∵K1≈300K2119（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3价格高（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：价格高120盐酸1:2.5～6；加入盐酸：①重氮化反应速度加快；②重氮盐在酸性溶液中稳定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果盐酸1:2.5～6；121第六章胺类药物的分析优质课件122（3）室温条件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定（3）室温条件下滴定10～30℃123（2）外指示剂法

3.指示终点的方法（1）永停滴定法线路中有电流通过，电流计指针突然偏转，并不再回零，即为滴定终点。常用碘化钾-淀粉指示剂（显蓝色）（2）外指示剂法3.指示终点的方法常用碘化钾-淀粉指示1244.测定方法盐酸普鲁卡因ChP（2000）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl4.测定方法125（三）紫外分光光度法

对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。

（二）非水溶液滴定法

脂肪烃胺侧链，具弱碱性

（三）紫外分光光度法（二）非水溶液滴定法126对乙酰氨基酚ChP（2000）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。对乙酰氨基酚ChP（2000）127原料药

吸收系数法

USP（24）对照法

原料药吸收系数法USP（24）对照法128亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（B）A.添加BrB.生成NO+·Br

C．生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行

亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（B）129中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（B）A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法

中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方130亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法

亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）131以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（E）A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液

以下