中医银杏三宝膏研制报告培训课件

中医银杏三宝膏研制报告产品预期效果银杏叶提取物(GinkgoBilobaextract,GBE)被广泛运用于药品、保健食品、食品补充剂、化妆品等。1999年全世界销售量据估计在50亿美元以上。专家们预测2001年后将上升到60亿美元的市场销售量。银杏现在虽然在欧洲、北美开始种植,但是中国仍是主要产地。银杏叶提取物是现代科学技术开发出的植物药(属中药)最成功案例之一。其重要的成功经验:①用现代科学技术研究的植物药在欧美市场确有广阔的前景;②植物药要造就市场,形成规模,高水平科研及确切疗效是基础,并必须要有其规格、标准。GBE原由德国Schwabe公司制定企业标准,后被德国E委员会采纳。本产品是以银杏叶黄酮为主要原料的保健食品，因此，本产品将会有较好的市场。

2中医银杏三宝膏研制报告产品研发思路

随着社会进步和经济发展，老龄化社会提前到来,人类对自身的健康日益关注。紧张、繁重的生活压力，让人们更重视保健强身；也让人们更着重于追求美容养颜、延缓衰老。大量研究证实，人体组织的氧化是人类衰老的主要原因。医学界想用那些具有“抗氧化作用”的药物来延缓人体衰老，并将这些药物通俗地称为“抗衰老剂”，此类产品迅速成为风靡全球的时尚保健品。根据美国医学界的调查，25岁之前，人的身体中会自然产生抗氧化的成分，但过了25岁，抗氧化成分就会慢慢消失。解决之道，就是给人体补充抗氧化的物质，减少自由基的产生或清除过多的自由基，防止人体被氧化。

所以抗氧化、消除有害的自由基对于身体的健康和保持年轻体质至关重要。

3中医银杏三宝膏研制报告产品研发思路——市场前景抗氧化是目前国际医药、保健品市场最热点概念。抗氧化理论及其应用研究是目前国际生物医学研究领域的前沿，1998年美国三位科学家因为发现了抗氧化对心脑血管疾病的预防及治疗作用而获得当年的诺贝尔医学奖。近几年，一些大型国际医学学术会议都把二十一世纪预测为“抗氧化剂时代”。从以前医学界普遍认同的二十世纪是“维生素时代”到二十一世纪是“抗氧化剂时代”的变化说明：人类对健康观念内涵的认识随着科技水平的发展在进一步深化，通过抗氧化达到预防衰老和疾病的保健观念正在全世界得到普及，抗氧化产品在一些经济发达国家已成为餐桌必备品。抗氧化产品目前在国际市场上已被认为是治疗许多疑难疾病的最有效的突破口，未来发展前景倍受国内外科技界的瞩目，市场发展空间极其巨大。在美国，“婴儿潮”一代人在追求健康和活力上正不遗余力，他们及其子女深信做好日常的健康维护工作可以让他们永葆青春。这些人群成为抗氧化剂的“忠实拥护者”。4中医银杏三宝膏研制报告产品研发思路——国内情况

目前，我国开发出来的抗氧化保健品很多，大致分为酚类、黄酮类等，主要是从天然的抗氧化食物中提取抗氧化剂制成保健品。例如,番茄红素软胶囊,葡萄籽软胶囊,β-胡萝卜素软胶囊,绿茶软胶囊等。去年我国生产的抗氧化类保健品共177种,占我国保健品生产总数的8.56﹪。5中医银杏三宝膏研制报告

◆提高免疫力，抗氧化

◆抑制癌细胞生长

◆保护心血管及前列腺健康

6中医银杏三宝膏研制报告产品特点及优势

不同与目前市场上大多数胶囊类的抗氧化保健品,银杏三宝膏是一种类似于龟苓膏一样的食品类保健品。本品味甜，爽滑，略带脆性，易入口，适用于中老年人，且配方独特，国内首创，由纯天然植物提取物制成，安全有效。功效成分作用机理明确，针对中老年衰老、疾病的根本原因（抗氧化抗衰老能力降低），科学组方，效果可靠。

7中医银杏三宝膏研制报告产品配方

银杏叶提取物0.42%山楂1.50%枸杞1.00%龙眼肉1.50%琼脂粉72.0%白砂糖15.58%蒸馏水9.0%8中医银杏三宝膏研制报告

本产品配方中的银杏叶属于《保健食品管理办法》中可用于保健食品的物品名单；山楂、枸杞及龙眼肉均属于《保健食品管理办法》中既是食品又是药品的物品名单。本产品具有较好的抗氧化作用，可延缓衰老，适宜中老年人食用，不适宜儿童。9中医银杏三宝膏研制报告配方依据

君：银杏叶味甘、性平，其提取物可减轻由运动产生的内源性自由基对小鼠的伤害，具有较强的抗自由基损伤和抗脂质过氧化损伤的作用，是天然的自由基清除剂，具有很好的抗氧化作用。

10中医银杏三宝膏研制报告臣：山楂味酸甘、性微温，消食化积，行气散瘀，用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，疝气疼痛；高脂血症

。含黄酮类、三萜皂苷类、皂苷鞣质、游离酸、脂肪酸、维生素C、无机盐等。具有抗血小板聚集、抗氧化、增强免疫等功能。11中医银杏三宝膏研制报告

佐：枸杞味甘、性平，滋补肝肾，益精明目。含多糖、粗脂肪、粗蛋白、核黄素、胡萝卜素及氨基酸等成分。具有抗衰老、抗肿瘤、降血脂、降血糖、降血压及免疫调节等功能。12中医银杏三宝膏研制报告使：龙眼肉味甘、性温，富含蛋白质、脂肪以及维生素B1、B2、P、C等。具有补益心脾、养血安神的功效，用于气血不足，心悸怔忡，健忘失眠，血虚萎黄

。13中医银杏三宝膏研制报告配方依据

经研究发现黄酮类化合物具有较强的抗氧化作用，其存在于许多植物中，如银杏叶、山楂、枸杞等。银杏叶中含有的黄酮类化合物是目前国内外最受重视的生物黄酮之一。它具有捕获自由基、抑制血小板活化因子、促进血液循环及脑代谢等功能。在保健食品中可用作降血压、抗衰老、健脑食品的功能性基料。14中医银杏三宝膏研制报告原料用量及依据原料安全使用剂量《药典》用量（g/日）有效剂量（g/日）配方用量依据配方量（g/日）银杏叶9~1210《中国药典》2005版一部5山楂8~129《中国药典》2005版一部4.5枸杞6~126《中国药典》2005版一部3龙眼肉9~159《中国药典》2005版一部4.515中医银杏三宝膏研制报告功效成分及检测方法

功效成分：银杏叶总黄酮检测方法：（1）取本品0.2g，加正丁醇15ml，置水浴中温浸15分钟并时时振摇，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取银杏叶对照提取物0.2g，同法制成对照提取物溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水（5:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

16中医银杏三宝膏研制报告（2）薄层色谱法试验，吸取〔含量测定〕项下的萜类内酯供试品溶液和对照品溶液各15μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇（10:5:5:0.6）为展开剂，在15℃以下展开，取出，晾干，用醋研蒸气熏15分钟，在140-160℃加热30分钟，放冷，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。17中医银杏三宝膏研制报告生产工艺

生产工艺图生产工艺流程描述生产剂型的依据18中医银杏三宝膏研制报告生产工艺图银杏叶水提液浓缩液醇沉回收乙醇流浸膏加水溶解药液浓缩液醇沉回收乙醇浸膏喷雾干燥粉碎银杏叶提取物山楂琼脂粉白砂糖枸杞龙眼肉加水加热混合、搅拌装罐冷却灭菌封罐外包装检验检查入库洗净19中医银杏三宝膏研制报告工艺说明银杏叶提取物的制备1.提取将干燥的银杏叶药材粉碎，得到的碎片加水，回流两次，第一次加水量为原药材的10倍，第二次加水量为原药材的8倍，每次2小时，合并两次提取液，趁热抽滤，得到水提液。2.浓缩将水提液减压浓缩，浓缩至药液相对密度为1.2~1.3（25℃）。3.醇沉将浓缩液加入95％药用乙醇使药液中醇浓度达70％，慢加快搅，静置24小时，取上清液。4.回收乙醇将上清液入回收罐中，于60℃真空减压回收乙醇，浓缩，得银杏叶流浸膏。20中医银杏三宝膏研制报告5.沸水溶解将所得流浸膏加入3倍量沸水溶解，趁热抽滤，得到药液。6.浓缩将所得药液浓缩，浓缩至药液相对密度为1.1~1.2（25℃）。7.烯醇溶解将浓缩液95％药用乙醇使药液中醇浓度达30％，静置24小时，取上清液。8.回收乙醇将上清液入回收罐中，于60℃真空减压回收乙醇，将回收乙醇后的药液继续常温浓缩，浓缩至药液相对密度为1.01~1.06（25℃），得银杏叶浸膏。9.喷雾干燥于银杏叶浸膏中加入25％的糊精，搅拌状态下，设定进风温度180℃，出风温度160℃，塔内负压300Pa进行喷雾干燥。10.粉碎将喷雾干燥的物料入万能粉碎机中粉碎。得银杏叶黄酮粉末。21中医银杏三宝膏研制报告正交试验优选银杏叶总黄酮提取工艺以提取溶剂乙醇的浓度、溶剂用量（料液比）、提取时间（h)和提取次数为影响提取总黄酮含量的主要因素，每个因素取3个水平。取粉碎的银杏叶100g，以不同浓度乙醇为溶剂，平行操作条件下，回流提取，合并提取液，滤过，并测定计算总黄酮含量。正交试验结果及方差分析结果如下：22中医银杏三宝膏研制报告正交试验及安排结果实验号因素提取物总黄酮含量(%)ABCDⅠⅡYi111118.448.2216.67212229.098.9218.01313338.928.6717.59421239.6410.0819.72522319.379.1118.48623129.569.4819.03731329.228.9818.20832139.8910.1420.03933218.988.6717.64K152.2754.5955.7352.79K257.2356.5255.3755.24K355.8854.3754.2757.34T1T2CTK117.4218.2018.5817.6083.1182.27165.375K219.0818.8418.4618.41K318.6318.0918.0919.11CM1519.4Rj1.650.750.491.52SSj2.190.500.191.7323中医银杏三宝膏研制报告方差分析表方差来源SSdfMSFF0.05F0.01区组0.03910.0391.145.3211.26A2.19321.09732.024.468.65B0.49620.2487.254.468.65C0.19420.0972.844.468.65D1.73120.86525.274.468.65SSE0.27480.094SSTO4.8891724中医银杏三宝膏研制报告结论通过以上结果的分析可以得出：A因素为极显著性因素，B因素为显著性因素，C因素为不显著性因素，D因素为极显著性因素。因此，较佳提取条件应为：A2>D3>B2>C1，即以5倍量的70%乙醇作为提取液，提取3次，每次提取1h为本次正交试验安排筛选处的银杏叶总黄酮提取物的最佳提取工艺条件。25中医银杏三宝膏研制报告按配方比混合

按配方比例取银杏叶提取物粉末和洗净的山楂、枸杞、龙眼肉以及琼脂粉于10万级净化区内，环境湿度不大于50%的环境中，置V型混合器中混合均匀。再加水加热煎煮，不断搅拌至粘稠，后加入一定比例的白砂糖至混合物味甜，小火煎熬不断搅拌，当膏液稠度达到所规定的相对密度即可停火。分装

将各容器洗净、干燥、消毒，后将膏液装入低温冷却密封。26中医银杏三宝膏研制报告生产剂型的依据

因为本品适于中老年人食用，并且银杏叶总黄酮不溶于水，故选用膏剂。27中医银杏三宝膏研制报告产品质量标准

感官要求:黄色半透明膏状物，味微甜，具有银杏叶特有的香味。膏中嵌有红色枸杞、棕色龙眼肉、暗红色山楂。无异味、无杂质、无霉变。

功效成分：银杏叶总黄酮28中医银杏三宝膏研制报告理化指标：项目指标灰分，%≤5.0水分，%≤8.0铅（以Pb计），mg/kg≤0.5汞（以Hg计），mg/kg≤0.3砷（以As计），mg/kg≤0.329中医银杏三宝膏研制报告微生物指标：项目指标菌落总数，cfu/g≤30000大肠杆菌，MPN/100g≤90霉菌，cfu/g≤25酵母，cfu/g≤25致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌）不得检出30中医银杏三宝膏研制报告原料质量标准感官指标：土黄色粉末，味苦，具有银杏叶的特有气味。无异味、无杂质、无霉变，无结块。理化指标：银杏叶提取物的理化指标应符合下表的规定。银杏叶提取物质量要求项目指标总黄酮苷（以槲皮素计），%≥24.0总萜内酯，%≥6.0灰分，%≤1.0水分，%≤8.0铅（以Pb计），%≤1.5砷（以As计），%≤1.031中医银杏三宝膏研制报告微生物指标：微生物指标应符合下表的规定项目指标菌落总数，cfu/g≤1000大肠杆菌，MPN/100g≤30霉菌，cfu/g≤25酵母，cfu/g≤25致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌）不得检出原料质量标准32中医银杏三宝膏研制报告含量测定的试验方法

水分照水分测定法测定，不得过5.0％。炽灼残渣

不得过0.8％。重金属

取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查，不得过百万分之二十。黄酮苷元峰面积比

按〔含量测定〕项下的总黄酮醇苷色谱计算，槲皮素与山柰素的峰面积比应为0.8-1.5。33中医银杏三宝膏研制报告总黄酮醇苷高效液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4％磷酸溶液（50:50）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按懈皮素峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备分别精密称取槲皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品，加甲醇制成每1ml分别含30μg、30μg、20μg的混合溶液，作为对照品溶液；34中医银杏三宝膏研制报告

供试品溶液的制备取本品约35mg，精密称定，加甲醇-25％盐酸溶液（4:1）的混合溶液25ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，分别计算槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量，按下式换算成总黄酮醇苷的含量。总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量）×2.51本品按干燥品计，含总黄酮醇苷不得少于24.0％。

35中医银杏三宝膏研制报告直接接触产品包装材料名称：

铝制易拉罐依据：QB/T2370-1998

选择依据：易于产品的长期保存，且不易变形，方便食用。36中医银杏三宝膏研制报告安全性毒理试验急性毒性试验三项致突变试验30天喂养试验37中医银杏三宝膏研制报告银杏叶提取物的Ames试验取呈淡黄色粉末状银杏叶提取物，黄酮含量＞24％，用75％乙醇溶解供试。按GB15193.4-2003法鉴定。

选用TA97A,TA98,TA100,TA102系列菌株，经鉴定合格后使用。在-∕+S9条件下观察各菌株的回复突变情况，重复一次实验。在生长背景良好条件下，受试物组回变菌落数增加一倍以上并结果可重复判断为阳性。39中医银杏三宝膏研制报告30天喂养实验

为评价银杏三宝膏的食用安全性,按照中国食品安全性毒理学评价方法对SD大鼠进行了30d喂养实验。分对照组和低、中、高剂量组,分别将银杏三宝膏用0%、1%、5%、10%的剂量添加于饲料中通过30d混饲方式给予受试物,实验期间观察其一般状况、体重、摄食量、食物利用率.第30天处死各组大鼠,对血液学指标、血清生化指标、器官以及组织病理学检查。结果表明,30d喂养实验中,动物生长正常,无一死亡或中毒症状,各项观察指标不随剂量的增大和受试时间的延长出现剂量反应关系。因此,可认为银杏三宝膏无毒,食用安全可靠。40中医银杏三宝膏研制报告功能学试验报告1、实验项目及原则抗氧化作用动物实验包括以下项目：体重；过氧化脂质含量（丙二醛和/或脂褐质）；抗氧化酶活力（超氧化物歧化酶和/或谷胱甘肽过氧化物酶）。可选用老龄动物或氧化损伤模型动物进行实验。2、实验设计选用18~22g健康成年小鼠，单一性别每组10~15只。设1个空白对照组和3给受试物剂量组，根据人体每日每千克体重推荐摄入量，扩大10倍作为其中1个剂量，以此为基础，另设2个剂量。受试物经口连续给予30天，必要时可延长至90天。41中医银杏三宝膏研制报告3、实验方法生存实验：选用12月龄小鼠，每组40只，雌雄各半。随机分成1个对照组和3个受事物组，以人每千克体重日推荐摄入量的10倍，作为其中1个剂量，另2个剂量在这个基础上，根据受试物具体情况上下浮动。采用掺入饲料法将银杏三宝膏切碎加入饲料中做成长条给予受试物，小鼠从12月龄开始，直至死亡。每天观察并记录死亡鼠数，直至全部死亡。比较受试物组与对照组的平均寿命和最高寿命，画出生存曲线图，统计半数动物死亡天数。采用方差分析和Q检验方法按动物性别分别进行统计分析。受试物组与对照组比较，寿命延长有统计学意义，判断该受试物小鼠生存实验为阳性。42中医银杏三宝膏研制报告稳定性试验报告试验项目和内容：1、性状黄色半透明膏状物2、鉴别取本品适量，加热溶解，趁热加乙醇5ml，振摇溶解，滤过，取滤液2ml，加少许镁粉，盐酸数滴，置沸水浴中加热5分钟，溶液显酒红色。3、含量测定精密量取对照液和共试液各10ml，注入高效液相色谱仪进行分离测定，记录色谱图，其中最大三个峰，保留时间依次为槲皮素、山奈酚，异鼠李素，以外标法分别计算它们的含量，然后计算黄酮苷的含量。4、共存组分的考察对其主成分外的其他共存成分通过面积归一化法进行统计，初步考察样品在各种稳定性实验条件下组分成分变化情况。43中医银杏三宝膏研制报告5、强光照射实验将供试品置于称量瓶中，在4000Lx的光照强度下分别放置10d，取样，按稳定性考察项目进行检测。6、高温试验将供试品置于称量瓶中，分别于40e、60e、80e的条件下分别放置10d，取样，按稳。定性考察项目进行检测。7、高湿度试验将供试品于25e相对湿度75%和92.5%条件下分别放置10d，取样，按稳定性考察项目进行检测。8、加速试验将供试品模拟上市包装于相对湿度75%条件下分别放置1、2、3个月，按时取样，按稳定性考察项目进行检测。9、长期试验将供试品模拟上市包装，室温下分别放置0、1、2、3、6、12、18、24个月，按时取样，按稳定性考察项目进行检测。44中医银杏三宝膏研制报告卫生学试验感官要求：取一个销售包装的产品，放于白纸上，在良好的自然光线下，用肉眼观察银杏三宝膏的外表。用刀切开，肉眼观察内含物，凑近闻其气味，取少许入口，品尝其滋味。银杏叶提取物按《中华人民共和国药典》（2005版一部）中规定的方法测定水分按GB/T5009.3-2003中规定的方法测定灰分按GB/T5009.4-2003中规定的方法测定45中医银杏三宝膏研制报告铅、总砷、总汞的检测方法（依据）铅GB/T5009.12-2003第一法:石墨炉原子吸收光谱法第二法:氢化物原子荧光光谱法第三法:火焰原子吸收光谱法……总砷GB/T5009.11-2003第一法:氢化物原子荧光光度法第二法:银盐法第三法:砷斑法……总汞GB/T5009.17-2003第一法：原子荧光光谱法第二法：冷原子吸收光谱法……46中医银杏三宝膏研制报告微生物检验方法（依据）菌落总数：GB/T4789.2-2003大肠菌群：GB/T4789.3-2003霉菌：GB/T4789.15-2003酵母：GB/T4789.15-2003致病菌（指肠道致病菌和致病性球菌）沙门氏菌：GB/T4789.4-2003志贺氏菌：GB/T4789.5-2003金黄色葡萄球菌：GB/T4789.10-2003溶血性链球菌：GB/T4789.11-200347中医银杏三宝膏研制报告参考文献

《中华人民共和国药典》2005年版（一部）《银杏叶的化学成分及其抗氧化活性》中国药科大学中药复方研究室寇俊萍，朱丹妮等2008.1《银杏叶提取工艺研究》山东大学药学院杨相玉，邵伟2008《银杏叶黄酮类化合物的研究进展》时珍国医国药姜国芳,谢宗波,乐长高2004《银杏叶稳定性的考察》李莉袁牧蒋学华张观福吕玉涛刘香2007《