猪维⽣素营养研究及应⽤新技术维生素研究

猪维生素营养研究及应用新技术余冰教授四川农业大学动物营养研究所主要内容A猪维生素研究现状和问题A维生素营养抗病研究（VA、VD、叶酸、生物素）El59口工改研史一.猪维生素研究现状和问题1.1维生素功能和特性•以辅酶和催化剂的形式广泛参与机体维生素.代谢的多种化学反应对维持机体正常生长代谢、繁殖，提高免疫力等具有重要作用•其活性易受外界环境影响，包括在储存、干燥和常规加工过程中容易失活•饲料原料中含有丰富的维生素，但有效性变化很大A7存在问题生广中提咼保险系数，10-20倍NRC的水平添加，较少出现缺乏症，但易出现浪费，且可能出现负面作用牧草使用减少、原料人工干燥、舍饲等增加了猪对外源性维生素添加的依赖性由于国内和国外在猪种、管理、环境条件存在差异，实际添加量与标准推荐量存在差异影响维生素需要的因素多，研究难度大，关于维生素的研究较少，多年来的推荐水平变化不大1.2猪的维生素需要量变化•商品猪无变化，•种猪VE由22IU/kg增至44IU/kgi叶酸由0.3mg/kg增至1・3mg/kg商品猪、种猪均无变化■_______________________________________________________•商品猪有效烟酸由7-20mg/kg增至30mg/kg,i•<10kg猪VB6由1.5・2卩g/kg增至7卩g/kg,•11-25kg猪VB6由1.5卩

g/kg增至3卩

g/kg,•母猪VD3由200IU/kg增至800IU/kg1.2猪的维生素需要量变化NRC2012仔猪■生长猪维生素需要体重,kg5--77--1111--2525--5050--7575--100100--135VA,IU/kg2200220017501300130013001300VD3,IU/kg220220220150150150150VE,IU/kg16161111111111VK,mg/kg0.50.50.50.50.50.50.5NSNG2010仔猪■生长猪维生素需要体重,kg<2020—6161—101101—142VA,IU/kg6607.935506.614405.293303.96VD3,IU/kg660.79550.66440.53330.40VE,IU/kg66.0833.0426.4319.82VK,mg/kg4.412.201.761.321.2猪的维生素需要量变化NRC2012仔猪■生长猪维生素需要体重,kg5--77--1111--2525--5050--7575--100100--135核黄素,mg/kg43.532.5222泛酸,mg/kg121098777烟酸,mg/kg30303030303030VB12,卩g/kg2017.51510555NSNG2010仔猪■生长猪维生素需要体重,kg<2020—6161—101101—142核黄素,mg/kg8.818.816.614.41泛酸,mg/kg26.4315.4213.2211.01烟酸,mg/kg48.4624.2319.8215.42VB12小g/kg44.0522.0317.6213.22（原料中含有的VB6、生物素、叶酸和胆碱满足NRC的推荐量，故不添加）1.2猪的维生素需要量变化NSNG2010VSNRC2012种猪维生素需要NSNGNRC种猪妊娠母猪哺乳母猪公猪VA,IU/kg8810.57400020004000VD3,IU/kg660.79800800200VE,IU/kg66.08444444VK,mg/kg4.410.50.50.5核黄素,mg/kg8.813.753.753.75泛酸,mg/kg22.03121212烟酸,mg/kg33.04101010VB12小g/kg22.03151515VB6,mg/kg0.00111生物素,mg/kg0.220.20.20.2叶酸,mg/kg1.651.31.31.3胆碱,g/kg0.551.2511.25El59口工改研史___思考.推荐量差异大？•添加量与推荐量差异大?•生长/生产潜力的变化•维生素的非营养性功能•饲养环境的复杂性El59口工改研史二.维生素营养抗病研究2.1VAVA在机体免疫功能以及抵抗疾病的非特异性反应方面起着重要作用。一般地，动物机体在病毒感染后，体内VA水平急剧下降，可能产生缺乏现象，而补充VA在一定程度上可以缓解这种现象。(Hussey等1990;Arrieta等1992;Caballero,1992)2.1VA体内不同水平VAI信号通路阻断剂iIr___T_____!体IPEC-J2外细胞系.iI____________________________I____________________________[8防御素表达]、—.7III▼不同水平VA对猪P防御素表达的影响及作用通路.....................................................荣昌猪/DLY猪雌鼠/雄鼠一.・\__________________._________•=___________________________....................................................PRRSV/PBS不同水平VAPRV/PBS液液.................:生长性能、视黄醇VA对不同生理状态下种鼠繁殖性能的影响不同生理状态下8防御素表达的I-----------------影响不同生理状态下TLR表达的影响I.......VA对不同品种猪、VA对不同品种猪、繁殖性能、视苗醇：:炒踊声功能5VA对免疫应激动物抗病力、生长和繁殖的影响及机制2.1VA（仔猪）荣昌仔猪DLY仔猪VA耗竭2wVA缺乏饲粮2200IU/kg饲粮11000IU/kg饲粮PRRS弱毒疫苗伐PBS液匚一•生产性能•血清视黄醇水平•血清抗体•血清免疫球蛋白•血清促炎性和抗炎性细胞因子•组织防御素和TLRs基因•组织病理切片2.1VA（仔猪）VA缺乏□血清视黄醇IgA、IgG、IgMIiL・1、IL-10PD-1、2、3•VA缺乏降低了机体免疫应答•生产性能无显著影响2.1VA（仔猪）攻毒生产性能|JIgA、IgG、IgMI'tJIL-1、IL-10pBDI、3血清视黄醇•应激加速体内VA的消耗，机体VA的需求加大•DLY猪的反应强于荣昌猪VADVAT高VA3.530.502.5廿2llmiln®ii菜1TT4VADVA

高VAVADVA高VA2.1

VA(仔猪)♦外源添加VA通过补充PRRSV应激状态下机体代谢对VA的消耗，维持机体正常代谢，改善机体细胞免疫和体液免疫，促进机体健康；♦添加NRC(1998)水平VA能改善仔猪健康，但对生长性能无影响；PRRSV应激状态下，补充5倍NRC(1998)水平VA的仔猪生长性能更佳。8)噸徊锻mZO8)柵製m2.1

VA（肠细胞）•揭示VA改善免疫应答的可能机制•MEK-ERK可能是VA促进pBD1、3表达的通路之一•NF-kB可能是VA促进pBD2表达的通路之一•VA通过多途径增强机体的免疫功能！2.1

VA（妊娠小鼠）VA水平对孕鼠肝脏视黄醇的影响•攻毒（伪狂犬病病毒）和VA缺乏降低孕鼠肝脏视黄醇浓度•补充＞4000IU/kgVA增加正常组肝脏视黄醇水平•补充＞10000IU/kgVA增加攻毒组肝脏视黄醇水平VA水f(lUKg)WanunAlevel04000100002500050000及击址(jigg)Challengedgroup?7」7士13129.96iO.39*88.5O±2.O2b195.26±5.22c456.72il0.73dPBSg)PBSgroup28.6W1.701IE对T检验Pair-sampleTtestPQ05麗*1WP<0.05106.58土7.88'P>0.05（妊娠小鼠）2.1VAVA水平与妊娠9d活胚数回归分析•VA=33000IU/kg时（正常推荐量的8.5倍），妊娠9d活胚数最多9天活胚数2.1VA（妊娠小鼠）VA水平对分娩活仔数的影响\A水平（IUKg）04000100002500050000Alevel•补充10000IU/kgVA提高正常孕鼠的分娩活仔数•补充25000IU/kgVA提高攻毒后孕鼠的分娩活仔数攻毒组Challengedgioup11.25±1.70a12.5O±O.58ab13.00±2.31ab14.20±1.92b13.00±1.41abPBS组PBSgioup12.25±O.5Oa13.7511.26lb14.25±0.96b配对T检验Pair-SampleTtestP>0.05P>0.05PQ05•VA缺乏的孕鼠感染PRV后加剧Th1型促炎症细胞因子的表达，影响Th1/Th2免疫平衡状况，不利于动物繁殖性能的发挥；•补充VA提高孕鼠体液免疫功能，并改善胚胎发育。2.1VA（雄鼠）VA水平对雄鼠精子密度的影响时间（犬）Timegroup0lUkg4000lUkg10000lUkg25000lUkg50000lUkg攻毒组ChallengesgioupPBStnPBSgroup3.68±O.28a4.02±0.28，4.77±0.53。5.12±0.37。5.05±0.26°75.96±0.46"7.66±0.09b8.2O±O.75b配对，检凝P值Paired/-testPValue攻毒组Challengesgroup0.0050.0030.0123.43±0.68a3.82±0.45*4.92±0.2lb5.47±O.55b5.55±0.13b14PBS“PBSgroup5.3O±O.39a7.4O±O.33b7.96土0.67'配对f检弗P值Paired/-testPVahie0.0170.0140.016•攻毒和VA缺乏均降低精子密度•补充＞4000IU/kgVA提高正常雄鼠精子密度•补充＞10000IU/kgVA提高攻毒后7d和14d精子密度2.1VA（雄鼠）VA水平对精子畸形率的影响•攻毒和VA缺乏均增加精子畸形率•补充＞4000IU/kgVA降低正常雄鼠精子畸形率•补充＞10000IU/kgVA降低攻毒后7d和14d精子畸形率2.1

VAVA水平与攻毒下精子密度和精子畸形率回归分析yIM丿1方程RegressionequalionR2P值Pvalue极值peak攻毒第7d帖于希度山SpennDensityonthe7山dayy=-lE-09x2

+9E-05x+3.73430.76070.00045000攻毒第14d帮子密度血SpennDensityonthe14U1dayy=-2E-O9x2+16E-05X+3.46920.81090.00040000攻毒第7d粘子崎形率teratospenniarateonthe7thdayy=2E-08x2-0.0013x+46.7740.89190.00032500攻毒第14d粘子崎形率y=4E-08x2-0.0025x+52.432teratospenniarateonthe14th0.86420.000312502.1

VA（雄鼠）♦外源添加VA补充PRV应激状态下机体代谢对VA的消耗，并增加免疫球蛋白合成，维持抗炎和促炎平衡，促进机体健康，改善种鼠动物繁殖性能。♦PRV应激状态下，维持最佳繁殖性能所需的VA添加量远高于正常推荐量。小结♦应激状态下，保证机体正常的生产性能和繁殖性能的VA需要量显著高于正常推荐量♦提高日粮VA水平可补充应激需要，增强机体天然免疫功能，缓解炎症过度反应，在保证健康的基础上改善生产性能和繁殖性能2.2

VD3•传统营养功能•调节肠道稳态、肠上皮的紧密连接、病原侵袭、共生菌定植、抗菌肽分泌和粘膜扌氐御(SunJ,2010)•1,25-(OH)2-D3能阻止和改善实验大鼠肠炎疾病的症状(Cantorna,2004)•在感染的U937细胞中，维生素D3能显著地降低促炎细胞因子TNF-a、IL-6、IL-12和IL-邛的水平(Henry等,2012)体外轮状病毒、VD3、信〕体内号通路阻断剂/激活剂］轮状病毒］'_______________________________________，‘IPEC-J2细胞系VD3/25-OH-D-3-~一亍-f、DLY猪RIG-1/TLR3及下游信号分子、内质网应激、自噬通路和抗菌肽基因表达:生长性能、血清/肠::道免疫指标及相关：信号通路表达RIG・1、TLR3、内质网应激、自噬等通路及抗菌肽在VD3抗病毒感染中的可能作用及机制VD3对不同生理状态下猪生长、免疫及信号通路的影响VD3对免疫应激动物抗病力和生长的影响及机制试验1VD3对轮状病毒应激IPEC-J2细胞系RV抗原和NSP4的影响•当VD3添加浓度高于1卩

mol/L时，RV抗原和NSP4浓度显著降低3IU2)ah3Emu)ZKZ试验1A:RV对IPEC-J2细胞系CYP27B1基因表达的影响B：VD3对RV感染的IPEC-J2细胞上清中1,25・（OH）2D3的影响•RV感染导致VD3活化酶CYP27B1表达增加，VD3更多转化为活性物质。AU。一ssa』dxa<Z^ELmzzdAoa>布一足2.2VD3•RV感染增加IPEC-J2细胞系VD3的消耗•补充VD3减少病毒复制、缓解感染造成的应激•VD3抗病毒感染的效果在体内是否成立？•不同品种猪上VD3的抗病毒效果是否有差异？试验2VD3对轮状病毒RV感染的不同品种猪生长性能的影响品件廿态曰粮平均曰增重（g）干均曰采食（£）料重之DFY殖RV(TVD669-33135362.52-0.10HVD679=35139—32.76=0.16Rve>VD431=381O<58±482.49=0.17HVD540-321251+71232-0.14*肆KV<-)VD240=2/5J6S=?63.52=0.0/HVD212=27265=553.58=0.09Rve>VD188±574^=143.78=0.09HVD205=3.4710=163.53=0.07p值总体<0.01<0.01品抻0.01J0.015.01□.U11O.J31NS0.0310.01<0.01<0.01<0.01NSNS<001V0O1NS<0.01VD品H*vt>VL*攻毒|品种*1攵而*无VD:200IU/kgVD3,HVD:5000IU/kgVD3•高水平VD3提高生长性能在应激猪上表现更为明显，•高水平VD3改善应激猪生长性能在DLY猪上表现更为明显试验2<0.01NSNSNSVD3对轮状病毒RV感染的不同品种猪CYP27B1表达的影响901NSNSNSVD品种WDVD*攻毒品种*攻毒*VD<0.010.034NSNS•藏猪CYP27B1的表达>DLY猪•攻毒和高水平VD3提高CYP27B1的表达•VD3促进CYP27B1表达在应激DLY上表现〉藏猪品抻状态日粮十二指肠空肠回肠DIY猪RVG)VD1.00±0351.00=b0.311.00=0.26HVD196±0.511.62=0.281.83=0.37RV(+)VD2.93±0.712.4心.982.5S±0.69HVD3.37±0.623.13=1.453.22=0.62藏猪RV(-)VD266^0361.60±0.370.76=0.13HVD3.63±0.482.23=0.441.06=0.13RV(+)VD4.87±0.812.69=0.651.75±0.15HVD5.03±1.233.06=0.682.76=0.70P值总体<0.015.01<0.01品片<0.01NS<0.01攻毒<0.01<0.01<0.01VD如何发挥抗病毒作用体内『肠道______▼______•抗病毒相关细胞因子IFN-。等•抗病毒相关信号分子RIG-1通路•抗病毒相关自噬和ERS通路•体外•酶抑制剂•信号途径剂肠细胞激活剂抑制♦•抗病毒相关细胞因子IFN-。等•抗病毒相关信号分子RIG-1通路•抗病毒相关自噬和ERS通路El59口工改研史___2.2VD3♦VD3抗病毒感染的作用与RIG1-IPS1-IFNP通路、ERS通路、自噬通路有关0,440,880,1320,1760,2200IU/kg25-(OH)-D3仔猪3ws•添加D3改善ADG和ADFI•2200IU/kg显著•添加D3改善应激仔猪生产性能•880IU/kg出现保护效应•添加D3缓解免疫应激•1320IU/kg出现缓解效应LPS—►7d小结p应激（病毒感染，免疫应激）增加对VD3的消耗p高剂量VD3可以改善仔猪抗病力，提高生长性能p高剂量VD3抗病毒感染的作用与RIG1-IPS1-IFNP通路、内质网应激通路、自噬通路和抗菌肽有关pDLY猪抗病力低于藏猪，VD3对应激猪代谢的改善作用在DLY猪上更为明显2.3叶酸•叶酸缺乏会损伤Cu-Zn超氧化物歧化酶和GPx活性，氧化损伤产物硫巴比妥酸反应物（TBARS）增加，造成肝脏氧化应激Huang等（2001）•当叶酸添加剂量较高时，T细胞含量相比缺乏组和低剂量添加组都有明显升高，明显降低雏鸡死亡率尹秀玲等（2002）•母鼠日粮添加叶酸或者断奶子代日粮添加叶酸可在一定程度上改善甚至永久性改变IUGR个体基因表达的变化和基因组DNA甲基化模式Lillycrop等2005;Burdge等2.3叶酸叶酸对应激动物抗病力和生长的影响及机制」试验1叶酸水平对泌乳母猪繁殖性能的影响20406080日根叶mft（Bg/Kg）-1-----------1

L0.641------------1------------1------------1------------1------------•¬100120020406080100H粮叶敌添加貝（ng/Kg）日粮叶酸冷川IM（mg/Kg）120叶酸添加水平达60mg/kg时，总泌乳量呈最大值随泌乳母猪日粮叶酸水平增加，母猪料乳比降低、后代仔猪ADG增加ocuO5

ocuoCU9887f7661176XJ1最啲11试验2叶酸水平对断奶仔猪生产性能的影响项目・叶酸添加iH：(nig/kg)00.52.55.010.0初重(kg)7.320±0.697.325±0.677.325±0.737.331±0.737.361±0.64末重(kg)17.147±1.3917.559±1.1518.328±1.7817.263±1.6917.223±1.38l-2wADG(g)243±20.79243±18.07264±20.06246±29.89243±15.323-4wADG(g)459±41.05b488±25.57ab522±16.03a463±3934b462±22.94bivADG(g)351±27.21b366±21.08ab393±21.32a355±28.88ab352±11.45bl-2wADFI(g)315±23.26316±9.21325±29.60309±28.40309±9.153-4w.ADFI(g)69279.89。717±21.73aC762*2.46，694±47.99C693±19.19CIwADFI(g)503±29.46517±14.73544±21.77501±37.83501±29.72l-2wF/G1.29x0.121.30±0.071.24±0.041.26±0.041.28±0.053-4wF/G1.51±O.O51.47±0.041.46±0.031.5O±O.O71.50±0.04l-4wF/G1.44±0.04142±0.051.38±O.O31.42±0.051.43±0.03•补充叶酸增加仔猪试验后期ADFI、全期ADG•以2.5mg/kg叶酸的添加效果最佳；•添加过高叶酸对仔猪生长无促进效果试验2叶酸水平对断奶仔猪血清常规指标的影响•补充叶酸增加28d后仔猪血清总蛋白、白蛋白，降低28d的血清尿素氮水平；•以2.5mg/kg叶酸的添加效果最佳；•添加过高叶酸对血清常规指标无促进效果项目断奶天数/基础日粮0.5mg/kg2.5mg/kg5mg/kg10mg/kgTP(g/L)060.40±2.4161.10±2.0760.65±2.5461.70±2.8862.40±3.631454.65±5.8856.10±6.1658.15±5.6955.83±5.1655.53±4.872858.85±7.40b60.45±6.69ab62.68±6.26a59.88±7.56ab60.05±6.99abALB(g/L)035.20±1.7735.93±2.2536.15±1.8936.75±2.4237.18±1.921430.10±2.0130.38±2.1831.55±2.5031.05±1.6931.40±2.082830.32±3.61b32.30±3.08ab32.63±1.64a31.78±2.06ab32.23±4.09abGLOB(g/L)025.20±1.8525.18±3.1924.50±2.7724.95±2.8125.22±2.101424.55±3.5725.73±2.9626.60±2.2924.78±1.3025.13±2.382828.53±3.5628.15±2.1730.05±1.4528.10±2.3027.83±1.52BUN(mmol/L)02.58±0.142.52±0.212.53±0.222.54±0.222.48±0.36142.46±0.112.31±0.222.30±0.132.39±0.152.37±0.53282.33±0.20c2.21±0.17ac2.17±0.13a2.22±0.19ac2.26±0.18ac试验2叶酸水平对断奶仔猪血清激素的影响•补充叶酸促进生长相关激素的分泌，降低皮质醇水平•2.5mg/kg叶酸的添加效果最佳•添加过高叶酸对激素分泌无促进效果GH口基础日粮口添加0.5mg/kg叶酸口添加2.5mg/kg叶酸口添加5mg/kg叶酸口添加1Omg/kg叶酸d28d28IGF-1口基础日粮口添加0.5mg/kg叶酸口添加2.5mg/kg叶酸口添加5mg/kg叶酸i□添加10mg/kg叶酸13012011010090皮质醇口基础日粮口添加0.5mg/kg叶酸□添加2.5mg/kg叶酸口添加5mg/kg叶酸口添加10mg/kg叶酸试验3叶酸水平对断奶仔猪外周血淋巴细胞亚群的影响项目Item■饲粮叶酸添加水平AddedFALevel(mg/kg)P•值P-value00.336915SEMCD3*(%)65.262.069.364.263.367.61.120.400CD3+CD4*(%)34.432.934.533.631.534.70.820.881CD3fCD8*(%)22.0a32.2C30.10027.5歟24.7ab28.5abc1.070.065CD3+CD4+/CD3+CD8+1.57°1.0781.20a1.24功1.3俨1.22a0.0500.090•补充叶酸降低仔猪CD4+/CD8+的比值，提高机体免疫力•以0.3・3mg/kg叶酸的添加效果最佳；•添加过高叶酸对淋巴细胞无改善效果试验3叶酸水平对断奶仔猪血液细胞因子的影响项日Item饲粮叶酸添加水平AddedFolicacidLevel(mg/kg)SEMP-value00.336915IL-4,pg.mL'141.347.546.445.842.544.03.050.325肿瘤坏死因子YTNF-a,pg.mL"1528.2573.7562.9582.2536.1556.836.10.644干扰素-YIFN-y.pg.mL*1132.8。152.7勤155.1b149.4b150.4b148.4。6.990.048一氧化氮NO,pmoLL120.023.624.035.928.929.712.040.818TNF-a/IL-4(Th1/Th2)12.812.112.212.712.612.70.290.091•补充叶酸增加IFN-y水平，降低TNF-a/IL-4比值，促进免疫调节•以0.3-3mg/kg叶酸的添加效果最佳；试验3叶酸日摄入量为X,生产性能为Y的拟合回归和最优分析指标Index二次回归方程Quadraticregressionequation决定系数R2P•偵P-value寻优OptimizationXYADGo_7dy=-18.63xz+52.72x+10.510.750.0231.4148G/Fo-7dy=-0.126x2

+0.371x+0.0400.790.0151.470.313ADG&246y=-3.021x2+17.76X+210.90.420.0442.94237G/F&24dy=-0.006x2

+0.036x+0.6080.740.0323.000.662ADGo-24dy=-4.563x2+23.27x+152.50.650.0412.55182G/Fm"y=-0.011x2+0.057x+0.5350.810.0092.590.609以7-15kg仔猪阶段平均ADFI为600g计算，获得全期最佳的日粮叶酸水平=2.55/0.6=4.25mg/kg(NRC为0・3mg/kg)El59口工改研史___•正常条件下满足母猪最大泌乳性叶酸需要量远高于推荐量•正常条件下满足仔猪最佳生产性能和免疫应答叶酸需要量远高于推荐量•异常条件？？试验4叶酸水平对LPS应激下断奶仔猪生产性能的影响处理削Group12345678Q10P-ttLPS「，击LPSchallenQe♦♦♦♦♦♦♦♦♦♦♦♦Rvalue韻扯叶艘AddedFA(mgkg)003306090150033090■quMLPSFALPS•FA体KBW(kg)Od10961101ioao1089IQ931098107710891080109601440903098709997d1229125912191240123012501272130513251336016300820947091414d14591463143615051483149915.6116.4716361647083600050897092721d1774*18.17*1814*18.81*1831*1821*1909*2042*1996*2022*0260000407210965H4I1ADG(g)07d2041*2245*1980*2163*1959*2173*2796*309产350O4342胛10030000056802778-14d3275"2918*3102*3786土361产356L4112^,4883d44询443屮124000000807035615-2Id4500*5061**539寸536.7*496俨4592*496俨*5643*515.3**5357*9530113009803990-2103272*3408*3493,3772*3514,3442*3959**4541*4364**4408*829000003360802B<ttADFI(g)0-7d4708,4710*4726*4808,4654,4705,563/586。610J605甘1442000008430816&14d6262*616.6*6235*6451*6220*6223*7140*7383*7155*7146*113700000994096215-21d7994,8205*8346*963俨8559*8194*8941*921寸加广926驴10260000046308620-21d6321*6361*6435*663尸6478’6374*7237*7488*7399*7490*904000008630977同料效*GF胡g)0-7d0425*046产0409*044€*0412*0451*0492*0523*056840耐00100000046400728-14d0511*0460,04时0583*0577*0571*0568*0659*0613*06紡001000000183001915-2ld0565*0612*0643*0618*0579*0552*0552*061户0576*0579*00060078000401170-21d051妒0.533*0538*05€8*0"0537*0”0險0"0"00050000002204$4试验4叶酸水平对LPS应激下断奶仔猪血清细胞因子的影响ftSfflGroup12345678910.P-|LPS8击LPSchallenge++++++++++++p-value0.33.06.09.01500.33.09.0SEMLPSFA―LP^FASWSlAddedFA(mg/kg)0白储4a,38.6aIL-4,pg.mL1847寸TNF-a,pg.mL'1白伸。bc,265.产IL-10,pg.mr白啊，,76.5aIL-1p,pg.mLTNF-a/IL-4』22.3d(Th1/Th2)764.8”639.2曲524.2a625.0*342.1C274.9”337.5°290.5c86.8b74.0a74.4a75.6a19爬15.1b12.8ab14.3ab631.6*505.9a517.6a519.7,166.8如73.7s62/68.8a73.7a747a72.2a71.8a16/10.5a13.8ab14.3ab38.6a1.090.6820.3280.016511.2a18.950.0000.1310.06492.8a22.350.0000.9080.81875.8a0.950.0380.1800.06314.2ab0.550.0000.3500.000•LPS应激•应激及应激恢复期对FA的适宜摄入量:•0-7d-…7.2mg/d•8-14d・・・6.7・7.2mg/d•15-21d---4・0-4・5mg/d试验5BA叶酸对IUGR断奶仔猪肝脏氧化状态的影膘omg/kg叶酸FS为5mg/kg叶酸B(U布€dmoeu)ka=U-富uooslxuoqjeouooxcojwQDEfrIJ<专ooscwc_a)o&buJ/IOEU)c项.££§vgwajoQDE3<peoo<c.l试验5叶酸对IUGR断奶仔猪肝脏基因表达的影响项目ItemsIUGRNBWSEMF

值（F-value）FA0mg/kgFA5mg/kgFA0mg/kgFA5mg/kgPigFAPigxFAIGF-10.75b0.94ab1.00ab1.37a0.100.07NSNSBcl-20.68b0.90ab1.00a0.88ab0.040.06NS0.04P531.21a0.86b1.00b0.87b0.060.020.0040.06Bax1.42a1.04b1.00b1.05b0.050.0070.020.004UbB1.54a0.98b1.00b1.11b0.080.01NS0.07补充叶酸降低了IUGR仔猪肝脏促凋亡基因和蛋白质降解基因的表达，增加抗凋亡基因的表达试验5叶酸水平对IUGR仔猪肝脏线粒体DNA含量及相关生物合成基因的影响（NBW）宫内宕泌第（IUGR）顶II饷1（C）试關（F）对照组（C）试！物（F）SEM初生重TfTmtDNA100*0.97,O63b093,008<0.050086005PGC-la100*090*060b095*005<001<005001SIRT-11.00111.23*0.68b0屮0.090.01•0.050.872XRF-11.00*0.92*0.63b1.06*0.060.郦<0.050.01TFAMI00*106,0.57^1.14*009<005<001001mtSSB100*121*063l,0时010<00103760236mtpolr095*069*II。0100531<005•001甲Omg/kg叶酸，F为5mg/kg叶补充叶酸提高仔猪肝脏线粒体Dna含量及相关生物合成基因的表达，该效应在IUGR猪上的效果更为明显Mn-SOD(U/mg)0C/NBWF/NBWC/IUGRF/IUGR处理0C/NBWF/NBWC/IUGRF/IUGR处理C为1.3mg/kg叶酸，FS为30mg/kg叶酸通过母体补充叶酸可以提高后代仔猪断奶时肝脏的代谢指标至正常水平试验6妊娠母猪补充叶酸对后代IUGR仔猪肝脏指标的影响t8147zzL0&uvoUIU)vawaT2110000300200试验6妊娠母猪补充叶酸对后代IUGR仔猪基因启动子甲基化和基因表达的影响C为1.3mg/kg叶酸，FS为30mg/kg叶母体补充叶酸可通过改变基因启动子的甲基化状态调节基因的表达项冃正常机生策(NBW)肖内发0姓级(IUGR)SEMP对照组(C)试做(F)对照组(C)试敍组(F)叶故页作DNA甲基化GRl.OO1O.52b0.93*0.46b0.080.437<0.010.952PPARa1.00*IB*0.6寸1.06*0.10<0.05<0.010.142PPARv1.000.951.141.030.070.2720.4220.762相对mRNA*达RGR1.00b1,63，0.901.57*0.110.608<0.010.962PPARal.00b2.14*0.9#0.14<0.01<0.01<0.01PPARy1.000.941.081.030.100.4240.6010.953试验7叶酸水平对IUGR仔猪生产性能的影响130t•过高叶酸水平对97.5-ADIUGR断奶仔猪生产G,65

'性能产生负面影响g32.5-00mg/kg5mg/kg10mg/kgTCOJIOmg/kg5mg/kgOmg/kg试验7叶酸水平对IUGR仔猪蛋白质代谢的影响44Iab0.98因38.8bg/L37kg10mg/5g表abb4.5b-rUbB3000mg/kg5mg/kg10mg/kgbaab諄口0mg/kg5mg/kg■10mg/kg0mg/kg5mg/kg10mg/kga1.3-m-TORSUN6含量血清42.3-•TP一含405•过高叶酸水平增力量基IUGR断奶仔猪蛋白质降解'32.5mg/g达量nmol/1L小结p正常条件下满足母猪和仔猪生产潜力的叶酸需要量高于推荐量p叶酸可缓解LPS应激仔猪的过度炎症反应，维持免疫平衡，在试验后期改善生长性能p妊娠母猪和早期断奶仔猪补充叶酸均可在一定程度改善IUGR仔猪受损的代谢状况至正常水平，且对基因表达的调控与叶酸调节基因启动子甲基化状态有关p过高水平叶酸可对机体生长、蛋白质代谢产生负面作用2.4生物素•不同类型日粮添加55-550ug/kg生物素提高了生长猪的日增重和饲料利用率。Patridge(1990)•生物素能够促进淋巴细胞增殖、提高免疫球蛋白浓度和亍*细胞因子水平。丿)Manthey等(2002),Wiedmann等(2003)2IO\7PCV2是引起仔猪断奶后多系统衰竭综合症的主要病因，导致免疫抑制；主物素是否能够缓解PCV2的感染？适宜添加量？2.4生物素不同水平生物素圆环病毒pcf!牛理盐水(~生长性能~免疫器官细胞免疫、体液免疫I细胞因子表达丿平PCV2攻击下，断奶仔猪适宜的生物素添加水生物素对仔猪免疫功能的影响及其作用机制2.4生物素生物素对PCV2攻击下仔猪器官病变的影响处理组烙宰仔猪Ss仔猜死亡ft切片数凄）有病理变化切片套数病变切片百分A-505240B-505240C-505120A+516（死亡+屠宰）6100B+516（死亡+屠宰）6100C+516（死r：+居宰）350注：每套切片包含肺脏、脾脏、回肠和腹股沟淋巴结样品切片A:生物素Omg/kg,B:生物素0.05mg/kg,C:生物素0.2mg/kg•为生理盐水，+为PCV20.2mg/kg生物素缓解由PCV2引起的组织病变2.4生物素生物素对PCV2攻击下仔猪细胞免疫的影响1I■DInNoD'PCX^-uiocuhied(pgkg)O.OOingkg(A・)0.05mgkg(B*)0.20mg/kg(C*)nPCV2*inocuhted(pgkg)SEMP-\alue0.00mgkg(A。0.05mgkg(B+)*).20mgkg(C+BVBVANAE+%Cellularimmuneresponse3DPIS4.57±1323.59±0.624.4310.7886.0511383.53f0.565.21±0.930.400.200370.745DPI84.57±I32b3蜘67®4.88±O.86b816.26i3.02A12.51i3.14A10.27±10.810.290.010.29"DPI86.17±0.74b5.1O±O.85bq9.51±1.94b7.623L67115.990.590.010.01A14DPI77.14±1.1410.72±l.611O.1O±O.8268.43±0.83'■l9.97x1540.480.140.790.4121DPI6B.lillT*16.71*0.53*51125*L"15.25i0.41,b16.51iIJf0.630.030.$l0.5128DPI516.2M81ISW93'17.1M691413,23±0.241'16.62±1.IS11^,08±0.69*0.340,030.290.0735DPI4ll.35±1.25c11.94*1.15^16.66±0.37a1639虹时15451136'^1'311|44"0.4$0.020.010.200.2mg/kg生物素提高试验中后期机体的免疫力，且缓解了PCV2造成的细胞免疫应答抑制2.4生物素生物素对PCV2攻击下仔猪细胞因子的影响INF•血/ml)Non-PCV2-iiioculatedPCV2-inoculatedP-valuen0.00nig.fe(A-)0.05mg/h(B-)0,20mg/'kg(C-)n0.00mg/ig(A+):0,05in典(B+)020m典(C+)SEMBVBxVODPI860,06土123662,81土720B.81H2.9081.45123.6391.20112.5285.69±20.276：S0.110.867DPI87338土103严'7姗.俨65.52±5.73cdj\3541032⑶35>4.96d102.46±20.27a4.610,020.110.0114DPI7110.29=18,49'80,12913.22^"山財I58.12±12.72b60.23±10.54b59.87±4.80b4360,290.010.2121DPI666.54±5.2bc96.06±11.13a81.21"I46.04±11.77c60.04±9.46bc77.54±8.02^3,690.030.010,2228DPI560.1519.01121.60i30.61149,14土96,753208倾41188.37162.5511105.552SS40.920.2'03535DPI4167.66S5.76224.87S3.0318237117.23491,12土212723237土17.31189,81土132918.450.600.600.990.2mg/kg生物素提高INF-y水平，促进PCV2攻击下机体的免疫调节2.4生物素生物素对PCV2攻击下仔猪体液免疫的影响nNon»PC\2-moculatcd(pgkg)O.OOingkg(A-)0.05mgkgiB*)0.20mgkg(€•)nPCV2*!noculated(pgkgl).00nigkg(A，)0.05mgkg(B+)0.20mgkg(C+)SEA!P*\ahicBVB兰uminmeitsponsePCV2(W)PCV2antibo<h,titre•ODPI$0.055i0.020.047i0.010.045i0.02$0.077±0.020.07110.020.060i0.010.010,730.140.977DPI■0.048颂10.051i0.010.06110.01A0.077±0.020.107i0.050.04Si0.010.070.51OP0.2714DPI60.06飘。1‘0.084^0.01^0.074i0.01c60.11WO严0.149±0.03a0.1.3”0.010.37ooi0.8?21DPI5O.OSJtO.Ol1'0.!0M01bO.WTiO.O：115O.15S±O.O3k0.169t002'ij.295iO.08'0.010.060.010.0928DPI4O.WH.Ol80.111±0.01B0.H0i0.02B4ON顶时0.24J£0.06A0.01030ooi0.433$DPI30.09M011'O.lOMOl8O.lZOiO.Ol11303ISi0.08A036K05'戏MOI*0.010.640.010.42•添加生物素促进PCV2抗体生成2.4生物素生物素对PCV2攻击下仔猪IgG的影响Non^PCVrwoculattdPCV2«inocnlaiedp-valuenIInIImm~~I~nOOOingkg(A*)Q05叫kp(B・)020ingkg(G)nOOOrugkg(A^)QOS喫kg册)Q!0mgk"G)BV0XVIgG(叫id)0Dp|80.9889i0.(M2610050+00)59102601004428Q9W±Q0「61.0659f0.W0810^110000f0.16048Of•Dp]*0S94<10.0221"0.9621!0024r11。蝴6剛16"05^100160''O'l64fO.OW0.6.120tOW0.01?0.020010：l.DPI•5卩项撇"0'4^10.0^1O."<9?>0.0241'6竹3100。。6‘O636OM0I"0破J加0.01?()冊UUl0：6?IDpi6Q9岫)。肿1伽出"惻出贩:枷成懺地掰"0僞〔川顶m

50.861910.0388018*210.03600.9?58±0.017040.855310.05820.86*010.04460.8920+0.018'0.0150.14024055，伽4

心。鲫蛔。她伽J椰出"恥、.顷緋%『广响e•PCV2降低IgG的浓度，延迟免疫球蛋白的应答和峰值出现•添加生物素促进IgG合成，缓解PCV2消耗引起的IgG减少2.4生物素•添加生物素可在一定程度上提高正常仔猪的免疫力•显著缓解PCV2攻击引起的机体免疫抑制和组织损伤•免疫抑制情况下，适宜的添加量?2.4生物素不同生物素水平对PCV2攻击下仔猪生长性能的影响生物素0mg/kg0.10mgkg0.20mg/kg0