第二篇 ALB尿微量白蛋白检测

第一部分尿微量白蛋白（U-Albumin）的临床意义1982年Viberti等发现了糖尿病患者尿中总蛋白在正常范围，而尿白蛋白排泄增加的现象，首先提出了尿微量白蛋白的观点，并指出了这种蛋白的出现是肾病发生的早期预兆。随着检测技术的进步，目前主要用于对糖尿病、高血压患者早期检测发现微量蛋白尿，以便及时采取保护肾功能的措施，如限制蛋白的摄入量、禁烟、及时控制血糖和血压。因此及时检测尿微量白蛋白，对控制和防止早期肾病的发生极为重要。1、微量白蛋白尿的基本概念多种疾病可引起尿白蛋白排泄率持续增加，尿中用常规方法不能检测到，叫微量白蛋20－200mg/L发于糖尿病，高血压病人中的尿蛋白，称微量白蛋白。2、尿正常代谢及尿蛋白的形成尿是在肾脏内形成的。体内血流经肾小球毛细管时，其中的细胞、大分子蛋白质和脂绝大部分水分及电介质和葡萄糖等物质又被吸收回血，同时肾小管也分泌一些物质加入尿中，最后生成终尿。经输尿管、膀胱、尿道排出体外。病理情况下，由于肾小球内压力增高滤过增加或是基底膜改变，导致高滤过率而出现蛋白尿。3、微量白蛋白正常值：健康成年人尿微量白蛋白参考区间24h尿：＜30mg/L（24h最高量）(摘自卫生部医政司“全国临床检验操作规程”2006,第三版p356)与定性法比较有下列优点：敏感性高，可测出定性法阴性的标本CV5－8％5－200mg/L尿液特异性强能抗尿中多种物质的干扰分钟报告结果4、尿微量白蛋白测定的临床意义、对高血压病的应用价值尿白蛋白排泄率明显高于正常人，与收缩压、舒张压增高呈正相关，肾小球内压力上升，白蛋白滤过功能关系失调。可以帮助了解肾脏损害的程度。肾脏发生病变的最早信号之一是尿微量白蛋白增高。U-Albumin升高是心血管疾病进展的重要危险因子和预报指标。高血压伴U-Albumin应降压治疗，是减缓中断微小血管损伤的有效措施。目标130／85mmHgU-Albumin是血管病变的敏感指标，比眼底检查更敏感。、对糖尿病的应用价值可以预测糖尿病肾病的发展及早期诊断。糖尿病肾病最早的临床信号是尿白蛋白排泄率持续增高，出现微量蛋白尿。U-Albumin<30mg/L为正常白蛋白尿期；U-Albumin位于20－200mg/L为微量白蛋白尿期，临床可诊断为早期糖尿病肾病；一般认为此时病变经治疗尚可复原，尿微量白蛋白可转为阴性。24h，诊断为糖尿病肾病。U-AlbuminU-Albumin＞300mg/24h。U-Albumin助于观察糖尿病微血管合并症发生的敏感指标。有视网膜病变者U-Albumin排泄率＞30mg/L病人中，就有一个由糖尿病肾病发展而来，而许多病人却浑然不知，无知地走上了绝路。这个“无形杀手”之所以如此凶险，是因为前期病症基本无症状，此时尿微量白蛋白部分病人已可以测到。因此为了避免糖尿病肾病的发生，应定期检测尿微量白蛋白。型病人确诊时已型病人15－20期死亡的主要原因。、U-Albumin在其他疾病中的应用全身性或局部炎症反应的肾功能指标，如尿路感染等原因引起的肾脏早期病变。急性胰腺炎并发症的预测指标，U－Alb高者会发生严重并发症，＜200mg/L未发生并发症。服用对肾功能有影响的药物者也可检测尿微量白蛋白，便于早期观察肾功能情况及早采取措施。、U-Albumin测定时间首次阳性应在3－6月再测2次，2次阳性则为早期糖尿病肾病。2I型糖尿病，发病5年后每年3－6次。II型糖尿病，诊断明确时测试，3－6次／年，仅U-Albumin阳性，每三个月随访检测一次。⑸、重视实验前质量控制：标本留取：最好12h夜尿；尿液在膀胱内超过3h；首次晨尿较好，随机留尿也可但不提倡，两次以上阳性方可确诊。尿微量白蛋白试剂(ALB-DOT)特点和尿十联、糖化联合应用的建议U2-ALB-DOT定量读数仪和ALB-DOT快速(3-4分鈡)ALB12小时尿均可。2020-200mg/L是个非常适用的POCT快速测试系统。1、测试的主要技术数据检测评估单位由上海复旦大学中ft医院，上海交通大学仁济医院担当。7600自动生化仪，德灵特定蛋白分析仪和奥普U2爱国者仪器比对。ALB-DOT（胶体金法作比对。22012892例尿微量蛋白阴性尿。比对方法：不同操作人员，按说明书操作，比对用盲法结果：奥普ALB-DOT与两种进口试剂比对结果良好。12-250mg/L浓度时相关良好，相关系数R=0.981100%<12mg/L,>250mg/L。30mg/L和进口试剂一样，能快速准确定量检测尿微量白蛋白。2、ALB-DOT试验和尿十联等联合应用的建议：尿微量白蛋白测定是个非常重要的检测项目。这是在1982年Viberti者尿中总蛋白在正常范围，而尿微量白蛋白排泄增加的现象，指出了这种蛋白的出现是肾病发生的早期预兆，并首先提出了尿微量白蛋白的观点后迅速发展普及的一项试验。该试3验所以受到人们的青睐，是因为对肾功能损伤有极其好的早期诊断价值。尿微量白蛋白含量在20－200mg/L前我国有几千万现症病人，潜在的糖尿病前期的人数更多。据文献资料显示约有30％左右的糖尿病人并发糖尿病肾病并死于尿毒征。因此如果有一项医疗措施能够延缓或者中断糖尿病患者转化为糖尿病肾病！那么这一项措施一定成为一个社会热点关心问题。因为一当发现一个糖尿病肾病病人，对家人的拖累和社会的负担是很难想象的。因此对尿微量白蛋白临床检测价值的认识应更进一步普及深化！特别还有不少认识误区更应该及时纠正；临＋时也在应用尿微量白蛋白检测。这情况就绝对没有必要做尿微量白蛋白检测了。因为尿20-200mg/L含量的(检测的适应症并消除一些认识误区是非常重要的。因此我们建议：⑴、尿微量白蛋白和尿十联常规检测联用。这是一个十分新颖的观点和非常有用的经验。(＋--＋＋＋)的阳性反,微量白的检测。这种尿十联和尿微量白蛋白联合应用的临床价值是非常令人满意的。它的特点是超越人们的一般常规思维，在尿常规检测中挑选尿蛋白定性试验阴性病例，根据病史和适应症再作尿微量白蛋白检测的成功经验，已发现了许多肾脏损害处在可逆阶段的早期病人，获得了及时治疗的机会，终止了肾脏损害使尿微量白蛋白的排泄恢复正常。这一成功检测经验的探索，理论根据的来源得益于对尿微量白蛋白理化特性的深刻理解。尿微量白蛋白临床价值的几个关键点：一是发现在常规尿蛋白定性阴性时，出现的含量在20—200mg/L浓度的尿微量白蛋白；二是此时特别重要的临床病理阶段是病变处在可逆期，如能及时发现并能针对产生ALB和降压治疗措施，就能使ALB转为阴性。这是在疾病的进程中是难得的“天赐良机中医的治病是强调整体调理和冶未病的思想ALB时的最早信号。因此ALB试验和常规尿十联试验联动，在常规尿蛋白定性试验阴性的病例中，根据临床病史和诊断有重点的挑选部分病人做ALB检测，是非常有意义的！⑵、尿微量白蛋白和糖化血红蛋白联合检测糖化血红蛋白(HbA1c)对糖尿病的辅助诊断和并发症的预测有重要意义。且不受空腹和4用药的影响。空腹血糖只能反映抽血时的即时指标，糖化血红蛋白能反映近二个月来糖代1％(7％)，患者一般不会出现糖尿病1—22％糖尿性肾病等并发症的危险性就大大增加。这是理论上的规律。由于每个病人的个体差异不同，并发症可能性究竟有多大，只能依靠具体指标来说明。而尿微量白蛋白的出现正是肾脏损ALBHbA1c,无论对病人、家庭乃至社会的贡献是十分巨大的。⑶、ALB在重点病人和体检中的应用在临床上不管是疾病进展演变或者是应用各种药物后(特别是对肾功能有影响的药物)，均应该检测ALB白蛋白。以便能在肾脏损害的早期了解到肾功能的情况及早采取治疗措施。这些对于有效防止形成不可逆转的肾病有重要意义。ALBALBALB项目是非ALB对预测早期肾功能损伤的意义，他们表示ALB的检测即使自费也愿意承担。综上所述，我们了解了ALB试验对早期预防形成不可逆转肾病的重要意义。这些预防知识一经普及就受到了民众的普遍关注！前几年该试验的应用受到一定的限制。主要原因是应用的大部分进口试剂成本价超过了收费标准。现在好了，上海奥普生物医药有限公司研发的ALB试剂盒，获上海药监局正式批文，经上海复旦大学中ft济医院评估，结论：与进口试剂等效。上海奥普公司将提供质优、价格适应普通百姓应用ALB试剂，努力为人民健康服务。尿微量白蛋白快速定量试剂盒(胶体金法)临床试验报告上海交通大学医学院附属仁济医院临床研究负责人：于嘉屏研究员主要实验研究和数据统计：应春妹沈薇赵荣平徐燕萍5商品名：ALB-DOT研究开始日期：2008917日--928日研究摘要目的：使用仁济检验科现用DadeBehringN-BNALB-DOT（equivalent）及临床适用性。结果：ALB-DOTDadeBehring靠的判断微量白蛋白尿的临床性能。缩略语：ALB-DOT：尿微量白蛋白快速定量试剂盒(胶体金法)DadeBehring 德灵公司N-BN1、样品⑴、尿液样品：样品数为120例尿微量白蛋白的阳性尿液：62例；来源于体检人群尿：65587尿液化学分析质控品1ALB12、被评估试剂和比对法试剂比对方法试剂DadeBehring2004号；标准号：YZB/GEM0017，153931，效期至20111020104Dade特种蛋白分析仪测定。ALB-DOT：20/盒,上海奥普生物医药有限公司研制，6批号：20080701，142-8℃。ALB-DOTUppergoldU23、比对方法ALB前先对定量系统进行各自质控品自校，比对采用盲法，试验结果由仪器判读。（equivalent）ALB-DOT4、结果及分析⑴、定量等效性判断标准和统计分析经比对法确认微量白蛋白阳性尿62份，二法均可定量范围内(尿ALB20-200mg/L)56：y=1.0162xn=56，R=0.95尿微标本二法比对结果250200y=1.0162x+1.7398R=0.95150TOA100尿微标本二法比对结果250200y=1.0162x+1.7398R=0.95150TOA100500050100150200DadeBehring⑵、敏感度和特异性的判断标准和统计分析7①敏感度统计分析：62性尿液中，ALB-DOT59，ALB-DOT65Dade5857，ALB-DOT)=98.3%(57/58)。按方案中敏感度和特异性的判断标准，ALB-DOT(ALB＞30mg/L)足临床使用需要。⑶、可能的干扰观察ALB-DOTC(见产品定值表)。ALB-DOTALB<12mg/L，ALB-DOT蛋白，不是人白蛋白，ALB-DOTALB-DOTALB-DOT(1:100ALB-DOT5、临床研究质量控制方法简要阐述上海市交通大学附属仁济医院检验科通过上海市卫生部临床检验中心室间质量控制。测试样品前，用各自质控品或标准品校对各自定量系统，ALB-DOT50ALB（20080504)，ALB-DOT44mg/L，在作40-60mg/L153931169mg/L，153935150mg/L，140-170mg/L可接受范围之内。8在互不了解测定结果前提下，二法由不同人员操作，全部工作结束后，将原始记录输入电脑，计算统计。6、临床研究数据的统计分析方法MicrosoftExcel2000算统计、相关图的绘制。7、研究过程中方案的修改⑴、样品数量的修改n(1)：6362ALB20-200mg/L)40625640n≥40(2)：4558因临床实际收集65份，其中7份经比对法证实微量白蛋白尿阳性，按方案规定不纳入健康对照组。比对法确认微白阴性的体检健康人尿58份全部比对测试，不作丢弃。8、有关临床研究中特别情况的说明:无9、结论ALB-DOTDadeBehring20-200mg/LY=1.0162x+1.7398 (n=56) 相关系数R=0.95以比对法为标准结果：ALB-DOT的阳性符合率(敏感度)=95.2%(59/62)健康对照组比对测试显示：ALB-DOT)=98.3%(57/58)。尿液中常见化学组分葡萄糖、酮体、胆红素、亚硝酸盐、尿胆原、维生素ALB-DOTALB-DOT9尿微量白蛋白快速定量试剂盒(胶体金法)和DadeBehring(ALB＞30mg/L)足临床使用需要，ALB-DOT上海交通大学医学院附属仁济医院200892810尿微量白蛋白快速定量试剂盒(胶体金法)临床研究报告申请临床研究产品：尿微量白蛋白快速定量试剂盒(胶体金法)商品名：ALB-DOT研究开始日期：20081211日研究完成日期：20081217主要研究者：潘柏申研究单位：上海复旦大学附属中ft统计学负责人：吴炯研究摘要目的：使用中ft检验科现用Diasys（免疫透射比浊法）ALB-DOT（equivalent）及临床适用性。结果：ALB-DOTDiasys用需要，ALB-DOT缩略语：ALB-DOT：尿微量白蛋白快速定量试剂盒(胶体金法)Diasys：德赛公司微量白蛋白试剂盒（免疫透射比浊法，中ft比对法临床研究人员情况姓名姓名职称在本项工作中职责签名潘柏申研究员临床研究负责人吴炯主管技师临床报告撰写审核周琰技师采样和样品处理吴炯技师对比法测试者周琰技师ALB-DOT测试者吴炯主管技师数据统计临床测试单位主要参加人员姓名、职称、在本项工作中职责。11、样品、试剂与方法⑴、样品：送检尿微量白蛋白尿液：100例。⑵、被评估试剂和比对法试剂◆比对方法Diasys20063400230（更；标准号：YZB/GEM2059-2005，10326/47273，效期至201052-8℃，HITACHI7600-12020人份/盒,上海奥普生物医药有限公司研制，批号：20080701，142-8℃。ALB-DOTUppergoldU2⑶、比对方法ALB读。（equivalent）上的关系。r≥0.95，表明有良好等效性，ALB-DOTr0.92-0.95，ALB-DOT求。r＜0.92，表明ALB-DOT与上市比对产品的等效性差，无法满足临床使用要求。2、结果：等效性判断和统计分析100ALB20-200mg/L)28份，二法相关系数和回归方程为：y=0.9621x1.4712，n=28，10.96211.0，ALB-DOTALB-DOTALB12－250mg/L)442所示)。100Diasys52ALB-DOT≥30mg/L51=98.1%)。比对法Diasys48ALB-DOT100%)。ALB-DOT(ALB＞30mg/L)恰当，ALB-DOT图1 图23、临床研究质量控制方法简要阐述3⑴、上海市复旦大学附属中ft医院检验科通过上海市卫生局临床检验中心室间质量控制。50ALB（20080504ALB-DOT54mg/L，在40-60mg/L1）5.05mg/L，SD=1.5mg/L4.8mg/L，在比对法规定的靶值±2SD（2.05-8.05mg/L）范围内；2）46.65mg/L，SD=3.7mg/L44.9mg/L，也在比对法规定的靶值±2SD（39.25-54.05mg/L）范围内。⑶、在互不了解测定结果前提下，二法由不同人员操作，全部工作结束后，将原始记录输入电脑，计算统计。4、临床研究数据的统计分析方法MicrosoftExcel2000算统计、相关图的绘制。5、研究过程中方案的修改6116(81)1006151(101)1006、结论ALB-DOT与比对法Diasys，在定量尿微量白蛋白时的相关良好：在二法均可定量范围内(20-200mg/L)，ALB-DOT与比对法间的回归方程：Y=0.9621x+1.4712，(n=28)，相关系数R=0.952。在二法均可读数范围内(12－250mg/L)，ALB-DOT与比对法间的回归方程：Y＝0.9847x－0.3726,(n=44)，R＝0.977以比对法为标准结果：ALB-DOT98.1100%。尿微量白蛋白快速定量试剂盒(胶体金法)和Diasys微量白蛋白液体试剂盒(免疫透射比浊法)在尿微量白蛋白定量测定上有良好等效性，引用的微白尿4参考范围(ALB＞30mg/L)微量白蛋白尿的临床性能。上海复旦大学附属中ft医院20081217尿微量白蛋白定量检测操作规程（SOP）1、项目名称、检验方法名称：尿微量白蛋白快速定量试剂盒免疫胶体金干化学法2、 方法学原理尿微量白蛋白(U-AlbuminALB)是利用固相三明治免疫法原理，以反应板的硝基纤维膜作为干化学反应的载体，在反应膜表面包被特异性抗微量白蛋白单克隆抗体。稀ALB浓度呈正比，可用U2爱国者金标定量读数仪测定反应膜上胶体金反应的颜色强度，便可精确计算出标本中微量白蛋白的浓度。本试剂盒ALB标准起始于CRM470(IFCC/BCR/CAP)国际标准ALB。3、 试剂品牌、规格、内含物组份及试验用具名称ALBALBALBALBALBALB说明书

主要活性成分及浓度ALB抗体、致敏浓度0.5-1.5mg/ml1%牛血清白蛋白(BSA)，PH7.4PBS溶液，叠氮钠1-1.5mg/mlpH7.4PBSALB单抗胶体金缀合物、1%BSA双蒸水