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文档简介
专题2微生物的培养与应用章末检测一、选择题1•下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基的pH实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触待培养基冷却至室温后,在酒精灯火焰附近倒平板使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃2•下列关于微生物培养所需营养物质的叙述,正确的是凡是碳源都能提供能量碳源物质不可能同时是氮源无机氮源也能提供能量除水以外的无机物只提供无机盐3•关于微生物的培养,下列说法正确的是培养基、手、接种环、工作台等都需要用适宜的方法灭菌处理制备固体培养基的操作程序为计算、称量、溶化、灭菌、调pH、倒平板平板划线法和稀释涂布平板法都可用于大肠杆菌的纯化培养稀释涂布平板法统计的菌落数往往比实际活菌数多4.下面有关倒平板的操作,错误的是将灭过菌的空培养皿放在火焰旁的桌面上使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰等待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置把培养皿打开,将培养皿盖倒放在桌子上5•下列有关细菌纯培养的说法,不正确的是实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆菌液梯度稀释后用涂布法接种,得到单菌落便于计数制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中,关于倒平板的叙述不正确的是等培养基冷却后在酒精灯火焰附近倒平板右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰将锥形瓶中的培养基倒入培养皿后,立即盖上皿盖D•待平板冷却后将平板倒置,使皿盖在上、皿底在下用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是。涂布了一个平板,统计的菌落数是230B•涂布了两个平板,统计的菌落数分别是251和260,取平均值256涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212、256,取平均值163涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233下图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。下列有关叙述错误的是①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌①-③过程是梯度稀释,稀释溶剂是无菌水可用酚红染料鉴定,菌落周围是否出现红色圈下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述,不正确的是经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数在稀释度足够高时,所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同在相同培养条件下,未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染从土壤中分离以尿素为氮源的细菌,下列实验操作不正确的是分解尿素的细菌能产生脲酶,将尿素分解产生氮气将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上将土壤用无菌水稀释,制备104〜106稀释倍数的土壤稀释液D•以尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌,指示剂变红下列关于纤维素酶的说法,错误的是纤维素酶是一种复合酶,包括多种组分葡萄糖苷酶可把纤维素分解成纤维二糖纤维素酶可用于去掉植物细胞的细胞壁纤维素酶可把纤维素最终分解成葡萄糖下列关于分离纤维素分解菌的实验的叙述,错误的是经选择培养后将样品直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时,选择培养这一步可以省略可先在固体培养基上培养微生物,再用刚果红溶液染色鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述,不正确的是纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后,还需进一步鉴定纤维素酶的测定方法,一般是对消耗的纤维素进行定量的测定纤维素酶是一种复合酶利用农作物秸秆为原料可生产乙醇,生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解,其主要技术流程如下图所示,下列相关说法错误的是酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌过程①加入的是葡萄糖苷酶酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵可用刚果红染色法筛选过程①所需的纤维素分解菌纤维素酶在工农业生产中的应用是饲料添加剂白酒的生产蔬菜纺织TOC\o"1-5"\h\z①②③①②④②③④①②③④下列关于纤维素酶的叙述中不正确的纤维素酶可将纤维素先分解为纤维二糖再分解为葡萄糖纤维素酶含有C、H、0、N等化学元素用纤维素酶处理玉米根尖成熟区细胞后,将细胞放入0.3g/mL的蔗糖溶液中出现质壁分离现象纤维素酶是一种复合酶某校生物兴趣小组研究发现,秸秆还田的过程中施加外源纤维素酶能起到较好的效果。下列有关叙述错误的是纤维素酶是一种复合酶,其中纤维二糖酶能够将纤维素分解为纤维二糖纤维素分解菌主要分布于富含纤维素的环境中,纤维素分解菌常用刚果红染液进行鉴定菌落周围的透明圈大小可以反应纤维素分解菌产生的酶的多少为了确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产生纤维素酶的实验二、非选择题聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料,科学家发现了以PET为碳源和能量来源的细菌,该发现对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。请回答下列问题:实验小组欲从土壤中获取PET降解菌,需将土壤样品置于为唯一碳源的培养基中进行选TOC\o"1-5"\h\z择培养,其目的是。该实验小组选取PET浓度为800mg・L-1的富集液进行系列稀释,分别取10-3、10-4和10-5倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上,每个稀释倍数涂布三个平板,各平板的菌落数分别为(286、298、297),(35、32、31),(36、7、2),不适合用于计数的为倍数的稀释液,用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是。倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是。在倒平板的过程中,如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,则这个平板不能用来培养大肠杆菌,原因是。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中,在第二次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端开始划线,原因是。在保藏PET降解菌菌种时,可采取的方法进行长期保存。为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分及用量(g)如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题。
KHPO24NaHP024MgSO・7H042葡萄糖尿素琼脂1.42.10.211015将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL播廻迤史二回妙怦r按神播廻迤史二回妙怦r按神在脲酶作用下尿素分解的反应式是培养基中加入尿素的目的是筛选,这种培养基属于培养基。实验中需“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的和实验中需要振荡培养的目的是。转入固体培养基时,常采用接种,获得单菌落后继续筛选。实验结束后,使用过的培养基应该进行处理后,才能倒掉。农作物秸秆是宝贵的可再生资源,已有多种方案充分利用这类资源。回答下列问题:秸秆粉碎翻压还田,就是把作物收获后的秸秆通过机械化粉碎、耕地、直接翻压在土壤里,这主要是利用土壤中的(微生物)。实验室鉴别此类微生物的方法是法,一般用(接种法)将该菌接种到鉴别培养基上,经过一段时间的培养后,在菌落的周围应该出现。纤维素可在微生物作用下转化为葡萄糖,可再接种(微生物)进一步发酵生产酒精。之后还可以通过接种醋酸菌将酒精转化为醋酸,在利用该微生物进行液体深层醋酸发酵时,对气体的需求情况是。£参考答案乡【答案】C【解析】应根据磁生物耗谢姜型选澤合适培养基并揑制好培养基曲A正确:实驰操作时应避免已天茵贮理的封料用具写周围物岛接蝕,殴防止乗薔污染,B正确:持培泰基冷却至50t左右时,在酒棘灯火燔附近罔平板,净却到室遥时培养基已经疑囲’C黠误;使刖迂的培养基应进行高压棊汽天苗处理后再丢弃,以防止杂菌污染环境,D正确。【答案】C【解析】无机物碳源不提供能量,A错误;同一种物质可以即作碳源又作氮源,如牛肉膏,B错误;自然界中一些微生物如硝化细菌,可以以无机氮源合成细胞物质,同时通过氧化无机氮源获得生长所需能量,C正确;无机物也可提供碳源和氮源,如碳酸盐和硝酸盐,D错误。【答案】C【解析】培养基r堆种环“工柞台等靠需要用追宜药方法天菌处理,而手只能消毒'不能天菌'A错误:制备固体培养基的嫌作程序为计算r称量、溶优、调pH、灭茵、倒平板,B错误:平板划號法和祁涂布平板法都可用于大场杆茵的纯杞培养,C正踽;由于茵落舍査叠,所跟稀釋涂布平板法统计的茵落数往往比实际活茵数少,D橙逞口【答案】D【解析】将灭过菌的空培养皿放在火焰旁的桌面上,以防止杂菌污染,A正确;使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰,对锥形瓶的口径处进行灼烧灭菌,防止空气中的杂菌污染,B正确;等待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,C正确;倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上,这样会污染培养皿中的培养基,D错误。【答案】C【解析】在培养细菌时要获得纯净的培养物,需要进行严格的消毒或灭菌,实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒,A正确。每次划线后为了保证划线时的菌种只来自上次划线区域的末端,所以每次划线后都要灼烧灭菌,最后一次是为了杀死菌种,防止污染环境,B正确。培养基上的单个菌落是由一个细菌细胞繁殖而来的多个细菌,C错误。菌液梯度稀释后用涂布平板法接种,有利于得到单菌落,方便计数,D正确。【答案】D【解析】等培养基冷却至50°C左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,防止杂菌污染,A正确;右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰,高温防止杂菌污染,B正确;右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿,左手立即盖上皿盖,并通过酒精灯火焰,C正确;等待平板冷却5〜10分钟,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上,D错误。【答案】D【解析】在设计实验时,一定要涂布至少3个平板,作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以A、B项不正确。C项虽涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另两个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。【答案】C【解析】尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解,从而能利用尿素,其他微生物不能,因此要分离纯化尿素分解菌,培养基都应以尿素为唯一氮源,A正确;对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法,B正确;①〜③过程是梯度稀释,该过程用来选择培养尿素分解菌,因此稀释溶剂应该是含有尿素为唯一氮源的培养基,而不是无菌水,C错误;分解尿素的细菌能将尿素转化成氨气,使培养基碱性增强,pH升高,酚红指示剂会变红,因此可用酚红染料鉴定,菌落周围是否出现红色圈来鉴定,D正确。【答案】C【解析】试題分折:绘:高压蒸汽灭茵的培养基所阖平般和接聊后培养时的平概均真罔置,以防止劇菌污染,A项正确;同一稀释度下至少要涂弗三个平桩并且要培养到菌蒼敖穩定时计斟,并求其平均虬R项正确:细菌以二介製的方式进行增殖,不能确保遗传物质平均分酯,所以在林度足够高时,所册成的单卒菌落中斯疽细麗的遗張信息不一定拒同,C项错误;在相同培养备杵下,未接种的培养基壷面无茵落生母说明培养基没疽祓杂茵污染,D项正确。【名师点睛】土壤中分解尿素的细菌的分离实验的原理筛选菌株的原理:微生物的选择培养:在选择培养基的配方中,把尿素作为培养基中的唯一氮源,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。鉴定分解尿素的细菌⑴原理:CO(NH2)2+H2O^CO2+2NH3;由于NH3的产生,培养基碱性增强,PH升高,因此可通过检测pH的变化来判断该化学反应是否发生。方法:以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌,若指示剂变红,则pH升高,说明该种细菌能分解尿素。【答案】A【解析】分解尿素的酶能将尿素分解成NH3和CO2,A错误;将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上,B正确;将土壤用无菌水稀释,然后经过系列稀释,制备104〜106土壤稀释液,C正确;鉴定分解尿素的细菌可用加入酚红指示剂的尿素为唯一氮源培养基是否出现红色来判断,D正确。【答案】B【解析】纤维素酶是一种复合酶,包括C酶、C酶和葡萄糖苷酶,A正确;葡萄糖苷酶可把纤维二糖分1X解成葡萄糖,B错误;植物体细胞的细胞壁主要由纤维素和果胶组成,所以纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁,C正确;纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖,D正确。【答案】A【解析】分离纤维素分解菌时,经选择培养后,样品应稀释后涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,A项错误;选择培养的目的是增加菌体浓度,当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时,选择培养这一步可以省略,B项正确;可先在固体培养基上培养微生物,再用刚果红溶液染色,也可以在倒平板时加入刚果红,C项正确;鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物,D项正确。【答案】C【解析】刚果红染液可以与纤维素结合形成红色的复合物,在培养基中进入刚果红染液可以鉴别纤维素分解菌,其产生的纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖而使其菌落周围出现透明圈。纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵,A正确;如果在鉴别培养基观察到产生透明圈的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验,B错误;纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定,C正确;纤维素酶是一种复合酶,主要包括:C酶、C酶、葡萄糖苷酶,D正确。1X【答案】B【解析】分祈流程囲可扣『该生产过程申晃利用纤维素分解茁等微生畅蒋农作物卷秆中的纤维素分解为葡萄亀在利用碑母菌发醸生产酒赫;图中酒蓿发琲前培养基中存在大量药朦生瓠务保证酒棘发酔的顺刊进行,需对培养基进行高压薫汽灭菌,A正确;过釋①加入的是纤嬪素分解曹,利用纤堆素分解菌产生的纤畢素肾(包据葡萄藕替障)特粘秆中的纤维素分解为繭萄膽,B错误:酒辖发醉接种的醉母茵需在无轨条杵下发醉才尴产生酒措,C正确:可用刚杲虹染邑法筛选过程①所需的野维素分解菌,D正确“【点睛】解题思路点拨:纤维素分解菌可分解纤维素,是因为其可产生纤维素酶,纤维素酶包括三种组分,即C酶、C酶和1X葡萄糖苷酶,C酶、C酶催化纤维素分解成纤维二糖,葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。1XCR能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后,CR纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌的菌落为中心的透明圈,故可用刚果红染色法筛选过程①所需的纤维素分解菌。【答案】D【解析】纤维素酶能将纤维素水解为葡萄糖,因此可作为动物饲料添加剂,提高饲料的有效能值,还提高胞内物质的消化率,消除抗营养因子,为动物提供蛋白质类物质等,纤维素酶又可用于白酒生产、蔬菜、纺织工业中,故D正确。【答案】C【解析】纤维素酶是一种复合酶,包括q酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种,其中q酶、Cx酶把纤维素分解成纤维二糖,葡萄糖苷酶能够将纤维二糖分解为葡萄糖,A正确;纤维素酶的化学本质是蛋白质,蛋白质含有C、H、0、N等化学元素,B正确;用纤维素酶处理玉米根尖细胞后,细胞壁被纤维素酶分解,因此放入0.3g/mL的蔗糖溶液中不会出现质壁分离现象,C错误;纤维素酶是一种复合酶,包括q酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种,D正确。【答案】A【解析】纤维素酶是一种复合酶,包括q酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种,其中q酶、Cx酶把纤维素分解成纤维二糖,A错误;纤维素分解菌主要分布于富含纤维素的环境中,刚果红染液可用于鉴定纤维素分解菌,B正确;菌落周围的透明圈大小可以反应纤维素分解菌产生的酶的多少,纤维素酶含量越多,透明圈越大,C正确;为了确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产生纤维素酶的实验,D正确。【答案】(1)PET增加PET降解菌的浓度,以确保能分离得到目的菌10-5稀释倍数为10-3时,更多的菌落连在一起最终形成单菌落,导致结果小于稀释倍数为10-4组的结果灭菌,防止微生物污染空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生使细菌数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落甘油管藏【解析】(1)獻賦土龜中获取PET降轉菌土畫将土叢样品置于以PET为唯一瞇賄的培养基中进行选择培养,其国的是增加PET降解茵的液度,以确保能分离得劃目的茵-(2)为了保证结果准确,一般选择茵落數在珂〜珂0的平板进行计數,攥此结合题意可如:不追合用于计数的为整毀的林滋用务外两组稀释倍数的稀释液遥行计數,舞到的细菌数不一致制廉因可能是稀释倍就为更娄的茵落连在一起谨蚌■彌庶单茵落,导致話杲4于稀释倍教沟10斗组的结杲.(3)寓平板时应M母瓶的瓶口璇过火燔,其国的是天茵,防止撤生稱污染-在倒平板的过程申,如果培养基渡在远苣与皿底之间的部住,空宅中的磁生樋可能在皿盖与匹底之间姑培养基上溢生,因此这个平核不能用来培养大肠杆菌口用平板划號这纯化PET降粹茵萌过程中,为使细菌董目随着划蛭衣敷齢靖加而逐渐减少,最咚帝到由单个细茵緊殖而壶的茵落,裡第二冼观其后砖划我揀柞时,须航上一盘划嫌砖末端开绘划號口⑷对于需要世期保存的苗种,可叹条用甘油營義的方达-【答案】(1)尿素+水一二氧化碳+氨目的菌选择尿素葡萄糖使菌体充分接触培养液,增加溶氧量稀释涂布平板法(或平板划线法)灭菌【解析】(1)脲酶可以将尿素分解成氨,即尿素+水一二氧化碳+氨。氨会使培养基的碱性增强,pH升高,酚红指示剂变红,
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