无菌检验操作规程

医疗器械产品无菌检验操作规程目的通过无菌检验，确保灭菌后产品能够到达无菌的要求。适用范围适用于灭菌后医疗器械产品的无菌检验。检验依据〔2023年版〕GB14233.2-2023医用输液、输血、注射器具检验方法其次局部：生物试验方法GB15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准仪器、设备菌仪〔器、电子天平、PH计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、三角烧瓶，接种环、无菌棉签、镊子，试管架，大试管假设干等。无菌检验室的环境要求无菌检验应在环境干净度10000级下的局部百级的单向流空气区域内进展。缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压，阳性比照室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于10Pa。无18～26℃，相对湿度：45～65%。〔区〕悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进展悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的监测。每年至少检测一次。330min30～35℃培育1CFU/平板。无菌检验前的预备器具灭菌、消毒灭菌：试验过程中与供试品接触的全部器具必需承受牢靠方法灭菌。可经160212130分钟后使用〔依据灭菌效果验证打算灭菌参数。全部的灭菌物品不应超过2周即用毕，否则应重灭菌。消毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应每月更换，以防止产生耐药菌株。效期。人员、物料进入无菌检验室开启紫外线灯或臭氧发生器进展空间灭菌处理，消毒时间不得少于30min。物料进入无菌检验室流程脱包：进入无菌检验室的物品假设有双重包装的，需将外包装在传递窗/缓冲间撤除后，传入试验室。法进展消毒处理，以避开将外包装污染的微生物带入无菌检验室。期内。符合要求的经传递窗传入无菌检验室。人员进入无菌检验室流程般区工作服。20秒，洗净泡沫。等，要求裤子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹全部头发。手消毒：用消毒液浸泡双手5毒液可用洗必泰、洁尔灭、碘伏、75%酒精等。人员进入：经缓冲间进入无菌检验室。7无菌检验操作要求全过程必需严格执行无菌操作，防止微生物污染。使用玻璃器皿应轻取轻放，避开破损，以防培育物集中。中的尘埃微粒。使用金属接种器具时，用前、用后均需灼烧灭菌。在接种培育物时，动作应轻、准，防止培育物溅出，产生汽溶胶，造成污染。随用随时放入消毒液缸内浸泡或消毒桶内，或在检验完成后经传递窗传至一般区，12130分钟。培育基制备需气菌、厌气菌培育基〔硫乙醇酸盐流体培育基〕的制备所用试剂酸0.3ml〕5.0g2.5g0.11.0ml0.75g1000ml制备除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调整pH为弱碱性，煮pH7.1±0.2。20分钟〕快速冷却，只限加热一次，并应防止被污染。霉菌培育基〔改进马丁培育基〕的制备所用试剂5.0g2.0g20.0g1.0g0.5g1000ml制备pH6.8，煮沸，加葡萄pH6.4±0.2。还可使用按处方生产的符合规定的脱水培育基，依据使用说明书配制。121℃灭菌30分钟。制备好的培育基应在2～25℃保存，在3周内使用。〔可与产品无菌检验同步进展。检查时，每批培育基随机取不少于5支〔瓶〕培育14天，应无菌生长。稀释液、冲洗液的制备1.0g1000ml，微温溶解，滤清，分装后304℃保存备用。,分装后置入压力121304℃保存备用3.56g7.23g、氯化1000ml。微温溶解，滤清，分装后置入压力蒸汽灭菌121304℃保存备用。浸提介质：9g/L无菌氯化钠溶液，可直接从有证单位选购大输液。10比照菌液制备无菌检验所用的菌株传代次数不得超过5代。30～18～24h0.9%69.0ml0.9%12130min备用。将已配好1:10的菌液；1.0ml1:100的菌液，同法1:106〔ml含菌量≤100CFU〕即可。承受平皿计数法测定活菌数。无菌检验培育温度30～35℃培育。23～28℃培育。无菌检验12.1项下各项。量菌片，灭菌后对菌片进展无菌检验。菌片贮存灭菌前、后菌片应按菌片说明书规定条件保存。醇酸盐流体培育基和未接种的改进马丁培育基作为阴性比照。培育30～3548～72小时。30～357天。23～287天。菌、厌气菌和霉菌生长的为合格。如产品注册标准中明确产品应进展无菌检验，则执行12.2.1～12.2.5。抽样3～11个单位供试品。供试液预备试品不适宜直接投放，可按以下方法制备供试液，应使浸提介质充分洗供给试品的2小时内使用。依据供试品具体特性选择以下方法：管类器具：按管内外表积每10cm2流过管内腔1ml浸提介质，流量约为10ml/min，收集到无菌的容器内。10cm21ml的比例，振摇数集上述冲洗液或浸提介质于无菌容器中。接种〔集菌器膜过滤器。滤膜孔经不大于0.45µｍ。滤器和滤膜使用前应承受适宜的方法灭菌，或直接承受无菌集菌器。120ml改进马丁培育基，120ml硫乙醇酸盐培育基〔其中一只做阳性比照，内加金黄色葡萄1ml120ml通过集菌仪过滤〔50ml120ml，另一只加改进马丁培育120ml分别作阴性比照。3等份，分别置50ml硫乙醇酸盐流体培育基及改进马丁培育基的容器中，其中两份作检验，一份作阳性比照。〔包括输液器、输血器、注射器配套使用注射针。120mg1cm×3cm的供试品，接种于各管足以浸没供试品的适量培育基中。b15ml以上硫乙醇酸盐流体培育基及改进马丁培育基的容器中。c、一次性使用的材料：拆散或切成小碎断，接种于各管足以浸没供试品的适量培育基中。供试品按规定量分别接种至各含硫乙醇酸盐流体培育基及改进马丁培育基的容器中，其中一份作阳性比照。每个容器中培育基的用量应符合：接种的供试品体积不得大于培育基体积的10%，或培育基的装量足以浸没供试品。每管培育基的最低用量——硫乙醇酸盐流体培育基每管装量不少于15ml，改进10ml.培育、观看48～7214天。培育期间应逐日观看并记录是否有菌生长。如在参加供试品后、或在培育过程中，培育基消灭浑浊，培育14天后，不能从外观上推断有无微生物生产，可取该培育液适量转种至同种颖培育基中或划线接种于斜面培育基上，细菌培育2天，真菌培育3天，观看是否再消灭浑浊或斜面有无菌生长；或取培育液涂片，染色，镜检，推断是否有菌。结果推断全部供试品管均澄清，或虽显浑浊但经确证无菌生长，判供试品符合规定。假设供试品管中任何1管显浑浊并确证有菌生长判供试品不符合规定。以一次检出为准，不得复试。当符合以下至少一个条件时，可判试验结果无效