紫外－可见分光光度法

一.光的性质

及物质对光的吸收性质：波粒两象性横波、光量子流波谱：分析中常用UV~Vis、IRUV~Vis属电子光谱，灵敏度较高（10-4～10-6）物质对光的吸收吸收光谱的产生（吸收曲线）λ(nm),A(T)二.基本概念(一)电子跃迁类型价电子分子轨道价电子：原子壳层中最外层电子仅需考虑未满壳层中的电子分子轨道成键轨道bondingorbitalsσ、π反键轨道antibondingσ*、π*非键轨道n分子轨道之间跃迁基态激发态基态:能量最低状态S0激发态:电子处于反键轨道上为激发态1.σ→σ*跃迁吸收峰在远紫外区饱和烃类＜150nm在200～400nm没有吸收甲烷λmax=125nm2.π→π*跃迁孤立的π→π*，200nm，ε＞104乙烯，165nm1，3丁二烯217nm（ε2100）（共轭）3.n→π*跃迁含杂原子不饱和基团，-C=O,-C=N，-N=N近紫外区(200～400nm)，ε小，约在10～100之间。丙酮的λmax=279nm4.n→σ*跃迁含一OH，一NH2，一S等基团化合物λmax200nm左右二）常用术语：

1.发色团（chromophore）含π→π*或n→π*跃迁的基团如C=C、C=O、-N=N-、NO2、-C=S等2.助色团(auxochrome)杂原子的饱和基团与发色团或饱和烃相连，吸收峰向长波方向位移。如-OH、-NH2、-Cl、-SR、-OR等。苯λmax=256nm（ε=220）苯酚λmax=270nm（ε=1450）3.长移、短移长移：长波方向移动，又称红移短移:短波方向移动，又称蓝（紫）移4.增色效应和减色效应吸收强度增加称增色效应或浓色效应(hyperchromiceffect)：使吸收强度减弱称减色效应或淡色、效应(hypochromiceffect)（三）影响吸收带的因素1.位阻影响λmax208nm（10500）λmax295.5nm（29000）2.溶剂效应影响吸收峰位置、吸收强度和光谱形状一般应注明所用溶剂稀溶液消除分子间力

3.体系pH值的影响λmax210.5nm，270nmλmax235nm，287nm三.定量原理一）

Beer-Lambert定律1729年，P·布古厄（Bouguer）观察到入射光被介质吸收的多少与介质的厚度成正比。这后来又被J·H·兰贝特（Lambert，1728—1777）所发现，他对单色光吸收所作的论述得到了关系式1852年，A·比尔（Beer）证实，许多溶液的吸收系数a与溶质的浓度C成正比的。尽管比尔本人没有建立那个指数吸收定律公式但仍被叫做比尔定律，这个名称似乎在1889年就开始使用1.Lambert-Beer定律A=-logT=logI0/I=abcA为吸光度

a吸光系数T透光率2.吸光系数摩尔吸光系数：ε百分吸光系数：二）偏离Beer定律的因素1.化学因素溶液中溶质可因浓度改变而有离解、缔合与溶剂间的作用等原因2.光学因素(1)非单色光(2)杂散光(3)散射光和反射光(4)非平行光紫外—可见分光光度计光源→单色器→吸收池→检测器→记录仪主要部件1.光源：强、稳定、连续光谱(1)钨灯和卤钨灯(2)氢灯或氘灯：150～400nm2.单色器连续光谱→按波长顺序色散→单色光单色器由进口狭缝、准直镜、色散元件、