UPLC法测定注射用头孢噻肟钠含量

UPLC法测定注射用头孢噻肟钠含量摘要：目的优化含量测定方法，缩短注射用头孢噻肟钠的含量的检测时间，提高检验效率，确保样品含量的准确性。方法采用Agilent-poroshellEC-C18(120mm*50mm,2.7口m)色谱柱，柱温30°C;以0.05mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15)为流动相，等度洗脱；进样量2口1；检测波长为230nm。结果头抱噻肟的线性范围为92.2〜1383.0口g/ml；平均回收率为99%,RSD%为0.42%。结论优化后的含量测定方法分析速度快、进样量小，节省溶剂、是快速分析的理想选择。关键词：UPLC；注射用头抱噻肟钠；含量测定DeterminationofCefotaximeSodiumforInjectionbyUPLCGaoJialu1，LiuChao2，WangNing3，YaoQingmei*ChenXi*(HainanGeneralSanYangPharmaceuticalCo.,Ltd)Abstract:ObjectiveTooptimizethemethodofcontentdetermination，sheortentheinterleafdetectionandimprovetheefficiencyofdetermination.Ensuretheaccuracyofsamplecontent.MethodsAgilentporoshellEC-C(120mm*50mm,2.7口m)Thecolumntemperaturewas30C;18Themobilephasewas0.05mol/Lphosphatebuffer(-methanol(85:15)withisocraticelution;Injectionvolume2口l；Thedetectionwavelengthwas230nm.ResultsThecalibrationcurvewaslinearovertherangeof92.2〜1383.00口g/mlforCefotaximeSodium；Theaveragerecoverywas99%.Thecoefficientsofvariationwere0.42%.ConclusionTheoptimizdemethodhastheadvantagesoffastanalysisconfusion，smallinjectionvolume,savingsolvent,Itistheidealchoiceforquickanalysis.Keywords:UPLC;CefotaximeSodiumforInjection;Assay.注射用头孢噻肟钠收载于2020年版“中国药典”二部，为头孢菌素药，是头孢噻肟钠的无菌粉末，用于敏感细菌所致的肺炎及其他下呼吸道感染、尿路感染、脑膜炎、败血症、腹腔感染、盆腔感染、皮肤软组织感染、生殖道感染、骨和关节感染等。我司规格有1.5g和2.0g，其含量测定检测耗时长。因此，有必要对其质量标准进行提升研究。本研究建立UPLC法测定含量，研究表明，检测时间明显缩短，为其质量控制提供简便、快速可靠的检测方法。1、仪器与试剂1.1仪器高效液相色谱仪：Waters-ArcACQUITY；电子天平：MettlerXS1051.2试剂超纯水、无水磷酸氢二钠、甲醇、头孢噻肟系统适用性对照品、头孢噻肟对照品、注射用头孢噻肟钠（三洋药业）2、检验方法2.1色谱条件色谱柱为Agilent-poroshellEC-C，120mmX50mm2.7口m；流动相为180.05mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇（85:15）；流速为l.Oml/min；检测波长230nm；柱温30°C；进样量2口l2.2溶液制备2.2.1对照品溶液：取头孢噻肟对照品适量，精密称定，加流动相溶解病定量稀释制成每1ml中约含头抱噻肟1mg的溶液;2.2.2供试品溶液：取装量差项下得内容物适量，精密称定，加流动相溶解病定量稀释制成每1ml中约含头抱噻肟1mg的溶液；系统适用性溶液;取头孢噻肟系统适用性对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。3、方法验证及结果3.1专属性-溶剂干扰、定量限、头抱噻肟峰与头抱噻肟系统适用性出峰是否一致3.1.1溶剂干扰取本品溶剂，按第2项色谱条件进样2ul,空白溶剂在头抱噻肟主峰位置应无干扰，结果符合规定。3.1.2头抱噻肟系统适用性试验取头抱噻肟钠系统适用性对照约5mg精密称定，至5ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，按第2项色谱条件进样，头抱噻肟主峰的保留时间为2.943min。定量限（LOQ）取头抱噻肟钠精密称定用溶解溶解配制成每ml含0.2口g的溶液；S/N应在10-30；连续进样6针样品的主峰的保留时间RSDW1.0%；峰面积RSDW10%；结果S/N在17.8-23.2之间，保留时间及峰面积RSD分别未0.9%和7.3%。3.2进样精密度。取头抱噻肟对照品精密称定，加流动性制成每ml中含头抱噻肟1mg的溶液,按2项色谱条件进样；连续进样5次对照品溶液的峰面积及保留时间RSDW1.0%；结果，连续进样5次峰面积及保留时间RSD分别为0.10%和0.055%。3.3重复性

取注射用头抱噻肟钠样品，精密称取6份，加流动相稀释制成每ml中含lmg的样品，按第2项色谱条件进样，分别按平均装量计算(平均装量1.6083g)；6份供试品溶液头抱噻肟含量结果RSDW2.0%；结果，6份供试品溶液按平均装量计，平均含量为103.6%,RSD均为0.15%。3.4线性关系考察取头抱噻肟钠对照品50mg精密称定，加流动相溶解并稀释至25ml量瓶中作为储备液，分别精密量取储备液0.5ml(10%)、1ml(20%)、2ml(40%)、3ml(60%)、5ml(100%)、7.5ml(150%)分别置10ml量瓶中，在设置的浓度范围内，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，相关系数R应不小于0.998；结果，线性方程为Y=4550078.5X+100,R2=0.99923.5准确度取注射用头抱噻肟钠精密称定，加流动相稀释制成含量为80%、100%、120%的溶液，每个浓度分别配制3份，按外标法计算9个样品的实测浓度，并计算回收率。X100%公式：X100%回收率=要求：各浓度下的回收率均应遵循下表(2020年版药典四部要求)，在98%〜101%之间，9个数据的RSDW2.0%。结果见表1：理论加入实际测得量(mg)量(mg)理论加入实际测得量(mg)量(mg)浓度回收率％平均回收率％RSD%80%-15.2915.1799.280%-15.5915.4899.380%-15.8115.8099.9100%19.5819.5399.7990.42100%18.8818.8399.7100%18.2518.0999.1120%23.6123.3398.81120% 23.0023.21 99.123.61100.023.61100.0结果：9份样品平均回收率99%，RSD:0.42%。4、优化方法与优化前方法含量测定结果对比。随机取3批放置48小时的样品溶液，按第2项色谱条件测定，将测定结果与原色谱条件的测定结果进行对比；结果见表2：批号HPLC法含量测定结果UPLC含量测定结果（溶液放置48h）相对偏差按平均装量计批号1（长期6月）99.4%100.6%0.60%批号2（长期6月）99.2%100.9%0.85%批号3（长期6月）99.5%100.6%0.55%结果：方法变更后与变更前含量测定结果的相对偏差V1.0%。5、讨论：注射用头抱噻肟含量测定现行执行方法为2020版中国药典（HPLC法），色谱柱为C，规格为250mmX4.6mm,5um、进样量为10口1,在原方法基18础上，经过改良后的方法（UPLC法），色谱柱规格变更为120mmX50mm,2.7口m,进样量减少至2»1、主峰保留时间缩短为约3min（原方法主峰保留时间约为40min），比原色谱方法出峰时间大大提前，检验效率大幅提高，放置48小时样品测定结果与原色谱条件的含量测定结果对比，结果优于HPLC法。所以，改良后的UPLC法能较好的用于注射用头抱噻肟钠的含量测定，对改进方法的可操作性，提高工作效率，节约资源有较好体现，建议采用。参考文献《中国药典2020年版》四部9101分析方法验证指导原则及0512高效液相色谱法。MarkEB.使用超高效液相色谱ACQUITYUPLC快速分析醛酮类化合物[J].环境化学,2008,27（4）：549-550.陈佳，王钢力，姚令文，等•超高效液相色谱（UPLC）在药物分析领域中的应用[J].药物分析杂志，2008，28（11）：1976-1981.高青，刘颖，宋彬彬，等.超高效液相色谱与高效液相色谱方法转换及验证.药物分析杂志，0254-1793（2016）07-1279-08.作者简介：高嘉璐、1983年3月、女、汉族、辽宁清河、海南通用三洋药业有限公司、QC主管、制药工程师、执业药师、本科、研究方向：质量控制与质量研究、邮箱：刘超、1981年9月、男、汉族、湖北武汉、海南通用三洋药业有限公司、研发主任工程师、制药工程师、本科、研究方向：实验室管理与质量研究、邮箱：王宁、1979年11月、女、汉、海南、海南通用三洋药业有限公司、质量主任工