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选修3现代生物科技专题第1讲基因工程限制酶原核核苷酸序列特定的磷酸二酯键黏性末端恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键结果连接连接黏性末端功能T4噬菌体大肠杆菌来源T4DNA连接酶E·coliDNA连接酶常用类型黏性末端或平末端
限制酶标记基因动、植物病毒基因基因文库PCR技术标记基因基因的首端转录出mRNA转录受体细胞目的基因基因的首端转录出mRNA转录受体细胞目的基因稳定和表达转录抗原——抗体杂交分子抗逆器官移植正常基因基因修饰新的蛋白质蛋白质功能蛋白质结构氨基酸序列脱氧核苷酸序列条件适应性稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组DNA的鉴定和选择生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射技术感受态细胞法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子项目蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需蛋白质定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品结果生产自然界没有的蛋白质一般是生产自然界已有的蛋白质项目蛋白质工程基因工程联系蛋白质工程是在基因工程的基
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