实验六血细胞计数及血涂片制作

实验六血细胞计数及血涂片制作第一页，共二十五页，2022年，8月28日血细胞计数1．熟悉并清洗计数板和盖玻片2．稀释血液：

血样采集：兔耳缘静脉采血血样抗凝：肝素钠抗凝血样稀释：如下第二页，共二十五页，2022年，8月28日实验操作

红细胞稀释液：生理盐水白细胞稀释液：冰醋酸(盐酸)红细胞计数：0.9%NaCl1.99mL+0.01mL血，稀释200倍白细胞计数：1%HCL0.38mL+0.02mL血，稀释20倍3．充池：（混匀，从中间取）4．静置计数板2min5．计数6．计数原则：数上不数下、数左不数右7.计算：红细胞数/L=N*50*106*200=N*1010

白细胞数/L=N/4*10*20*106=N*5*107第三页，共二十五页，2022年，8月28日血细胞计数计数板第四页，共二十五页，2022年，8月28日第五页，共二十五页，2022年，8月28日第六页，共二十五页，2022年，8月28日第七页，共二十五页，2022年，8月28日第八页，共二十五页，2022年，8月28日第九页，共二十五页，2022年，8月28日第十页，共二十五页，2022年，8月28日保证计数板和盖玻片清洁；以防影响计数结果的准确性。一次完成充池，如充池过少、过多、有气泡或出现任何碎片，应拭净计数板及盖玻片后重新操作。充池后平放计数板，不能移动盖玻片。计数板中细胞如果严重分布不均，应重新充池计数。凡压线的细胞应按照数上不数下、数左不数右的原则，避免漏数或重复计数。注意事项第十一页，共二十五页，2022年，8月28日血细胞的分类与计数第十二页，共二十五页，2022年，8月28日血液涂片的制备1、每份样本制作3张血涂片。要求所用玻片清洁、干燥、无尘，大小为25mm×75mm，厚度为0.8～1.2mm。并有明确标记。如果样本中白细胞数量少时，需要制备更多血涂片（如6张）。2、使用EDTA－K2抗凝血液样本时，应在采集后4小时内制备血涂片。在制片前，样本应充分混匀。注意，样本不能冷藏。3、用楔形技术制备血涂片。在玻片近一端1/3处，加一滴（约0.05ml）充分混匀的血液，握住另一张较狭窄的、边缘光滑的推片，以30º～45º角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至玻片的另一端。4、在1小时内，用染液染色；或在1小时内，用无水甲醇（含水量﹤3%）固定后染色。第十三页，共二十五页，2022年，8月28日推片技巧

推片倾斜45°±1，推成血膜长度25～35mm，宽度18～20mm，血膜四周留有空隙区，血膜终尾离玻片终端至少10mm，血膜均匀，薄如蝉翼，尾端形如弧状，迅速扇（摇）干，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。此外，涂片时，还要考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、WBC或有核细胞多少等因素，调整推片技巧。第十四页，共二十五页，2022年，8月28日第十五页，共二十五页，2022年，8月28日第十六页，共二十五页，2022年，8月28日第十七页，共二十五页，2022年，8月28日血膜至玻片边缘约5mm血膜至玻片一端约为总长1/3血涂片头部，涂片厚血涂片体部的检查区域血涂片尾部，涂片太薄第十八页，共二十五页，2022年，8月28日第十九页，共二十五页，2022年，8月28日染色步骤取新鲜血液涂片，晾干；加刘A溶液（覆盖血涂片为宜），染色30s；加刘B溶液于A液上（约为A的2倍），以洗耳球吹出微风，使液面产生涟漪，染色30s-1min；水洗，干燥，镜检；第二十页，共二十五页，2022年，8月28日第二十一页，共二十五页，2022年，8月28日第二十二页，