实验室设备和一般技术

实验室设备和一般技术第一页，共三十七页，2022年，8月28日

实验室是细胞工程研究的主要场所，应能满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操作、培养、鉴定等多方面的工作需要。第二页，共三十七页，2022年，8月28日第一节实验室设计洗涤间培养基配制间消毒间无菌操作间培养室鉴定室第三页，共三十七页，2022年，8月28日洗涤间面积:30-50m2配置：在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2个水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸，专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等，地面应耐湿并排水良好。第四页，共三十七页，2022年，8月28日超声波清洗机全自动洗瓶机第五页，共三十七页，2022年，8月28日培养基配制间

面积60平方米左右配备的主要仪器设备有：冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。冰箱以体积180-200L为宜(最好冷藏容积大于冷冻容积），用于储存培养基母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保存植物材料。天平应有不同感量。

第六页，共三十七页，2022年，8月28日消毒间

配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅，较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。如果没有条件的话，可以将上述工作间合并成一个准备间，要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。

第七页，共三十七页，2022年，8月28日无菌操作室（接种室）

通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。室内应配有超净工作台，紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。第八页，共三十七页，2022年，8月28日第九页，共三十七页，2022年，8月28日培养室

为了控制培养室的温度和光照时间及其强度，培养室的房间不要窗户，但应当留一个通气窗，并安上排气扇。室内温度由空调控制，光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修，地面用水磨石或瓷砖铺设，一般要分两间，一为光照培养室，一为暗培养室。培养室外应有一预备间或走廊。培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W，固定在培养架的侧面或搁板的下面，每层有两支日光灯，距离在20cm，光照强度为2000-3000lx。

第十页，共三十七页，2022年，8月28日第十一页，共三十七页，2022年，8月28日辅助实验室鉴定室温室第十二页，共三十七页，2022年，8月28日鉴定室细胞学鉴定室其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥，使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。生化分析室在以培养细胞产物为主要目的的实验室中，应建立相应的分析化验实验室，以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。离心机、酶联免疫检测仪、天平、PCR仪等。第十三页，共三十七页，2022年，8月28日温室为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。

第十四页，共三十七页，2022年，8月28日第二节常用设备和器材准备室装置：水纯化装置超声波清洗器蒸汽压力消毒器电热干燥箱过滤除菌装置操作室装置：超净工作台移液器培养室装置：培养箱摇床检测设备：显微镜显微操作仪血球计数板细胞冷冻存储设备第十五页，共三十七页，2022年，8月28日一、水纯化装置

细胞培养对水的要求：纯水(重蒸水、三蒸水）蒸馏式水纯化装置过滤式水纯化装置第十六页，共三十七页，2022年，8月28日二、超声波清洗器原理：利用超声波在液体中的“空化”作用，使污物剥落。第十七页，共三十七页，2022年，8月28日三、蒸汽压力消毒器作用：灭菌种类：手提式、卧式、立式手提式灭菌锅操作步骤：注水－装锅－加热－排冷气－到规定气压时维持灭菌时间－自然降温－开阀－取物第十八页，共三十七页，2022年，8月28日四、电热干燥箱作用：烘干、干热灭菌使用方法：第十九页，共三十七页，2022年，8月28日五、过滤除菌装置玻璃漏斗式滤器Zeiss滤器针头式滤器正压式金属滤器第二十页，共三十七页，2022年，8月28日六、超净工作台作用：分类：结构组成：鼓风机、滤板、操作空间、照明设备、灭菌设备使用第二十一页，共三十七页，2022年，8月28日七、培养箱光照培养箱人工气候箱第二十二页，共三十七页，2022年，8月28日八、摇床作用：第二十三页，共三十七页，2022年，8月28日九、移液器单通道移液器多通道移液器连续加样器电动加样器第二十四页，共三十七页，2022年，8月28日十、显微镜体视显微镜透射显微镜倒置显微镜荧光显微镜相差显微镜第二十五页，共三十七页，2022年，8月28日十一、细胞冷冻存储设备第二十六页，共三十七页，2022年，8月28日第三节常用器皿选择及清洗

一、器皿选择二、器皿清洗第二十七页，共三十七页，2022年，8月28日1、培养用器皿培养皿培养瓶培养板第二十八页，共三十七页，2022年，8月28日2金属器械镊子剪刀解剖刀接种针第二十九页，共三十七页，2022年，8月28日二、常用器材的清洗1玻璃器材的清洗2橡胶制品的清洗3除菌滤器的清洗4塑料器皿的清洗5金属器械的清洗6常用洗涤液的种类和配制方法

第三十页，共三十七页，2022年，8月28日1玻璃器材的清洗主要包括培养瓶、试管、培养皿、移液管的清洗新玻璃器材的清洗：浸泡－－刷洗－－浸酸－－冲洗－－蒸馏水冲洗使用过的玻璃器材的清洗浸泡－－刷洗注意：1.量器不可刷洗

2.有毒物容器处理第三十一页，共三十七页，2022年，8月28日2橡胶制品的清洗新橡胶制品清洗：碱煮沸－－冲洗－－酸煮沸－－冲洗－－自来水煮沸－－蒸馏水冲洗－－烘干使用过的胶塞按照玻璃器材方法清洗第三十二页，共三十七页，2022年，8月28日3除菌滤器的清洗新的G6除菌滤器的清洗

清洁液中浸泡24h－－流水冲洗至pH5.5－－4倍体积蒸馏水缓慢冲洗－－三蒸水冲洗－－烤干－－包装消毒用过的G6除菌滤器的清洗立即浸泡水中过夜－－流水冲洗24h－－滤面基本疏通时50℃烤干－－清洁液中浸泡24h－－流水冲洗至pH5.5－－4倍体积蒸馏水缓慢冲洗－－三蒸水冲洗－－烤干－－包装消毒蔡式滤器清洗第三十三页，共三十七页，2022年，8月28日4塑料器皿的清洗注意：防止划痕，防止附着物干结过程：脱脂棉擦拭－－流水冲洗－－晾干－－2%NaOH浸泡过夜－－自来水冲洗－－5%盐酸浸泡30min－－自来水冲洗－－蒸馏水冲洗第三十四页，共三十七页，2022年，8月28日5金属器械的清洗金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤（新的可以用热洗衣粉水洗净），需要清洗时，一般用酒精擦洗，然后火焰干燥。

第三十五页，共三十七页，2022年，8月28日6常用洗涤液的种类和配制方法铬酸洗液浓