GB/T 27644-2011禽疱疹病毒2型荧光PCR检测方法

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T27644—2011

禽疱疹病毒2型荧光PCR检测方法

Protocolofreal-timePCRfordetectingGallidHepersVirus2

2011-12-30发布2012-04-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

禽疱疹病毒2型荧光PCR检测方法

GB/T27644—2011

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100013)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

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年月第一版

20123

*

书号

:155066·1-44332

版权专有侵权必究

GB/T27644—2011

前言

本标准按照的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中华人民共和国深圳出入境检验检疫局扬州大学河南农业大学

:、、。

本标准主要起草人詹爱军刘文博王新卫卢体康花群义陈书琨秦智锋陈兵高小博

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27644—2011

禽疱疹病毒2型荧光PCR检测方法

1范围

本标准规定了禽疱疹病毒型荧光检测的操作方法

2PCR。

本标准适用于禽疱疹病毒型的鉴定及其流行病学调查诊断检疫和监测

2、、。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

Ct值每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数

:。

DNA脱氧核糖核酸

:deoxyribonucleicacid。

dNTP三磷酸脱氧核糖核苷含有

:deoxy-ribonucleosidetriphosphate。dCTP、dGTP、dATP、

四种脱氧核糖核苷

dTTP。

EDTA乙二胺四乙酸

:ethylenediaminetetraaceticacid。

GHV2禽疱疹病毒型马立克氏病病毒血清型

:GallidHepersVirus22(1)。

MD马立克氏病

:Marek’sDisease。

PBS磷酸盐缓冲生理盐水

:phosphatebelancedsolution。

PCR聚合酶链式反应

:polymerasechainreaction。

Real-timePCR实时荧光聚合酶链反应

:Real-timepolymerasechainreaction。

Taq酶耐热聚合酶

:ThermusaquaticuspolymeraseDNA。

4试剂

41试剂级别除另有规定本方法试验用水应符合规定的二级水所用化学试剂均为分

.:,GB/T6682,

析纯

。

42禽疱疹病毒型荧光检测试剂盒保存组成及使用注意事项参见附录

.2PCR,-20℃,A。

43引物和探针序列产物长度

.(142bp)

上游引物

:5’CCACCACCTCCCATCTGTAC3’

下游引物

:5’GACAAGGCTGAGCGTAAACC3’

探针其端和端分别标记

TaqMan:5’ACACGGCTCGGTAACAGGACACAATG3’,5’3’FAM

和或或

BHQ(Ta