标准解读
《GB/T 31795-2015 番茄黑环病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准,主要针对番茄黑环病毒(Tomato black ring virus, TBRV)的检测与鉴定提供了科学的方法指导。该标准适用于进出口贸易中植物及其产品的检验检疫工作,同时也可应用于国内农业生产中的病害监测和防治。
根据标准内容,TBRV的检测主要包括样品采集、处理及具体实验操作步骤。首先,在样品准备阶段,需要从疑似感染TBRV的植株上选取合适的样本部位,如叶片或茎部,并按照规定的方式进行保存以保证后续测试的有效性。接下来是病毒RNA提取过程,通过使用适当的试剂盒或其他有效手段从植物材料中分离出高质量的RNA,为后续分析打下基础。
对于TBRV的确诊,本标准推荐采用RT-PCR技术。这一分子生物学方法能够特异性地扩增目标病毒序列,从而实现对TBRV存在的准确判断。此外,还介绍了如何通过电泳等手段来验证PCR产物,确保结果的可靠性。
除了上述核心检测流程外,《GB/T 31795-2015》还详细列出了实验所需的各种仪器设备、化学试剂及其配制方法,并给出了质量控制的具体要求,比如阳性对照和阴性对照的选择与设置,以及实验室内部质量管理体系建立等方面的内容,旨在提高检测工作的规范性和准确性。
该标准的发布实施对于加强我国植物检疫体系、防止外来有害生物入侵具有重要意义,同时也能促进国际间农产品安全交流与合作。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2015-07-03 颁布
- 2015-11-27 实施
文档简介
ICS6502001
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T31795—2015
番茄黑环病毒检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofTomatoblackringvirus
2015-07-03发布2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
中华人民共和国
国家标准
番茄黑环病毒检疫鉴定方法
GB/T31795—2015
*
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲号
2(100029)
北京市西城区三里河北街号
16(100045)
网址
:
服务热线
:400-168-0010
年月第一版
20158
*
书号
:155066·1-49526
版权专有侵权必究
GB/T31795—2015
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中华人民共和国上海出入境检验检疫局中华人民共和国天津出入境检验检疫
:、
局中华人民共和国北京出入境检验检疫局
、。
本标准主要起草人杨翠云于翠郭京泽魏亚东邓丛良乔艳艳崔学慧胡培龙孙娟
:、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T31795—2015
番茄黑环病毒检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了番茄黑环病毒的免疫磁珠实时荧光鉴
DAS-ELISA、RT-PCR、RT-PCR、RT-PCR、
别寄主检测和免疫电镜等检疫鉴定方法
。
本标准适用于植物材料包括无性繁殖材料种子和苗木中番茄黑环病毒的检疫鉴定
,、。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
植物病毒免疫电镜检测方法
SN/T1840
进出境植物及植物产品检疫抽样
SN/T2122
3仪器设备设施用具和试剂
、、
31仪器设备
.
酶标仪仪实时荧光仪超净工作台电子天平感量电泳仪电泳槽凝胶成
、PCR、PCR、、(0.001g)、、、
像系统电子透射显微镜水浴锅高速冷冻离心机超低温冰箱高压灭菌锅制冰机微波
、、、、(-80℃)、、、
炉涡旋振荡器
、。
32设施
.
植物隔离检疫圃
。
33用具
.
可调式微量移液器及相应的无吸头无离
(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL)RNase、RNase
心管管研钵样品袋标签镊子放大镜磁力架等
、PCR、、、、、、。
34主要试剂
.
除有特殊说明外所有实验用试剂均为分析纯或生化试剂
,。
抗体磁珠具有超顺磁性的聚苯乙烯珠子直径表面标记有甲苯磺酰基
TBRV、(,280nm,)、Trizol、
焦碳酸二乙酯液氮三氯甲烷异戊醇异丙醇乙醇反转录酶酶抑制剂Taq
(DEPC)、、、、、、AMV、RNA、
聚合酶分子标记溴化乙锭琼脂糖溴酚蓝等
DNA、DNA、、、。
血清学和分子生物学检测试剂配制见附录
B。
4症状观察及抽样
41症状观察
.
现场检疫主要观察进境植物材料上病毒为害的症
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