标准解读
《GB/T 31802-2015 番茄斑萎病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准,旨在为检测番茄斑萎病毒提供一套科学、准确的操作指南。该标准详细描述了从样品采集到最终结果分析的一系列步骤和技术要求,适用于进出口植物及其产品中番茄斑萎病毒的检疫鉴定工作。
标准首先明确了适用范围,即用于国际贸易过程中对疑似携带番茄斑萎病毒的植物材料进行快速准确地识别与确认。接着介绍了所需的主要仪器设备及试剂耗材,包括但不限于RT-PCR仪、电泳系统等实验室常用工具以及特定引物探针设计。
在操作流程部分,《GB/T 31802-2015》规定了完整的实验方案:从样本准备开始,通过研磨、离心等物理方法提取总RNA;然后利用反转录酶将RNA转化为cDNA;接下来使用特异性引物对目标序列进行扩增;最后通过凝胶电泳或荧光定量PCR技术来观察并记录结果。此外,还提供了阳性对照和阴性对照设置指导以确保实验准确性。
对于数据处理与结果判断,《GB/T 31802-2015》给出了明确的标准,比如如何根据电泳条带位置大小或者Ct值来判定样品是否感染了番茄斑萎病毒。同时强调了质量控制的重要性,建议定期参加能力验证活动,并采取措施避免交叉污染等问题发生。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2015-07-03 颁布
- 2015-11-20 实施
文档简介
ICS6502001
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T31802—2015
番茄斑萎病毒检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofTomatospottedwiltvirus
2015-07-03发布2015-11-20实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
中华人民共和国
国家标准
番茄斑萎病毒检疫鉴定方法
GB/T31802—2015
*
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲号
2(100029)
北京市西城区三里河北街号
16(100045)
网址
:
服务热线
:400-168-0010
年月第一版
20158
*
书号
:155066·1-49517
版权专有侵权必究
GB/T31802—2015
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局
:、。
本标准主要起草人李桂芬鲁洁马洁孔君王秀芬杜智欣张永江魏梅生
:、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T31802—2015
番茄斑萎病毒检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了植物检疫中番茄斑萎病毒的检疫鉴定方法
。
本标准适用于植物种子苗木等繁殖材料中番茄斑萎病毒的检疫鉴定
、。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
进出境植物及植物产品检疫抽样
SN/T2122
3仪器设备及试剂
31仪器设备
.
酶标仪天平感量计微量榨汁机仪实时荧光仪电泳仪电泳槽
、(1/10000g)、pH、、PCR、PCR、、、
凝胶成像系统隔离温室恒温水浴低温冰箱等
、、、。
微量移液器酶联板研钵离心管花盆灭菌
(2μL,10μL,20μL,100μL,200μL,1000μL)、、、、、
土等
。
32试剂
.
酶联免疫吸附测定试剂见附录检测试剂见附录实时荧光检测试剂见
B,RT-PCRC,RT-PCR
附录生物学测定试剂参见附录
D,E。
4抽样与样品制备
41抽样
.
抽样按照的规定进行
SN/T2122。
42种子样品制备
.
将种子重点挑取畸形不成熟的种子播于灭菌土中于生长并进行症状观察待长出片
(、),25℃。3~
片叶后将表现症状的植株编号未表现症状的植株分组株为一组并编号采集叶片用于酶联免疫
4,,(10)。
测定检测实时荧光检测及生物学测定
、RT-PCR、RT-PCR。
43苗木样品制备
.
将苗木种植于隔离温室中于生长并进行症状观察有症状的苗木单独检测没有症状的分
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