标准解读

《GB/T 34739-2017 动物狂犬病病毒中和抗体检测技术》是一项国家标准，旨在提供一种科学、规范的方法来测定动物体内针对狂犬病病毒的中和抗体水平。该标准适用于兽医实验室对家养或野生动物进行狂犬病免疫效果评估时使用。

根据此标准，中和抗体是指能够阻止狂犬病病毒侵入宿主细胞并复制的特异性免疫球蛋白。这些抗体的存在及其浓度可以反映个体对于狂犬病的免疫力状态。本标准详细描述了采用快速荧光灶抑制试验（RFFIT）方法来进行中和抗体滴度测定的具体步骤，包括样品准备、实验材料与试剂的选择、操作流程以及结果判读等方面内容。

在执行过程中，首先需要从待测动物体内采集血液样本，并从中分离出血清作为测试对象。接着，按照特定比例将血清稀释后与已知量的狂犬病病毒混合，在适宜条件下孵育一段时间。之后，将上述混合液接种至单层培养的敏感细胞上继续培养，观察是否形成荧光灶。通过比较不同稀释度下荧光灶数量的变化情况，可以确定出能够完全抑制病毒生长的最大血清稀释倍数，即为该样品中的中和抗体滴度值。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
©正版授权
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T34739—2017

动物狂犬病病毒中和抗体检测技术

Detectingtechniqueofneutralizationantibodyagainstrabiesvirusinanimals

2017-11-01发布2018-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T34739—2017

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准参考世界动物卫生组织年版国际陆生动物卫生法典狂犬病的相关

(OIE)2013《》2.1.13

内容

。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所

:。

本标准主要起草人扈荣良张守峰刘晔张菲

:、、、。

Ⅰ

GB/T34739—2017

动物狂犬病病毒中和抗体检测技术

1范围

本标准规定了用于动物狂犬病血清中和抗体定量测定的荧光抗体病毒中和试验的血清样

(FAVN)

品采集实验操作方法及结果判定

、。

本标准适用于动物个体狂犬病免疫效果的定量测定群体免疫覆盖率监测及狂犬病流行风险评估

、。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682—2008

实验室生物安全通用要求

GB19489—2008

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

抗生素胰蛋白酶乙二胺四乙酸

ATV:--(Antibiotic-Trypsin-Versene)

乳仓鼠肾细胞系

BHK-21:(BabyHamsterKidney-21)

生物安全级实验室

BSL-2:2(BiosafetyLaboratoryLevel2)

狂犬病标准攻击毒株

CVS:(ChallengeVirusStandard)

荧光抗体病毒中和试验

FAVN:(FluorescentAntibodyVirusNeutralizationTest)

异硫氰酸荧光黄

FITC:(FluoresceinIsothiocyanate)

细胞基础培养基

MEM:(Eagle’sMinimumEssentialMedium)

磷酸盐缓冲液

PBS:(Phosphate-BufferedSaline)

半数细胞感染量

TCID50:(MedianTissueCultureInfectiveDose)

4试剂和材料

除非另有规定仅使用分析纯试剂

,。

41水二级水

.:GB/T6682—2008,。

42商品化的狂犬病阴性标准犬血清

.。

43商品化的狂犬病阳性标准犬血清用前稀释至

.,0.5IU/mL。

44标记的抗狂犬病病毒抗体用见稀释成工作液现用现配

.FITC,PBS(0.01mol/L,pH7.4,A.1),。

45见

.MEM(A.2)。

46细胞培养用抗生素溶液见

.(A.3)。

47抗生素胰蛋白酶乙二胺四乙酸溶液见

.--(ATV)(A.4)。

48固定液

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