标准解读

《GB/T 34750-2017 副猪嗜血杆菌检测方法》是一项国家标准，主要针对副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis）的实验室检测提供了规范化的指导。该标准适用于猪只及其相关样本中副猪嗜血杆菌的分离、鉴定以及分子生物学检测。

标准首先介绍了副猪嗜血杆菌的基本背景信息，包括其作为引起猪多发性浆膜炎和关节炎的主要病原之一的重要性。接着，对所需实验材料与设备进行了详细说明，如培养基的选择（例如巧克力琼脂）、生物安全柜等实验室设施要求，还有用于PCR扩增的相关试剂配置等。

在样品采集部分，《GB/T 34750-2017》规定了从活体动物或死亡病例中正确获取组织样本的方法，并强调了采样过程中需要注意的安全防护措施。对于细菌分离培养，则给出了具体的步骤指导，包括如何处理样本以促进细菌生长，以及如何通过形态学特征初步识别疑似菌落。

关于鉴定环节，本标准不仅包含了基于生化反应的传统鉴定技术，还引入了更为准确快速的分子生物学手段——聚合酶链式反应(PCR)。其中，PCR法能够直接从DNA水平上确认是否存在目标微生物，极大地提高了检测效率与准确性。此外，标准也提到了使用特异性引物设计来进行基因序列分析的重要性。


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....

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  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
©正版授权
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T34750—2017

副猪嗜血杆菌检测方法

Detectionmethodsforhaemophilusparasuis

2017-11-01发布2018-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T34750—2017

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位河南省动物疫病预防控制中心河南省农业科学院畜牧兽医研究所河北农业大

:、、

学动物科技学院山东省农业科学院畜牧兽医研究所

、。

本标准起草人吴志明闫若潜张健赵明军赵雪丽宋勤叶徐引弟王东方王淑娟安春霞

:、、、、、、、、、、

刘梅芬张盼盼谢彩华高凤山方先珍吴家强拜廷阳王一刘淑敏

、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34750—2017

副猪嗜血杆菌检测方法

1范围

本标准规定了副猪嗜血杆菌的分离与鉴定巢式检测和实时荧光检测方法

、PCRPCR。

本标准适用于对猪的肺脏心脏脑等组织胸腔腹腔心包积液或关节液抗凝血细菌培养物等

、、,、、,,

样品中副猪嗜血杆菌的检测

。

2缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

碱基对

bp:(BasePair)

脱氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(DeoxyribonucleosideTriphosphates)

小沟结合

MGB:(MinorGrooveBinder)

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸

NAD:(NicotinamideAdenineDinucleotide)

磷酸盐缓冲液

PBS:(PhosphateBufferSolution)

聚合酶链式反应

PCR:(PolymeraseChainReaction)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNAPolymerase)

缓冲液

TE:Tris-EDTA(Tris-EDTABuffer)

胰蛋白胨大豆琼脂

TSA:(TrypticSoyAgar)

胰蛋白胨大豆肉汤

TSB:(TrypticSoyBroth)

3仪器

31生物安全柜

.。

32恒温培养箱

.。

33光学显微镜

.。

34全自动微生物鉴定仪

.。

35扩增仪

.PCR。

36高速冷冻离心机g以上

.(12000×)。

37核酸电泳仪和水平电泳槽

.。

38恒温水浴锅

.。

39单道微量移液器

.(0.5μL~10μL;2μL~20μL;20μL~200μL;100μL~1000μL)。

310组织匀浆器或研钵

.。

311凝胶成像系统或紫外投射仪

.()。

312实时荧光定量

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