标准解读
《GB/T 38132-2019 转基因植物品系定量检测数字PCR法》是一项国家标准,旨在通过数字PCR技术对转基因植物中的特定品系进行准确的定量分析。该标准适用于含有已知序列信息的转基因植物品系DNA含量的测定。
根据此标准,首先需要准备样品DNA,并确保其质量符合后续实验的要求。接下来,选择合适的引物和探针设计对于目标转基因成分至关重要,这些设计需基于已知的目标序列来进行,以保证特异性与灵敏度。此外,还应设置适当的对照组,包括但不限于阳性对照、阴性对照以及内参基因等,以验证实验的有效性和可靠性。
在完成上述准备工作后,按照数字PCR的操作流程进行扩增反应,这通常涉及到将样品分成大量独立的小体积反应单元,在每个小单元中进行PCR扩增。通过统计含有目标序列的阳性微滴数量来计算原始样本中目标分子的数量,从而实现对转基因成分的定量。
整个过程中,还需要注意控制实验条件的一致性,比如温度循环参数、酶活性等因素,以减少实验误差。同时,对于结果的数据处理也有明确要求,包括如何使用软件分析数据、报告形式等,确保最终得出的结果能够准确反映样品中转基因成分的真实水平。
该标准为转基因植物品系的定量检测提供了科学、规范的方法指导,有助于提高相关领域研究工作的准确性和可比性。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2019-10-18 颁布
- 2019-10-18 实施
文档简介
ICS07080
A40.
中华人民共和国国家标准
GB/T38132—2019
转基因植物品系定量检测数字PCR法
QuantitativedeterminationofgeneticallymodifiedplantsbydigitalPCRmethod
2019-10-18发布2019-10-18实施
国家市场监督管理总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T38132—2019
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国生化检测标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC387)。
本标准起草单位上海市计量测试技术研究院苏州百源基因技术有限公司中国检验检疫科学研
:、、
究院中国农业科学院生物技术研究所中国测试技术研究院生物研究所甘肃国研检验检测有限公司
、、、、
四川出入境检验检疫局检验检疫技术中心中国科学院上海高等研究院
、。
本标准主要起草人梁文付伟李亮刘刚李妍车团结周李华林华杨镇州朱鹏宇马丽侠
:、、、、、、、、、、、
樊春海王丽华张莹
、、。
Ⅰ
GB/T38132—2019
转基因植物品系定量检测数字PCR法
1范围
本标准规定了转基因植物品系的数字定量检测方法
PCR。
本标准适用于种子及物理加工种子样品中转基因玉米品系品系
MON810、MON89034、MIR162
品系转基因大豆品系转基因水稻克螟稻品系转基因棉花品系转基因油菜
,GTS-40-3-2,,GHB119,
品系的数字法定量检测
RT73PCR。
本方法的定量检测限为质量分数
0.1%()。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
转基因产品检测通用要求和定义
GB/T19495.1
转基因产品检测核酸提取纯化方法
GB/T19495.3
转基因产品检测抽样和制样方法
GB/T19495.7
所有部分转基因大米定量检测数字法
SN/T4853()PCR
3术语和定义缩略语
、
31术语和定义
.
下列术语和定义适用于本文件
。
311
..
品系特异序列eventspecificsequence
外源片段插入受体作物基因组后重组产生的邻接区序列
DNA。
32缩略语
.
下列缩略语适用于本文件
。
玉米乙醇脱氢酶基因
Adh-1:(Alcoholdehydrogenase1)
乙醇脱氢酶基因
Adhc:C(AlcoholdehydrogenaseCgene)
聚合酶链式反应
PCR:(Polymerasechainreaction)
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因
PEP:(Phosphoenolpyruvatecarboxylasegene)
磷脂酰胆碱磷脂水解酶基因
PLD:(PhospholipaseDgene)
4原理
数字其技术原理是通过将原始反应体系进行分割进而对所有小的反应体系进行扩增
PCRPCR,
并后续检测通过对反应体系进行有限的分割从而使整个反应体系可以更加耐受核酸抑制因子并且
。,
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