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引言1.1研究目的和意义本研究通过对南京地区犬类寄生虫的调查,从流行病学的角度分析了犬类寄生虫的危害,并发现了病原体在人类和犬类的一般病原体之间传播的途径,以及受到传染的危险行为。这项研究可以提供科学的视角来预防和治疗犬类的寄生虫病,制定动物饲养策略,以及在医疗机构中进行动物疾病监测。本研究也可为建立及完善犬类动物保护机构的政策与政策提供参考。1.2研究内容本课题主要包括三个部分的研究内容:(1)研究犬类的常见寄生虫现象。研究主要通过研究犬类的肠道寄生虫,找出犬类寄生虫病感染的发生率、传染类型、寄生虫的形态特征。(2)不同寄生虫在动物体内的传播和混合感染。对宿主的种类、感染数量、生活史和混合感染作了总结。(3)寄生虫在人类和犬身上很常见。本文还介绍了防范人类和犬类的寄生虫感染和传播的预防措施。1.3犬类常见寄生虫病病因与症状1.4体内寄生虫病1.4.1蛔虫病这种疾病是由犬类的肠道中的弓形虫细菌引起的这是一种常见的犬线虫病。这种疾病已经在世界各地传播。它主要伤害了1到3个月大的幼犬和生病的犬类,它们有昏迷和缓慢的生长。严重的情况会导致死亡。临床症状包括犬类的体重下降和贫血,可见的浅粘膜,食欲下降,呕吐,异质性,消化不良,腹部肿胀,有的犬类会有神经症状,诸如癫痫发作。1.4.2绦虫病绦虫是一种比较严重的寄生虫,会严重危害犬类的健康同时它也是许多其他动物和人类的重要病源。这种疾病主要寄生在动物的小肠里。犬是绦虫的最终宿主,人和其他动物是中心宿主。不同的动物会互相传染,这是更有害的。当临床症状是轻微感染时,通常没有明显的临床症状,也不容易引起注意。当成熟的绦虫体表膜不小心破裂,会导致感染严重,犬会出现呕吐,异质性,渐进式减肥,消化不良,等症状有时肿胀和腹泻会交替出现,同时也会出现神经症状,比如剧烈的紧张,抽搐,严重的甚至会导致四肢瘫痪,1.4.3犬血丝虫病犬血兹虫病也称为犬类的心脏病,是一种寄生虫在犬类的右心室和肺动脉里造成的,导致血液循环障碍、呼吸困难和贫血。蚊子是恶兹虫的中间媒介,犬类是终端宿主,多数是在睡眠被感染了。血吸虫病是人类和犬类都会有的病。被成熟的蠕虫感染的蚊子会随着血液传播给犬类。幼虫从皮肤和肌肉到肺和心脏都会溶解在犬类的血液中会导致疾病。这种疾病在夏天会被蚊子叮咬而传播。临床症状在感染初期并不明显,当感染严重时,犬类主要会有咳嗽、心跳加快、脉搏微弱、心脏破裂、腹水、运动后呼吸困难及较明显。一些皮肤疾病的症状,如瘙痒,呼吸困难,肺囊的扩散,水和四肢肿胀在心肺功能紊乱期间严重者会导致死亡。1.5宠物犬常见寄生虫病的诊断1.5.1体内寄生虫病的诊断1.蛔虫病的诊断根据临床症状、病史调查和病原检查作出综合诊断。(1)在粪便或呕吐物中见到白色线状、长20~180mm的虫体。(2)漂浮法检查粪便,检出亚球形虫卵,卵壳厚,表面具有点状凹陷可以确诊。(3)2周龄幼犬若出现肺炎症状可考虑为幼虫移行期症状。(4)结合犬舍的饲养管理状况判断。2.绦虫病的诊断(1)根据临床症状进行初诊;观察犬肛门处是否夹有尚未落地的似米粒的白色孕节或粪便中是否夹杂有短的白色节片,如果有即可确诊。(2)漂浮法检查粪便,检出虫卵可以确诊。3.血丝虫病的诊断(1)根据临床症状进行初诊,本病主要表现为心血管功能下降,多发生于2岁以上的犬。(2)采用末稍血液作全血涂片,置于显微镜下检查,检出短于300um,尾端钝,呈钩状的微兹蚴可以确诊。(3)ELISA试剂盒诊断。1.5.2体外寄生虫病的诊断1.蠕形螨病的诊断根据病史和临床症状(无痒感的皮肤症状)进行初诊;体表皮肤刮取物镜检,检出虫体可以确诊。2.耳痒螨病的诊断根据发病史、同群动物有无发病、临床症状进行初诊;耳内渗出物检查,检出螨或螨卵可以确诊。3.犬疥螨病的诊断根据病史、同群犬有无发病。根据临床症状(奇痒、脱毛、结痂)等。体表皮肤刮取物滴加50%甘油镜检,观察有无活螨或螨卵。体表皮肤刮取物滴加10%NaOH或KOH溶液浸泡,用酒精灯加热使其充分溶解,用离心机离心3分钟,取沉渣镜检,观察有无螨或螨卵。2X市区犬类常见寄生虫性疾病调查研究2.1材料与方法2.1.1材料1.动物来源X市内的各种犬类。2.试验试剂和仪器材料仪器材料厂家型号数码光学显微镜日本Olympus公司cx31-32C02型海尔电冰箱青岛海尔股份有限公司BCD182型号一次性粪盒江苏康健医疗用品有限公司载玻片、盖玻片北京海德生物公司竹签哈尔滨双丰木业有限公司2.1.2方法1.粪便收集103只犬类排出的新鲜粪便由宠物狗诊所用一次性粪便收集,并逐一编号,用75%酒精固定。它们被带回实验室,储存在4℃的冰箱中进行检查。2.粪便检查方法用生理盐水涂片法和碘溶液染色法分别检查每份标本,阳性粪便标本用数码显微镜拍照。根据检测到的卵、幼虫和卵囊的形态、大小、颜色等特征,采用相关文献进行分类和鉴定。(1)生理盐水直接涂片法在载玻片上加入一滴生理盐水,用竹签取少量粪便,在生理盐水中涂上薄膜。盖上玻璃后,首先在低功率显微镜下观察,然后转向高功率显微镜以识别可疑昆虫。找到典型寄生虫被认为是阳性的。(2)碘染色法在载玻片上加入1滴卢戈碘溶液,用竹签蘸少量粪便,将溶液均匀地涂在碘溶液中。最后,用玻璃显微镜盖上盖子,在低倍显微镜下观察,找到可疑的寄生虫尸体。在高功率下识别,然后测量大小以观察形态特征。3.虫卵计数(1)自然沉淀法和虫卵EPG检验法(简称廖氏洗涤法)参见廖当进(2004)的方法。向预处理得到的沉淀物中加入2-5倍的自来水,通过80目筛搅拌,过滤到250毫升烧杯中,向b(50-100)毫升刻度中加入自来水,用1毫升注射器(无针头)搅拌悬浮液并泵出几次,然后泵出中间悬浮液并注入计数器。静置5分钟后,在10倍物镜下检查,并计算两个计数池中虫卵的总数(n)。“稀释度”是指粪便稀释度,是指粪便加水后的稀释度。稀释=毫升沉淀物/克粪便=b/a(2.1)每克粪便中虫卵数量EPG=虫卵数量×稀释体积毫升=n×b/a÷0.2(2.2)饱和盐水离心漂浮法兼虫卵EPG检查(简称饱和盐水离心漂浮法)取(1)14毫升剩余悬浮液,倒入15毫升试管,以3000转/分钟离心3分钟,弃去上清液,留下沉淀物备用。向试管中加入14毫升饱和盐水,以3000转/分钟的速度混合离心3分钟,然后用饱和滴管将试管注入试管口,形成向上的弯月面,并在其上放置盖玻片,制成盖玻片。接触液面后,静置5分钟,然后取出盖玻片,放在载玻片上,在10倍物镜下检查,观察盖玻片下卵的形态并计数盖玻片下卵的总数(n),记录10倍和40倍物镜下不同虫卵的显微照片。每克粪便中的虫卵EPG=虫卵数量×稀释体积ml=n×b/a÷14(2.3)(3)检查方法的比较选4种犬类的15份粪样分别用廖氏水洗法和饱和盐水离心漂浮法检查。计算每克粪便虫卵数EPG。2.2数据处理用EXCEL对数据进行处理。2.3结果2.3.1X市区犬类常见寄生虫性疾病感染情况调查结果本次对X市13种肉、杂食动物寄生虫感染情进行了调查,结果显示,11份哈士奇的粪便样品中,蛔虫感染率高达16.4%;绦虫感染率为50%,犬血丝虫感染率为20%(;耳痒螨病感染率高达60%,而吉娃娃中未发现寄生虫虫卵,结果见表2-1。表2-1X市犬类常见寄生虫感染情况表动物种类粪样数(份)阳性数(份)感染率寄生虫卵种类哈士奇903437.8%鞭虫、球虫、蛔虫藏獒7457.1%球虫贵宾犬1165%球虫松狮2150%球虫边境牧羊犬2无吉娃娃000%-秋田犬1165%线虫蝴蝶犬5240%鞭虫卡斯罗6无大丹犬3无圣伯纳犬5120%球虫萨摩耶犬4无柴犬1165%蛔虫2.3.2X市区犬类常见寄生虫性疾病感染情况调查结果--以哈士奇为例在哈士奇粪便中检出3种消化道寄生虫虫卵。其中狼旋尾线虫卵最多,在13只中75次检出;其次是犬复孔绦虫卵,在12只中11次检出;毛尾线虫卵最少,仅在3只中3次检出。同时,还在3只中3次检出犬复孔绦虫成虫。2019年1月至2019年12月,每月均可检出狼旋尾线虫卵,在2019年1月和2019年12月检出犬复孔绦虫卵,在2019年12月检出毛尾线虫卵。狼旋尾线虫卵阳性的哈士奇粪便经培养后得到捻转血矛线虫(Haemonchuscontortus)三期幼虫。见表2-2,表2-3。表2-2哈士奇消化道寄生虫感染情况动物编号样品数阳性数阳性率(%)各种寄生虫感染情况(阳性数)狼旋尾线虫犬复孔绦虫毛尾线虫12---25668.42132-37037.04101-45613.1515-157532122-625320--73133.3301-8210527513--101322-12118629.635--1257001-1367001-感染率(%)45.110.340.25备注:“-”表示未检出。表2-3哈士奇寄生虫检出月份年月狼旋尾线虫犬复孔绦虫毛尾线虫201901+--201902+--201903+--201904+--201905+--201906+--201907+--201908+-+201909+--201910+--201911+--201912+--备注:“+”表示检出,“-”表示未检出。狼旋尾线虫虫卵:虫卵椭圆形,两端钝圆,卵壳薄,卵内有桑葚形或虫样胚胎,长径68~84μm,短径41~54μm,长径与短径比率1.6~1.8。见图2-1。图2-1哈士奇狼旋尾线虫卵(囊胚期和虫样期)捻转血矛线虫(Haemonchuscontortus)三期幼虫:头端尖圆,尾细尖,中等长,体外围有一层鞘,口囊膨大,丝状食道,排泄孔与神经环基本在一水平。全长710~734μm,宽21~22μm,尾鞘略扭曲呈波浪状,尾端至尾鞘尖长60~62μm,肠细胞呈梭形,两排,每排8个,末端两个肠细胞的膨大部分交错排列。见图2-2。图2-2哈士奇捻转血矛线虫三期幼虫犬复孔绦虫孕节片:2只哈士奇粪便中检出白色绦虫孕节片。见图2-3。犬复孔绦虫卵:3只哈士奇4次粪便中检出犬复孔绦虫卵。卵形不一,呈三角形、卵圆形、方形或圆形,直径13~70μm,卵内有一个含六钩蚴的梨形器。见图3.3。图2-3哈士奇犬复孔绦虫成虫节片及虫卵1.犬复孔绦虫孕卵节片;2.10倍物镜下哈士奇犬复孔绦虫卵;3.40倍物镜下哈士奇犬复孔绦虫卵,可见含六钩蚴的梨形器毛尾线虫虫卵:3只哈士奇粪便虫检出毛尾线虫虫卵。虫卵腰鼓状,褐色,两端有半透明的卵盖,长径72μm,短径35μm,见图2-4。图2-440倍物镜下哈士奇毛尾线虫卵(2)各犬类寄生虫卵形态特征藏獒体内检出的鞭虫卵:虫卵纺锤形,大小24.757μm-55.833μm,卵壳较厚而光滑,两端呈瓶口状,各具一透明栓,栓高4.978μm,内含卵细胞。藏獒体内的类狼旋尾线虫卵:虫卵椭圆形,浅灰色,大小29.525μm-64.092μm,内含幼虫。藏獒体内的纤毛虫卵:虫卵呈亚圆形,直径大小56.554μm,外被两层囊膜,内含1个虫体。发育过程中有滋养体和包囊两种形态。贵宾犬体内的鞭虫卵:虫卵纺锤形,褐色,大小27.575μm-58.762μm,卵壳较厚而光滑,两端呈瓶口状,各具一透明栓,栓高5.723μm,内含卵细胞。成年贵宾犬体内的鞭虫卵:虫卵纺锤形,褐色,大小28.015μm-59.152μm,卵壳较厚而光滑,两端呈瓶口状,各具一透明栓,栓高4.994μm,内含卵细胞。秋田犬体内检出的鞭虫卵:虫卵纺锤形,褐色,大小25.220μm-53.933μm,卵壳较厚而光滑,两端呈瓶口状,各具一透明栓,栓高6.353μm,内含卵细胞。秋田犬体内的线虫:虫卵长椭圆形,大小38.477μm-99.561μm。杜宾犬体内的类狼旋尾线虫卵:虫卵椭圆形,大小30.217μm-50.439μm,内含一折刀状幼虫。柴犬体内的鞭虫卵:虫卵纺锤形,大小28.002μm-60.352μm,卵壳较厚而光滑,两端呈瓶口状,各具一透明栓,栓高5.710μm,内含卵细胞。柴犬体内的纤毛虫卵:虫卵呈亚圆形,淡紫色,大小57.478μm-58.839μm。大丹犬体内的线虫卵:虫卵呈椭圆形,大小36.265μm-89.655μm。萨摩耶犬体内的鞭虫卵:虫卵纺锤形,大小22.333μm-56.789μm,卵壳较厚而光滑,两端呈瓶口状,各具一透明栓,栓高5.461μm,内含卵细胞。萨摩耶犬体内的钩虫卵:虫卵椭圆形,大小42.578μm-76.613μm。钩虫卵大小一般为56-78*36-40μm,和受精蛔虫卵相近或略长,短椭圆形,两端钝圆或一端稍扁平,卵壳薄,无色透明,新鲜卵内含2-8个灰色颗粒细胞,以4个为最为常见,但有时只有1个或8个以上细胞。因钩虫卵的大小与外形常有差异,故仅根据钩虫卵的形态不能确定钩虫虫种。2.4调查小结2.4.1南京犬类常见寄生虫感染种类从X市13种犬类采集到的103份粪便样品中,共检查出寄生虫6种:吸虫、线虫、鞭虫、绦虫、纤毛虫、球虫。感染寄生虫的犬类中,有单一感染也有混合感染。其中,哈士奇的寄生虫感染最为严重,同时有4种寄生虫感染,分别为球虫、鞭虫、线虫、绦虫;其次是秋田犬,总共有3种寄生虫混合感染,分别为吸虫、绦虫、球虫;第三则是藏獒,有2种寄生虫混合感染,分别为吸虫、线虫;大丹犬也是同时存在2种寄生虫感染,分别为球虫和吸虫。剩下的均是单一寄生虫感染,例举如下:边境牧羊犬感染线虫,吉娃娃感染绦虫;蝴蝶犬感染球虫;圣伯纳犬感染吸虫;萨摩耶犬感染球虫;松狮感染绦虫。以上结果在国内的调查报告中都得到了证实。而且,犬类感染的寄生虫大多数都是球虫,这与肖映珍等对长沙市犬类常见的寄生虫病调查结果相吻合,这或许与球虫的生理特性及传播方式有关。球虫感染的传播方式为密源性传播,而X市犬类大部分都是在管理较为紊乱,大街上犬类随处可见,所以也就为球虫的感染传播创造了有利条件。另据国内有关报道,犬类寄生虫感染情况与季节也有一定的关系。该项调查的时间主要集中在秋冬季,所以该结果与国内有些学者调查得出的结果有一定的差异。2.4.2南京犬类常见寄生虫感染率及感染强度调查结果显示,阳性样品数有23份,占总样品数的74%。总共检出6种寄生虫感染,按感染例数从大到小排序为球虫(9例)、吸虫(7例)、绦虫(6例),线虫(5例)、鞭虫(4例)、纤毛虫(3例)。感染率最低的是松狮,为33.33%。所有寄生虫中,球虫感染占比为29%,吸虫感染占比为23%,绦虫感染占比为19%,线虫感染占比为16%,鞭虫感染占比为13%,纤毛虫感染占比为1%。感染寄生虫的犬类中,哈士奇的寄生虫感染强度最高,EPG为9150个/g;其他犬类的EPG分布在0~2100个/g。以上结果表明X市犬类寄生虫的感染状况比国内一些调查报告得出的结果还要严重。3驱虫实验3.1材料3.1.1试验药物伊维菌素片,规格25mg/片,北京中农华威制药有限公司,批号:20131125。左旋咪唑片,3.1.2试验犬类对南京自然感染寄生虫的犬类40只,进行粪便虫卵检查,编号后随机分为4组,即A,左旋咪唑组,B,阿苯达唑组,C,伊维菌素组,D,对照。3.2方法3.2.1给药方法A.左旋咪唑,按6mg/kg体重,拌入狗粮中投喂,一次口服。B.阿苯达唑,按6mg/kg体重,拌入狗粮中投喂,一次口服。C.伊维菌素,按0.2mg/kg体重,拌入狗粮中投喂,一次口服。D.对照3.2.2驱虫效果及安全性评判方法用药前及用药后第10日采用廖氏水洗法检查40只犬类粪便,计算狼旋尾线虫虫卵EPG(每克粪样中的虫卵数),比较各组狼旋尾线虫虫卵EPG减少情况。虫卵减少率=(驱虫前平均EPG-驱虫后平均EPG)/驱虫前平均EPG×65%虫卵转阴率=(驱虫后虫卵转阴只数/驱虫前粪检只数)×65%3.3试验数据及结果用药后仔细观察犬类采食、饮水、呼吸频率、粪便及精神状况情况等临床表现均无明显异常,判断本研究所采用的各驱虫药物及剂量是安全的。用药前1天,用药后7天,采集动物新鲜粪样,应用麦克马斯特法计算线虫感染强度,结果见表。对40只犬类进行驱虫试验,用药前一天,用药后10天,清晨采集粪样,用廖氏水洗法计算狼旋尾线虫卵EPG。结果见表3-1。表3-1驱虫试验结果比较组别驱虫药驱虫(前/后)犬类粪便中狼旋尾线虫卵EPG12345678910平均数虫卵减少率%虫卵转阴率A左旋咪唑前73346006008002006718002004008331023后00330000000310090B阿苯达唑前167286776733100671001800333667690后00010000672333676001378050C伊维菌素前467900240050033233380025333310671107后400267180010000126726750006006104520D对照前3500333333130013340015334671400883后353367331009672675331333667116786720从表3-1中可以看出,对照组两次粪便检查结果基本无变化,左旋咪唑使用后虫卵减少率达65%,虫卵转阴率达90%,效果最好。阿苯达唑和伊科敏定使用后虫卵减少率分别80%和50%,虫卵转阴率分别为50%和0,说明这两种药驱虫效果不理想。驱虫扩大试验结果见表3.8。从表3.8中可以看出,左旋咪唑使用前后三组虫卵减少率均达65%,虫卵转阴率分别为65%、63%、70%。说明此次试验中左旋咪唑驱虫有效,与阿苯达唑联用效果较好,与伊维菌素联用效果不理想。表3=2驱虫扩大试验结果比较组别驱虫药驱虫(前/后)犬类粪便中狼旋尾线虫卵EPG12345678910平均数虫卵减少率%虫卵转阴率B阿苯达唑前0001000067233367600137后00000000000100100C伊维菌素前40026718001000012672675000600610后00333303300001010063D对照前3533673310096726753313336671167867后990000003303317100704讨论与分析4.1南京犬类寄生虫感染种类从X市13种共103只犬类中,共检查出消化道寄生虫47种;其中吸虫2种、绦虫3种、线虫37种、原虫5种,如鞭虫、球虫、蛔虫等等。4.2人犬共患寄生虫病综合防控试验本试验结果显示,南京犬类动物感染的寄生虫中仅狼旋尾线虫为人犬共患寄生虫病,说明犬类寄生虫对人类的影响较小。犬类寄生虫中共7种虫种,有3种人畜共患寄生虫病,分别是类狼旋尾线虫病、曼氏迭宫绦虫病和钩虫病。这几类人畜共患寄生虫病在人类寄生虫史上也是经常发生的,因此做好此类寄生虫的驱虫及环境卫生相当重要。在城市中犬类与人类最为接近,人犬共患寄生虫病的发生几率也大。另外采取南京星辰宠物馆和兽医工作人员30份粪样进行饱和盐水漂浮法检查,均未查到虫卵。说明犬类感染的寄生虫并未传染给人。因此,人犬共患寄生虫病综合防控必需采取隔离患人犬共患寄生虫病动物,粪便无害化处理,杀灭粪便中的病原,以及周围环境消毒等综合技术措施。认真贯彻“预防为主、防治结合”原则,定期每季度对寄生虫进行监测及驱虫工作,建立起人犬共患寄生虫病综合防控体系。5结论本文对南京犬类进行了常见性的寄生虫调查。结果发现,犬类寄生虫的感染比较普遍,并且表现出多种寄生虫的混合感染和感染的不均衡性特征。不同的犬类肠道寄生虫的优势虫种有所不同。第一,随着城市犬类管理水平的提高,犬类主人也都开始着手对犬类进行各种丰容训练,包括食物丰容、行为训练等等。而食物丰容即将食物运用各种工具或方法让犬类寻找食物的时间延长,以期犬类能够像在野外环境下大部分的时间用来获取食物的结果。其中会包括把狗粮洒在运动场外任其寻找采食、或是将狗粮藏在某个容器中、或挂高等方法,这无形当中增加了食物与地面接触的机会,从而增加了寄生虫感染的几率。第二,家养犬类寄生虫重复感染种类与犬类地面环境、投喂方式、取食习惯等多方面有关。第三,野外环境的犬类会给本身或其他动物创造感染条件,使寄生虫的防治难度加大。第四,为了犬类的健康,同时也为了人类的安然劳作,必须重视家庭内犬类的寄生虫感染预防。具体包括(1)要严格做好日常检查,以便在感染初期就能够获取第一手资料,为第一时间治疗和制定防疫计划提供数据支持;(2)做好犬类的饲养管理工作,平时要经常对笼舍进行清理,维护好家养犬类的笼舍卫生;(3)新买的宠物犬或者从野外拾取的犬类要做好检疫。(4)有些寄生虫依赖中间宿主进行传播,因此,可以将中间宿主进行杀灭而起到阻断寄生虫在犬类中传播的作用;(5)因疾病死亡的犬类要进行合理处置,然后送当地检疫部门进行检验,切勿随意丢弃。

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