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广州市铁一中学!荧光标志的小鼠细胞和人细胞融合实验示意图2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体选修3专题2细胞工程执教广州市铁一中学彭金刚1.1概念
动物细胞融合也称细胞杂交。是指_________动物细胞结合成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为________。一、动物细胞融合两个或多个杂交细胞1.3融合过程融合的原理?灭活的含义?两两融合后可产生几种杂交细胞?1.2融合手段________(PEG)、________、电激等聚乙二醇灭活的病毒突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
其中最有价值的应用是制备单克隆抗体。1.4
意义与应用《蓝猫单克隆抗体及生物导弹》
思考:制备单克隆抗体运用了什么技术?单克隆抗体的优点?抗体由什么细胞产生的?获得抗体的传统方法是什么?有何缺陷?二、单克隆抗体产量低、纯度低、特异性差问题2问题1抗体由什么细胞产生的?获得抗体的传统方法是什么?有何缺陷?二、单克隆抗体如何才能让B淋巴细胞产生单一大量抗体?产量低、纯度低、特异性差→细胞群问题2问题3问题1单克隆抗体一个B淋巴细胞
克隆→抗体什么细胞可以无限增殖?如何才能将两种细胞的特点结合起来?1975年,米尔斯坦和柯勒1984年,诺贝尔生理学或医学奖。问题4问题5骨髓瘤细胞模拟单克隆抗体的制备过程每4人一组利用细胞模型,完成模拟制备流程。小组探究活动B淋巴细胞骨髓瘤细胞分泌抗红细胞抗体的B淋巴细胞分泌抗红细胞抗体的杂交瘤细胞其他杂交瘤细胞注射羊红细胞为什么注射羊红细胞?获到的B淋巴细胞有哪些类型?细胞两两融合后,产生几种融合细胞?如何把杂交瘤细胞筛选出来?杂交瘤细胞有何特点?如何选出分泌抗红细胞抗体的细胞群?如何得到大量单克隆抗体?(第二次筛选)如何得到大量杂交瘤细胞?(第一次筛选)二、单克隆抗体的应用欢迎两位学生为我们分享单克隆抗体的应用!单克隆抗体有何特点?特异性强、灵敏度高,可大量制备。(传统抗体)特异性差、纯度低、产量低。课堂小结动物细胞融合动物细胞A动物细胞B_____细胞
细胞___________法诱导
杂种培养物理化学生物植物体细胞杂交动物细胞融合理论基础相同细胞膜的流动性不同植物细胞的______性细胞的_______诱导手段相同物理法(离心振动电激等)化学法(_______)不同生物法(_________)处理方法不同用纤维素酶
和_______去除细胞壁后,诱导原生质体融合用胰蛋白酶或_________处理使细胞分散后诱导细胞融合结果不同杂种细胞经组织培养后获得_________培养杂交细胞,生产_________相同改变_________,产生新性状
动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较全能增殖聚乙二醇PEG灭活的病毒果胶酶胶原蛋白酶细胞产品杂种植物遗传物质课堂小结二单克隆抗体已免疫的B淋巴细胞
______细胞B-B细胞融合_____细胞_____细胞杂交瘤细胞______克隆化培养和_______分泌特定抗体的杂交瘤细胞________或_________大量单克隆抗体
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