AES显色培养基课件

新型食源性致病菌检测显色培养基传统培养基方法微生物分析的主要方法原理:

糖发酵

Ex:乳糖发酵用于大肠菌群检测

氧化还原Ex:如H2S基础培养基用于Salmonellaspp.缺点:大部分生化反应只是用于检测微生物种群(属).

需要转代

浪费金钱和时间:大部分需要确认实验传统培养基方法应用:鉴定板快速酶测试接加至培养基中(固体和液体)减少和降低确认测试量显色及荧光底物技术底物结构共价键(糖苷的,肽聚,磷酸二氢聚…)由酶进行专一性识别糖类脂类蛋白胨色原底物结构共价键结合专一酶糖类脂类蛋白胨色原非裂解底物:不显色糖类脂类蛋白胨色源

游离或二聚物可显色ALOA®AgarListeriaacc.Ottaviani&AgostiChromogenicmedium单增李斯特菌检测和计数培养基ALOA®原理:Beta-glucosidaseactivityBluecoloniesΒ-葡萄糖苷酶活性，蓝色PhospholipaseactivityOpaquehalo磷酸酶活性，混浊晕Listeriaspp.ListeriamonocytogenesAloa单增李斯特菌的选择性ListeriainnocuaListeriamonocytogenes相同的菌落L.mListeriamonocytogenes可非常清晰地分辨单增李斯特菌L.i混合李斯特氏菌存在的问题假如随机挑取5个菌落确认，在X个无毒李斯特菌中有1个单增李斯特菌，被检出的可能性如下：可能性66%1/415%5%X=ratioL.i/L.m4192999ALOAOneDayalternativemethod:分析方法图25g食品样品+225mlHALFFRASERBROTH24H/30°C

涂布0.1mlonALOA

24H/37°C存在典型菌落:

不存在典型菌落:

确认* 不存在单增李斯特氏菌*:糖/溶血试验

ALOA®认证AFNORvalidation(ALOAONEDAYMETHOD-France)CompendiumCanadaregisteredBAMregistered(FDAapproval)NMKLapproval(Sweden)ISO:preferredreferenceculturemediaforListeriamonocytogenesdetectionandenumeration(ISO11290–1&2revision–publicationinJanuary2005)ASAPPrinciple:C8酯酶活性Beta-葡萄糖苷酶活性粉红及紫色菌落Salmonella蓝色菌落Klebsiella,Enterobacter白色不透明琼脂增强颜色对比易读数ASAP®Examples:C8-酯酶检测Beta-葡萄糖苷酶活性C8-酯酶和葡萄糖苷酶活性检测白色菌落粉红至紫红菌落Salmonellaspp.蓝至菌绿色菌落Klebsiella蓝紫色菌落Serratia其它类型E.coli,Citrobacter,Proteus,Pseudomonas…ESIA®

阪崎肠杆菌分离培养基ESSB/ESIA®

E.sakazakii

检测流程

25gsample+225mlESSB18/24H–37°CIsolation–ESIA18/24H–44°C48H内出阴性结果和阳性初