人巨细胞病毒pp65抗原检测课件

人巨细胞病毒pp65抗原检测监测免疫抑制病人的CMV感染·*人巨细胞病毒（CMV）感染甚为普遍*人巨细胞病毒（CMV）感染是免疫功能低下者的常见机会感染*器官移植后活动性HCMV感染率为20-70%，如发生CMV肺炎，死亡率可达80-90%*CMV还有抑制机体免疫功能的作用，CMV感染可增加真菌和其他机会感染发生率，*还可能造成异基因移植物的损害。*目前对器官移植后CMV病的重点是预防，包括预防性抗病毒或针对CMV亚临床感染(Preemptive)抗病毒治疗治疗。

*早期检测活动性HCMV感染是pre-emptive治疗的前提条件*CMV常规病毒培养(CCC)往往需4周才能获阳性结果,对早期诊断帮助不大*CMV特异性抗体IgM，在严重免疫抑制患者可不出现或延迟出现。*人巨细胞病毒pp65白细胞抗原血症较特异性抗体IgM阳性早出现30天1。优点是可定量检测，5小时内可出结果。

试验原理用免疫荧光标记的单克隆抗体检测CMV的低基质磷蛋白pp65。

pp65的特点*CMV病毒复制的早期蛋白，它出现于病毒感染的早期，在细胞感染后3－4小时即开始出现*是CMV病毒含量最丰富的蛋白*其功能是将病毒的DNA锚定在受感染细胞的核膜上*在胞浆的高尔基体内合成,然后运回核内。

CMVPP65抗原血症检测（一)分离白细胞及制片(二)固定和打孔(三)免疫荧光染色(四)、读片和结果判断

试验结果讨论一pp65抗原血症检测直接检测病毒蛋白的方法不受机体免疫功能的响，在检测免疫抑制病人的CMV活动性感染时尤其有用.

其检出率明显高于血清学方法特点为快速（手工操作4-5小时）、敏感性高（活动性感染80-90%，CMV病99-100%）和较高的特异性（77-95%）、可以定量测试用其指导治疗明显降低了死亡率

在骨髓移植中，可在发病早期诊断，亚临床感染的检出率偏低，应寻求更好的预测方法，或调整诊断标准

不能检测新毒株和抗原决定簇有变异的毒株治疗后抗原血症转阴的病人少部分会复发，应结合更好的监控疗效的方法PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用2

－骨髓移植后CMV感染的危险因素

CD34＋细胞分选

GVHD(FK506)TBI

合并其他病原体感染PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用3

－－治疗时间

细胞数多者和少者症状性感染的发病率是相近的

90％的症状性感染首次阳性抗原血症的PP65阳性细胞数<10个/1.5×10（1－7）我们认为这组病人只要发现阳性细胞即应治疗

首次pp65抗原阳性细胞数与CMV疾病危险性首次pp65抗原阳性细胞发病/活动性感染计数例数

11/12－35/54－105/6>102/2

由于病例数少，无法进行COX‘S比例危险性分析.PP65在监测自身免疫病病人CMV感染中的应用

发热的自身免疫病病人出现CMV感染发病率和死亡率均很高，CMV感染可能是重要的致病原较之白细胞减少机体免疫状态异常和这种异常未被有效控制，可能是病毒活动性复制的更主要的原因阳性细胞数多少可以帮助判断和预测CMV症状性感染

CMV特异性IgM的阳性检出率非常低，

CMV感染的危险因素

CMV感染组DRI评分大多>20

合并细菌或感染病程长、未正规治疗的狼疮三PP65检测在监测血液肿瘤化疗后和再障病人中CMV感染中的应用

发热的血液肿瘤化疗后和再障病出现CMV感染发病率和死亡率均很高幼稚细胞多，分化程度低，无抗病毒作用或病毒作用很弱，可能是病毒活动性复制的更主要的原因

CMV特异性IgM的阳性检出率非常低合并细菌或其他感染者CMV感染率高，感染可由多种炎症因子触发

结论人巨细胞病毒pp65白细胞抗原