微生物学实验38课件

微生物学实验指导老师：袁洪生实验一细菌的形态观察

目的要求：见实验教程P.16实验二-1基本原理：见实验教程P.16实验二-1实验内容1.实验室环境及体表微生物检查(检查手指、头发、钱币等携带微生物的情况4人一个培养皿)2.记录三种细菌的菌落特征3.绘制三种细菌个体形态图，并对革蓝氏染色结果小结4．思考题：实验2-(一)、（二）题绘制三种细菌个体形态图，并对革蓝氏染色结果小结

微生物名称

革蓝氏染色总结枯草芽孢杆菌

金黄色葡萄球菌

大肠杆菌

实验二放线菌的形态观察

目的要求：见实验教程P.24实验二-3

基本原理：见实验教程P.24实验二-3实验内容

1.记录三种放线菌的菌落特征

2.记录并绘制三种放线菌的个体形态及生殖方式图

3.思考题：在平板上如何识别细菌和放线菌的菌落？

绘制三种放线菌的个体形态及生殖方式图

微生物名称

制片法

生殖方式观察

灰色链霉菌

印片法或直接观察法

示气生菌丝、孢子丝(直)及孢子(球形)淡紫灰链霉菌

印片法或直接观察法

示气生菌丝、孢子丝(螺旋状)及孢子(椭圆形)地中海诺卡氏菌

印片法或直接观察法

示菌丝断裂、柱形或球形孢子

实验三酵母菌形态观察及细胞计数

目的要求：观察并掌握酵母菌的菌落特征、个体形态及生殖方式。基本原理：见实验教程P.26实验3-1,P.97实验8-1实验内容1.记录两种酵母菌的菌落特征2.记录并绘制二种酵母菌的个体形态及生殖方式图3.

(1)用血球计数板计算酵母菌悬液的细胞数(2)用显微镜测微尺测量酵母菌细胞的大小4.思考题：在同一平板上如何识别细菌和酵母菌的菌落？二种酵母菌的个体形态及生殖方式图

微生物名称

制片法

生殖方式观察

酿酒酵母水浸法制片示芽殖热带假丝酵母压片法制片示假菌丝实验四

霉菌的形态观察

目的要求：1.观察霉菌的菌落特征。2.掌握霉菌制片方法，观察霉菌个体形态及各种无性和有性孢子。基本原理：见实验教程P.29,实验三-2实验内容

1.记录三种霉菌的菌落特征

2.对三种霉菌制片、观察、记录并绘制三张霉菌个体形态及生殖方式图3.四大类微生物形态特征总结三种霉菌个体形态及生殖方式微生物名称菌丝结构(分化结构)孢子

黑根霉示无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊梗产黄青霉示有隔菌丝、分生孢子梗、小梗黄曲霉示有隔菌丝、足细胞、顶囊、小梗实验考察(1)如何从菌落特征上识别四类菌?

(2)四类菌在制片上有何特点?实验五

培养基的配制与灭菌

目的要求：1.

学习和掌握分离四类菌常用的培养基配制方法。2.

学会四类菌稀释分离和计数时所用物品灭菌前后的准备工作。3.

了解实验室常用的消毒灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌技术。

基本原理：见实验5-1、5-2、5-3、5-5及附录三

实验记录

1.

记录你所配的培养基名称、成分、pH及配制分装方法。

2.注意高压蒸汽灭菌操作过程及关键

实验六

土壤中微生物的分离与培养

目的要求：见P.66实验6-1

基本原理：见P.66实验6-1实验内容

1.先按卡片配制生理生化、噬菌体效价测定用培养基，灭菌2．稀释分离：

3.

划线分离：取10-2菌悬液做划线分离（每人做四块平皿:三种稀释度各一块、划线分离一块）4．菌落计数：（下周做）只数可认定的菌落，三人结果取平均。5.斜面接种及培养：（下周做）每人自不同平板上分别各接一支四类菌斜面，培养后检查接种结果。6.

菌种保藏(示范)：斜面转接法、低温保藏法、沙土管保藏法、冷冻干燥保藏法。

注意事项分离放线菌在99ml无菌水中加10滴10%苯酚(抑制细菌生长)分离霉菌在马丁培养基熔化冷却后加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml链霉素(1万单位/ml)实验记录

P.73实验6-1表(二)、(三)、(五).思考题：P.74实验6-1（二）、（四）、

(五)生理生化实验结果观察

实验名称反应物

代谢产物

枯草金黄大肠产气变形淀粉水解油脂水解EMB葡萄糖发酵甘露醇发酵H2S柠檬酸盐M.RV.P吲哚

实验八噬菌体效价测定

目的要求：见实验教程P36基本原理：见实验教程P36实验内容

培养敏感细菌T6-13至对数生长期熔化下层培养基每人倒三块平版（约10ml/块）用蛋白胨水稀释噬菌体原液（10‑6pfa/ml）至10‑710‑810-9三个稀释度备用取0.2ml噬菌体稀释液于小离心管中加入0.2mlT6-13菌悬液混均，室温放置2-3分钟后将混合液加至倒好下层培养基的培养皿中心迅速倒入熔化好已冷却至55℃的上层培养基，快速混合均匀。待培养基彻底凝固后30℃倒置培养，16-24小时内观察结果。

实验九

紫外线对淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌的诱变效应

目的要求：见p.117基本原理：见p.118实验内容

枯草芽孢杆菌BF7658接种到新鲜牛肉膏培养基中活化(37℃，20hr)取1ml菌液加入装有玻璃珠的99ml无菌水的锥形瓶中，用手(或摇床)剧烈振荡，打散菌体，制成菌悬液。

（取样时一定要摇均匀）（打开红光灯，避光操作）取大约10ml菌悬液至无菌平皿中(内装有磁力搅拌)紫外线照射处理（功率20w距离30cm）

0min1min

2min

3min

稀释度10-510-610-710-410-510-6

10-310-410-510-210-310-4

各取0.1ml涂平板，37℃，培养48hr初筛(加碘液，测量HC值，计算存活率及致死率)

（两人做一个照射时间，六人共用对照，平均每人四块平板）

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