2023年中药化学笔记

1.药材须经干燥并适当粉碎,以利于增大与溶剂的接触表面,提高提取效率。ﻫ

２.溶剂极性:亲水性越强，极性越大；亲脂性越强,极性越小（大水小指);极性的大小可用介电常数（ε)来判断,ε越小，极性就越小,反之亦然。

ﻫ3.常用溶剂极性大小顺序：石油醚<四氯化碳<苯＜二氯甲烷<氯仿(三氯甲烷）＜乙醚<乙酸乙酯<正丁醇＜丙酮＜甲醇(乙醇)＜水。（记忆:十四本，二三迷，双乙丁丙甲乙水）

ﻫ3.中药有效成分提取方法：

1煎煮法：含挥发性成分及加热易破坏的成分不宜使用。ﻫ2浸渍法：合用于遇热不稳定的成分，或含大量淀粉、树胶、果胶、黏液质的中药。ﻫ3渗漉法:合用于遇热不稳定的成分，或含大量淀粉、树胶、果胶、黏液质的中药。ﻫ4回流提取法:对热不稳定成分不宜使用。

５连续回流提取法:对热不稳定成分不宜使用。

４．水蒸气蒸馏法的合用范围:

1具有挥发性的、能随水蒸气蒸馏而不被破坏，且难溶或不溶于水的化学成分。ﻫ2化合物的沸点10０度以上,却有一定的蒸气压。

5.超临界萃取法:ﻫ1萃取选择性的决定因素:温度、压力、夹带剂的种类及含量。ﻫ２常用的提取物质:C02ﻫﻫ6.重结晶法中溶剂选择的一般原则：

1）不与被结晶物质发生化学反映；ﻫ2）对被结晶成分热时溶解度大、冷时溶解度小;

３)对杂质或冷热时都溶解(留在母液中），或冷热时都不溶解(过滤除去);ﻫ４）溶剂沸点较低，容易挥发除去；ﻫ5)无毒或毒性较小,便于操作。

7.判断结晶纯度的方法ﻫ１)结晶形态和色泽：一个纯的化合物一般都有一定的晶形和均匀的色泽。

2)熔点和熔距：单一化合物一般都有一定的熔点和较小的熔距（1～2℃)。ﻫ3)色谱法:单一化合物用两种以上溶剂系统或色谱条件进行检测,均显示单一的斑点。ﻫ4)高效液相色谱法（HPLＣ):纯的化合物显示单一的谱峰。ﻫﻫ8．两相溶剂萃取法常见的方法有液—液萃取法和液—液分派色谱(LC或LLＣ）等。

ﻫ9.分离因子β：ﻫ1)β≥100,仅作一次简朴萃取就可实现基本分离；ﻫ２）100>β≥ｌ0,则需萃取１０-12次；

3）β≤2时,要想实现基本分离，需作1０0次以上萃取才干完毕;

4）当β≈1时，意味着两者性质极其相近,即使作任意次分派也无法实现分离。ﻫ

10.正相色谱与反相色谱：ﻫ1分派柱色谱用的载体：重要有硅胶、硅藻土及纤维素粉等。ﻫ2正相色谱：固定相极性>流动相。分离水溶性或极性较大的成分，

3反相色谱：固定相极性＜流动相。分离脂溶性化合物，ﻫﻫ１1.硅胶:合用于分离酸性成分。硅胶、氧化铝属于物理吸附过程,一般无选择性,可逆吸附，属于极性吸附剂。ﻫ１对极性物质具有较强的吸附能力,极性强的物质优先吸附。

２溶剂极性越弱,吸附剂对溶质的吸附能力增强,反之亦然。ﻫ3溶质即使被硅胶、氧化铝吸附，但一旦加入极性较强的溶剂时,又可被后者置换洗脱下来。

ﻫ１2.氧化铝:合用于分离碱性成分。ﻫﻫ13.活性炭：非极性吸附剂。ﻫ1吸附行为与硅胶和氧化铝相反:水中吸附能力强，洗脱剂的洗脱能力随溶剂极性的减少而增强。ﻫ2应用于水溶液的脱色素，糖、黄酮苷以及环烯醚萜苷的分离纯化。

14.大孔吸附树脂：

1吸附原理:①选择性吸附(由于范德华引力或产生氢键的结果）②分子筛性能(由其自身的多孔性网状结构决定）

２影响吸附的因素:①大孔树脂自身的性质（比表面积、表面电性、极性、能否形成氢键等）②洗脱溶剂的性质（极性、酸碱性)③被分离化合物的性质(分子量、极性、能否形成氢键）ﻫ3大孔吸附树脂的应用：用于天然化合物的分离和富集。ﻫ4洗脱液的选择:①用适量水洗,洗下单糖、鞣质、低聚糖、多糖等极性物质;②7O%乙醇洗，洗脱液中重要为皂苷，但也具有酚性物质、糖类及少量黄酮，实验证明3０%乙醇不会洗下大量的黄酮类化合物；③３%～5%碱溶液洗，可洗下黄酮、有机酸、酚性物质和氨基酸;④１0％酸溶液洗，可洗下生物碱、氨基酸；⑤丙酮洗，可洗下中性亲脂性成分。

１５．聚酰胺吸附色谱：属于氢键吸附；合用化合物类型:酚类、醌类、黄酮类。ﻫ１吸附强弱通常在含水溶剂中大体有下列规律：①形成氢键的基团数目越多,则吸附能力越强。②易形成分子内氢键者，其在聚酰胺上的吸附即相应减弱。③分子中芳香化限度高者,则吸附性增强;反之，则减弱。ﻫ2洗脱溶剂的洗脱能力由弱到强的顺序为:水＜甲醇或乙醇<丙酮＜氢氧化钠水溶液<甲酰胺<二甲基甲酰胺<尿素水溶液（记忆:水甲乙丙氧,甲酰二甲尿）ﻫ3聚酰胺色谱的应用：①对酚类、黄酮类等含酚羟基化合物可逆吸附，分离效果好，吸附容量大,适于制备分离。②可用于生物碱、萜类、甾体、糖类、氨基酸等其他极性与非极性化合物的分离。③对鞣质的吸附特强，近乎不可逆,故用于植物粗提取物的脱鞣解决。

ﻫ16.凝胶过滤法：分子筛作用，根据凝胶的孔径和被分离化合物分子的大小而达成分离的目的。

1７．膜分离法：运用一种用天然或人工合成的膜,以外界能量或化学位差为推动力,对双组分或多组分的溶质和溶剂进行分离、分级、提纯和富集的方法。应用：①精制药用酶时，用透析法脱无机盐。②采用膜分离技术生产中药注射剂和大输液可以明显缩短生产周期,简化生产工艺。③有效地去除鞣质、蛋白质、淀粉、树脂等大分子物质及其微粒、亚微粒和絮凝物等。④提取中药有效成分、口服液、药酒和其他制剂。

ﻫ18.离子互换色谱:

1离子互换法原理：根据混合物中各成分解离度差异进行分离。

２离子互换树脂的结构与性质：球形颗粒，不溶于水,但可在水中膨胀。①母核部分:由苯乙烯通过二乙烯苯(DVB)交联而成的大分子网状结构。网孔大小用交联度表达,交联度越大，则网孔越小，质地越紧密,在水中越不易膨胀;交联度越小，则网孔越大，质地疏松，在水中易于膨胀。②离子互换基团:阳离子互换树脂有强酸性和弱酸性两种;阴离子互换树脂有强碱性和弱碱性两种。(阳酸阴碱)

3离子互换法的应用：①用于不同电荷离子的分离:天然药物水提取物中的酸性、碱性及两性化合物的分离。②用于相同电荷离子的分离:依据酸性或碱性的强弱不同分离（碱性强弱:Ⅲ＞Ⅱ>Ⅰ;弱酸性树脂吸附强弱:Ⅲ>Ⅱ＞Ⅰ)。

ﻫ19．分馏法：运用中药成分沸点的差别进行分离的方法。1）沸点相差在100℃以上时，可用反复蒸馏法达成分离的目的。2）沸点相差在25℃以下,则需要采用分馏柱。3）沸点相差越小,则需要的分馏装置越精细。如挥发油和一些液体生物碱的提取分离常采用分馏法。ﻫ

20.纸色谱、薄层色谱、高效液相色谱等方法在中药化学成分纯度测定中的应用：ﻫ１用PC或TLC选择适当的展开剂，样品只有在3种以上溶剂系统或色谱条件进行检测，均显示单一的斑点才可以拟定其为单一化合物。

2个别情况下,须用正相和反相两种色谱确认。

3ＨPLＣ不受条件限制,用量少，时间快,灵敏度高，准确。

ﻫ２1紫外—可见吸取光谱(UV)：ﻫ1)π→π*及n→π*跃迁可因吸取紫外光及可见光而引起，吸取光谱出现在紫外及可见区域(20０～７0０nm)。ﻫ2）UV光谱重要可提供分子中的共轭体系的结构信息，可据此判断共轭体系中取代基的位置、种类和数目，用于推断化合物骨架，用于测定化合物的精细结构。

3）对分子中具有共轭双键、α,β-不饱和羰基(醛、酮、酸、酯)结构化合物，及芳香化合物的结构鉴定是重要手段。ﻫ

22．红外光谱(IＲ）:ﻫ1）红外吸取范围：4０00～62５ｃm-1ﻫ2)可拟定其分子中的官能团的种类及其大体的周边化学环境:①４000~１500ｃm-1为特性频率区:官能团吸取,如羟基、氨基、重基、芬环等出现此区域。②１50０～６00ｃｍ-1为指纹区:可做真伪鉴别依据。ﻫﻫ23.核磁共振谱(NMＲ）:ﻫ１）氢核磁共振(1H－NMR）:分子中有关氢质子的类型、数目及相邻原子或原子团的信息，对中药化学成分的结构测定具有十分重要的意义。①化学位移：辨认不同的类型的氢。②峰面积：判断每个信号的氢质子数。③裂分与偶合常数：判断相连接的氢的情况。ﻫ２)碳核磁共振（１3C-NＭＲ)：化学位移也取决于周边的化学环境及电子密度,并可据此判断13C的类型。在决定中药化学成分（碳水化合物)的结构有重要作用。

ﻫ２４．质谱（MS):可用于拟定分子量和求算分子式，及提供其他结构信息。

二、生物碱ﻫ1.生物碱在自然界中的分布和存在情况:分布于植物界,在动物界中少有发现。是许多中药的重要有效成分。

１）双子叶植物:①毛茛科（黄连属黄连，乌头属乌头、附子)②防己科(汉防己、北豆根）③罂粟科（罂粟、延胡索)④茄科(曼陀罗属洋金花、颠茄属颠茄、莨菪属莨菪）⑤马钱科(马钱子）⑥小檗科(三颗针)⑦豆科(苦参属苦参、槐属苦豆子）。ﻫ2）单子叶植物：①石蒜科②百合科(贝母属川贝母、浙贝母)③兰科。

３）少数裸子植物：①麻黄科②红豆杉科③三尖杉科④松柏科。

4)低等植物：①烟碱存在于蕨类植物中。②麦角生物碱存在于菌类植物中。③地衣、苔藓类植物中仅发现少数简朴的吲哚类生物碱。④藻类、水生类植物中未发现生物碱。ﻫﻫ2.生物碱的分类方法：按植物来源、生源途径和基本母核的结构类型分类。重要有吡啶类生物碱、莨菪烷类生物碱、异喹啉类生物碱、吲哚类生物碱、有机胺类生物碱。

3.吡啶类生物碱：来源于赖氨酸，是由吡啶或哌啶衍生的生物碱，重要有两种类型。１)简朴吡啶类:槟榔中的槟榔碱、槟榔次碱,烟草中的烟碱,胡椒中的胡椒碱。(记忆：简定狼烟焦）２）双稠哌啶类:由两个哌啶环共用一个氮原子稠合而成的杂环，具喹喏里西啶的基本母核。如苦参中的苦参碱、氧化苦参碱，野决明中的金雀花碱等。(记忆：双定苦金花）ﻫﻫ４.莨菪烷类生物碱:来源于鸟氨酸，由莨菪烷环系的C３-醇羟基与有机酸缩合成酯。如莨菪碱、古柯碱等。（记忆：莨菪浪荡河

5．异喹啉类生物碱:来源于苯丙氨酸和酪氨酸系，具有异喹啉或四氢异喹啉的基本母核,重要有四种类型。ﻫ1)简朴异喹啉类：如鹿尾草中的萨苏林，(记忆:简异萨苏林）

2）苄基异喹啉类：苄基异喹啉类又分为1－苄基异喹啉类和双苄基异喹啉类。①1-苄基异喹啉类:异喹啉母核１位连有苄基。如罂粟中的罂粟碱,乌头中的去甲乌药碱，厚朴中的厚朴碱。（记忆:一变英武后）②双苄基异喹啉类：两个苄基异喹啉通过1～3个醚键相连接。如防己科北豆根中的蝙蝠葛碱，汉防己中的汉防己甲素和乙素。（记忆：双变蝙蝠防甲乙)

3)原小檗碱类：由两个异喹啉环稠合而成，又分为小檗碱类和原小檗碱类。①小檗碱类：为季铵碱，如黄连、黄柏、三棵针中的小檗碱；(记忆：小檗百练针）②原小檗碱类:为叔胺碱，如延胡索中的延胡索乙素。(记忆：原小乙元胡）

4）吗啡烷类:具有部分饱和的菲核,如罂粟中的吗啡、可待因,青风藤中的青风藤碱等。（记忆：吗啡可青风)

6．吲哚类生物碱:来源于色氨酸，重要分为四类。

1）简朴吲哚类:如板蓝根、大青叶中的大青素Ｂ，蓼蓝中的靛青苷等。(简引大青蜓）ﻫ2）色胺吲哚类：具有色胺部分,结构较简朴。如吴茱萸中的吴茱萸碱。(色引吴茱萸)ﻫ3)单萜吲哚类：结构较复杂，如萝芙木中的利血平、番木鳖中的士的宁等。(单引历史)ﻫ4）双吲哚类：由两分子单吲哚类生物碱聚合而成的衍生物，如长春花中具有抗癌作用的长春碱和长春新碱。(双引长春)

7.有机胺类生物碱：氮原子不在环状结构内。如麻黄中的麻黄碱,秋水仙中的秋水仙碱，益母草中的益母草碱等。(有仙母马）ﻫ

8．生物碱的性状：

1）多为结晶形固体,少数为非晶形粉末,少数小分子生物碱（烟碱、毒芹碱、槟榔碱）为液体。ﻫ2)具有固定的熔点,有的具有双熔点，个别的仅具有分解点。

3)多具苦味,少数呈辛辣味或其他味道，如甜菜碱具有甜味。

４）一般无色或白色,少数有颜色,如小檗碱、蛇根碱呈黄色，药根碱、小檗红碱呈红色等。个别生物碱在可见光下无色,而在紫外光下显荧光，如利血平。ﻫ５)个别小分子固体及少数呈液态的生物碱(麻黄碱、烟碱)具有挥发性，可用水蒸气蒸馏法提取。ﻫ6）个别生物碱(咖啡因）具有升华性。ﻫ

９．生物碱的旋光性:ﻫ1）具有手性碳原子或自身为手性分子的生物碱都有旋光性,且多为左旋。

２）影响生物碱旋光性的因素：手性碳构型、测定溶剂、pH值、温度、浓度等。

①麻黄碱在水中呈右旋性，在三氯甲烷中呈左旋性。（蚂蝗游水)ﻫ②烟碱在中性条件下呈左旋性，在酸性条件下呈右旋性。(烟油酸）

③北美黄连碱在９5%以上乙醇中呈左旋性，在稀乙醇中呈右旋性；在中性条件呈左旋性，在酸性条件下呈右旋性。(黄连又酸又细)

ﻫ１0.生物碱盐的溶解性：

１游离生物碱的溶解性

1）亲脂性生物碱：多数仲胺碱和叔胺碱氮原子的生物碱具有较强脂溶性,易溶于乙醚、苯和卤烃类(二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳)等有机溶剂，特别在三氯甲烷中溶解度较大；可溶于甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯等；不溶或难溶于水，但溶于酸水。ﻫ2)亲水性生物碱:ﻫ①季铵碱型生物碱：为离子型化合物,易溶于水和酸水,可溶于甲醇、乙醇及正丁醇等极性较大的有机溶剂，难溶于亲脂性有机溶剂。ﻫ②含N-氧化物结构的生物碱:具有配位键，可溶于水,如氧化苦参碱。

③小分子生物碱:少数分子较小而碱性较强的生物碱，既可溶于水,也可溶于三氯甲烷，如麻黄碱、烟碱等。ﻫ④酰胺类生物碱：由于酰胺在水中可形成氢键,所以在水中有一定的溶解度，如秋水仙碱、咖啡碱等。ﻫ3）具有特殊官能团的生物碱：

①具有酚羟基或羧基的生物碱:具有酸、碱两性,即可溶于酸水，又可溶于碱水。具有酚羟基的生物碱(又称酚性生物碱),可溶于氢氧化钠等强碱性溶液,如吗啡。具有羧基的生物碱,可溶于碳酸氢钠等弱碱溶液，如槟榔碱。ﻫ②具有内酯或内酰胺结构的生物碱：在强碱性溶液中加热,其内酯（或内酰胺）结构可开环形成羧酸盐而溶于水,酸化后环合析出，如喜树碱、苦参碱等。

2生物碱盐的溶解性

1）一般易溶于水,可溶于甲醇、乙醇类，难溶于亲脂性有机溶剂。

2)无机酸盐的水溶性大于有机酸盐；ﻫ3）无机酸盐中含氧酸盐的水溶性大于卤代酸盐;

４)小分子有机酸盐的水溶性大于大分子有机酸盐。ﻫ5)有些生物碱盐难溶于水，如小檗碱盐酸盐、麻黄碱草酸盐等。ﻫ

11．生物碱的碱性:碱性是生物碱的重要性质之一。生物碱因分子中氮原子上的孤对电子能接受质子而呈碱性,能与酸结合或盐,生物碱盐遇碱又可转变为游离生物碱,这一性质是进行生物碱提取、分离和结构鉴定的理论依据。

12.生物碱碱性强弱的表达方法：生物碱碱性强度统一用其共轭酸的酸式解离常数pKA值表达：pKa越大,该碱的碱性越强；反之,碱性越弱。根据pKa值大小,可将生物碱分为：ﻫ①强碱(pKa＞1１）,如季铵碱、胍类生物碱;（强记挂)

②中强碱（ｐKa7～11），如脂胺、脂杂环类生物碱;(中指)

③弱碱(ｐKa2~7)，如芳香胺、N－六元芳杂环类生物碱；(弱流放）ﻫ④极弱碱(pKa<2),如酰胺、N－五元芳杂环类生物碱。（极弱无限）ﻫ13.生物碱碱性强弱与分子结构的关系：氮原子的杂化方式、电子云密度、空间效应以及分子内氢键形成等有关。ﻫ1４.氮原子的杂化方式：sp3>sp2＞sｐ。ﻫ１5．生物碱的电性效应：涉及诱导效应和共轭效应,能影响氮原子上电子云的分布，因而影响生物碱的碱性大小。（1)诱导效应:供电子诱导效应使氮原子上电子云密度增长，碱性增强;吸电子诱导效应使氮原子上电子云密度减小,碱性减弱。如麻黄碱的碱性强于去甲基麻黄碱。ﻫ（２)共轭效应：当生物碱分子中氮原子的孤电子对与π电子基团共轭时,一般使生物碱的碱性减弱。常见的有苯胺和酰胺两种类型。①苯胺型：苯胺氮原子上的孤电子对与π电子形成p-π共轭体系后,其碱性减弱。如环己胺的碱性大于苯胺。②酰胺型:酰胺氮原子上的孤电子对与羰基形成p－π共轭效应,使其碱性极弱。如胡椒碱、秋水仙碱、咖啡碱等。ﻫ１6．生物碱的空间效应:若生物碱氮原子附近取代基存在空间立体障碍，不利于其按受质子，则生物碱的碱性减弱。ﻫ①麻黄碱>甲基麻黄碱②莨菪碱>东莨菪③莨菪碱＞山莨菪>东莨菪）(记忆:浪荡山东)④利血平的碱性较弱。

17．生物碱的氢键效应:当生物碱成盐后,氮原子附近如有羰基、羟基等取代基，并处在有助于形成稳定的分子内氢键时,其共轭酸稳定，碱性强。如钩藤碱碱性＞异钩藤碱。ﻫﻫ18.常用的生物碱沉淀试剂：ﻫ

沉淀反映的条件和阳性结果的鉴定：ﻫ1）反映条件：生物碱沉淀反映一般在酸性水溶液中进行（苦味酸试剂可在中性条件下进行)。

2)阳性结果的判断:一般需采用3种以上试剂分别进行反映，假如均能发生沉淀反映，可判断为阳性结果。ﻫ３)沉淀反映的应用：ﻫ①重要用于检查中药或中药制剂中生物碱的有无。

②在生物碱的定性鉴别中,这些试剂可用于试管定性反映，或作为薄层色谱和纸色谱的显色剂(常用碘化铋钾试剂)。

③在生物碱的提取分离中还可作为追踪、指示终点。

④个别沉淀试剂可用于分离、纯化生物碱,如雷氏铵盐可用于沉淀、分离季铵碱。ﻫ⑤某些能产生组成恒定的沉淀物的生物碱沉淀反映，还可用于生物碱的定量分析，如生物碱与硅钨酸试剂能生成稳定的沉淀,可用于含量测定。

ﻫ2０.生物碱显色反映:ﻫ1显色反映:某些生物碱能与一些试剂反映生成不同颜色的产物，这些试剂成为生物碱显色剂。ﻫ2常用的生物碱显色剂:ﻫ

２1．生物碱的提取：挥发性生物碱如麻黄碱可用水蒸气蒸馏法提取;可升华的生物碱如咖啡碱可用升华法提取;亲脂性生物碱用溶剂法(水或酸水、醇类溶剂、亲脂性有机溶剂）提取;水溶性生物碱常在提取脂溶性生物碱后的碱液中用沉淀法或溶剂法提取。

ﻫ22.生物碱提取方法：

1水或酸水提取法：1）阳离子树脂互换法。2）萃取法。ﻫ2醇类溶剂提取法：游离生物碱或其盐均可溶于甲醇、乙醇,可用醇类溶剂，渗漉、浸渍、回流等方法提取。ﻫ３亲脂性有机溶剂提取法:大多数游离生物碱都是亲脂性的，故可用二、三氯甲烷、苯、乙醚等提取游离生物碱。可采用浸渍、回流或连续回流法提取。ﻫ

23.生物碱的分离:ﻫ1）运用生物碱的碱性差异进行分离:强碱在弱酸性条件下能形成生物碱盐,易溶于水;弱碱则需在较强酸性条件下形成生物碱盐而溶于水。②成盐后，弱碱盐在弱碱条件下即可转变成游离生物碱，易溶于亲脂性有机溶剂；强碱盐则需在较强碱性条件下转变成游离生物碱,溶于亲脂性有机溶剂。③总碱中各生物碱的碱性不同，可用pH梯度萃取法进行分离。④对于碱性有差别的两种生物碱，可采用调pH后简朴萃取法分离。

２）运用溶解度差异进行分离：①游离生物碱：如苦参中苦参碱和氧化苦参碱的分离，可运用氧化苦参碱极性稍大难溶于乙醚，苦参碱可溶于乙醚的性质，将苦参总碱溶于氯仿，再加入１0倍量以上乙醚，氧化苦参碱即可析出沉淀。②生物碱盐:不同的生物碱与不同酸生成的盐是溶解度也不同：如麻黄中分离麻黄碱、伪麻黄碱,即运用两者草酸盐的水溶性不同,提取后经解决得到的甲苯溶液,经草酸溶液萃取后浓缩,草酸麻黄碱溶解度小而析出结晶,草酸伪麻黄碱溶解度大而留在母液中。ﻫ3）运用特殊官能团进行分离：①含羧基的生物碱能与碳酸氢钠生成羧酸盐而溶于水,可与其他碱分离;②酚性生物碱的酚羟基具有弱酸性，可与氢氧化钠溶液生成盐溶于水,而与其他非酚性生物碱分离。③内酯或内酰胺结构的生物碱可在碱性水液中加热开环生成溶于水的羧酸盐而与其他生物碱分离。ﻫ４)运用色谱法进行分离：ﻫ①吸附柱色谱:运用总生物碱各组极性差异，吸附剂吸附的强弱不同达成分离。常用氧化铝或硅胶作为吸附剂，有时也用纤维素、聚酰胺等。以苯、氯仿、乙醚等亲脂性有机溶剂或以其为主的混合溶剂系统作洗脱剂。ﻫ②分派柱色谱:对某些结构特别相近的生物碱，可采用分派色谱法。。ﻫ③高效液相色谱法(HＰLC）:分离效能好、灵敏度高、分析速度快。可用硅胶吸附色谱柱或C18反相色谱柱。ﻫ④制备型薄层色谱、干柱色谱、中压或低压柱色谱等也常用于分离生物碱。ﻫ

24.分离水溶性生物碱的常用方法：水溶性生物碱重要指季铵碱,常在提取脂溶性生物碱后的碱液中用沉淀法或溶剂法进行分离。

1沉淀法：运用水溶性生物碱可与生物碱沉淀试剂反映,生成难溶于水的复合物而从水中沉淀析出，与留在滤液中的水溶性杂质分离,以获得纯度较高的水溶性生物碱或其盐。实验室中常用雷氏铵盐沉淀试剂纯化季铵碱。

2溶剂法:运用水溶性生物碱可以溶于极性较大而又能与水分层的有机溶剂（如正丁醇)的性质，用这类溶剂与含水溶性生物碱的碱水液反复萃取,使水溶性生物碱与强亲水性的杂质得以分离。25．生物碱的色谱鉴别方法:薄层色谱法、纸色谱法、高效液相色谱法和气相色谱法。ﻫ一、薄层色谱法ﻫ（1)吸附薄层色谱法：ﻫ1)吸附剂：吸附剂常用硅胶和氧化铝。①硅胶为酸性吸附剂,易导致拖尾或复斑,影响分离效果。可在碱性条件下进行。②氧化铝自身显弱碱性，不经解决便可用于分离和检识生物碱，一般较常用,特别适合分离亲脂性较强的生物碱。ﻫ2)展开剂：展开剂系统多以亲脂性溶剂为主，一般以三氯甲烷为基本溶剂。

(2）分派薄层色谱:合用于分离有些结构十分相近的生物碱。ﻫ1支持剂与固定相:1)通常选用硅胶或纤维素粉作支持剂,以甲酰胺或水为固定相。2)甲酰胺适合分离弱极性或中档极性的生物碱;水适合分离水溶性生物碱。

２展开剂:１）分离脂溶性生物碱，应以亲脂性有机溶剂作展开剂,如三氯甲烷-苯（1:1)等;2）分离水溶性生物碱,则应以亲水性的溶剂作展开剂，如ＢAＷ系统(正丁醇－乙酸-水=４：1：5，上层)。3）在配制流动相时，需用固定相饱和。ﻫ3显色方法：1）有色生物碱可直接观测斑点；2)具有荧光的生物碱在紫外光下显示荧光斑点；３）大多生物碱的薄层色谱可用改良碘化铋钾试剂显色，显橘红色斑点。

二、纸色谱:生物碱的纸色谱多为正相分派色谱。ﻫ1固定相（三种）:1)水:2)甲酰胺:3)酸性缓冲液。ﻫ２展开剂：1）以水作固定相的纸色谱,宜用亲水性溶剂系统作展开剂,如BAW系统。2)以甲酰胺和酸性缓冲液作固定相的纸色谱，多以苯、三氯甲烷、乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂为主组成的溶剂系统作展开剂。３）展开剂在使用前也需用固定相液饱和。

３显色剂:纸色谱所用的显色剂与薄层色谱法基本相同，但含硫酸的显色剂不宜使用。

三、高效液相色谱：１)生物碱的高效液相分析可采用分派色谱法、吸附色谱法、离子互换色谱法等。其中以分派色谱法中的反相色谱法应用较多。2)根据生物碱的性质和不同的色谱方法可选择相应的固定相。3）由于生物碱具碱性，使用的流动相以偏碱性为好。4）具有挥发性的生物碱可用气相色谱法检识,如麻黄生物碱、烟碱等。

ﻫ27.含生物碱的常用中药

1.苦参:

１《中国药典》指标成分:苦参碱和氧化苦参碱。

2结构分类：属于双稠哌啶类，具喹喏里西啶的基本结构，

3性状:①苦参碱有α-、β－、γ－、δ－四种异构体。其中，α-、β-、δ－苦参碱为结晶体，常见的是α-苦参碱,为针状或棱柱状结晶，②γ-苦参碱为液态，③氧化苦参碱为无色正方体状结晶。ﻫ３碱性:苦参中所含生物碱均有两个氮原子。一个为叔胺氮（N-1）,呈碱性;另一个为酰胺氮（N-１6）,几乎不显碱性，苦参碱和氧化苦参碱的碱性比较强。ﻫ３溶解性：ﻫ1)苦参碱既可溶于水,又能溶于三氯甲烷、乙醚、苯、二硫化碳等亲脂性溶剂。ﻫ２）氧化苦参碱具半极性配位键,其亲水性比苦参碱更强,易溶于水，可溶于氯仿,但难溶于乙醚。可运用两者溶解性的差异将其分离。ﻫ3)苦参碱、氧化苦参碱和羟基苦参碱具内酰胺结构，可被水解皂化生成羧酸衍生物,酸化后又环合析出。

4）苦参生物碱的极性大小顺序是:氧化苦参碱＞羟基苦参碱＞苦参碱。(洋枪库）ﻫ3苦参生物碱的提取与分离：１)苦参以通过强酸性阳离子互换树脂提取总生物碱。2）苦参碱和氧化苦参碱运用两者在乙醚中的溶解度不同进行分离。

4苦参生物碱的生物活性：具有消肿利尿、抗肿瘤、抗病原体、抗心律失常、正性肌力、抗缺氧、扩张血管、降血脂、抗柯萨奇病毒和调节免疫等作用。

5苦参生物碱在临床应用中应注意的问题:苦参碱可致胆碱酯酶活性下降，静脉滴注苦参碱引起胆碱酯酶活性下降,产生倦怠乏力、纳差等不良反映；苦参栓可致外阴过敏；苦参注射液致过敏性休克并可致恶心、呕吐;苦参素胶囊致乙肝加重等,临床应用时需注意。ﻫﻫ2．麻黄

1重要成分：以麻黄碱和伪麻黄碱为主,ﻫ2《中国药典》指标成分:盐酸麻黄碱。ﻫ3结构分类：①麻黄生物碱分子中的氮原子均在侧链上,为有机胺类生物碱。②麻黄碱和伪麻黄碱属仲胺衍生物，且互为立体异构体,它们的结构区别在于Ｃ1的构型不同。前者为顺式,后者为反式。ﻫ4麻黄碱和伪麻黄碱的理化性质：

1)性状：麻黄碱和伪麻黄碱为无色结晶,两者均具有挥发性。

2）碱性:伪麻黄碱＞麻黄碱>甲基麻黄碱＞去甲麻黄碱(喂马驾去)ﻫ3)溶解性：①游离麻黄碱可溶于水,麻黄碱大于伪麻黄碱(马容易喂)。②麻黄碱和伪麻黄碱能溶于三氯甲烷、乙醚、苯及醇类溶剂。③草酸麻黄碱难溶于水，而草酸伪麻黄碱易溶于水;(渭水)盐酸麻黄碱不溶于三氯甲烷，而盐酸伪麻黄碱可溶于三氯甲烷。（三位）ﻫ3麻黄生物碱的鉴别反映:麻黄碱和伪麻黄碱不与一般生物碱沉淀试剂发生沉淀反映。但下列两种特性反映可用于鉴别麻黄碱和伪麻黄碱。ﻫ１）二硫化碳－硫酸铜反映：棕色沉淀。ﻫ2)铜络盐反映:溶液呈蓝紫色，再加乙醚振摇分层，乙醚层为紫红色，水层为蓝色。ﻫ４麻黄碱和伪麻黄碱的提取与分离:ﻫ１）溶剂法:①运用麻黄碱和伪麻黄碱既能溶于热水,又能溶于亲脂性有机溶剂的性质提取两者;②运用麻黄碱草酸盐比伪麻黄碱草酸盐在水中溶解度小的差异。

2）水蒸气蒸馏法：①运用麻黄碱和伪麻黄碱在游离状态时具有挥发性,可用水蒸气蒸馏法从麻黄中提取。再运用两者草酸盐的水溶性差异分离两者。

３)离子互换树脂法:①运用生物碱盐可以互换到强酸型阳离子树脂柱上,麻黄碱的碱性较伪麻黄碱弱，可先从树脂柱上洗脱下来，从而使两者达成分离。ﻫ５麻黄生物碱的生物活性:1）麻黄碱有收缩血管、兴奋中枢神经作用，能兴奋大脑、中脑、延髓和呼吸循环中枢;有类似肾上腺素样作用,能增长汗腺及唾液腺分泌,缓解平滑肌痉挛。２)伪麻黄碱有升压、利尿作用;3）甲基麻黄碱有舒张支气管平滑肌作用。

5麻黄生物碱在临床应用中应注意的问题：具兴奋中枢神经系统及强心、升高血压的作用,因此用量过大(治疗量的５~10倍)或急性中毒者，可引起头痛，烦躁,失眠，心悸，大汗不止,体温及血压升高,心动过速,心律失常，呕吐,甚至昏迷、惊厥、呼吸及排尿困难，心室纤颤等症状，甚至心肌梗死或死亡。其中麻黄碱的毒性大于伪麻黄碱。ﻫ

ﻫ3.黄连ﻫ１重要成分:小檗碱、巴马丁、黄连碱、甲基黄连碱、药根碱和木兰碱等。其中以小檗碱含量最高。

2《中国药典》指标成分:盐酸小檗碱。

3结构分类:以上生物碱均属苄基异喹啉类衍生物，除木兰碱为阿朴菲型外,其他都属于原小檗碱型,且都是季铵型生物碱。2小檗碱的理化性质:ﻫ1）性状：①小檗碱为黄色针状结晶，②盐酸小檗碱为黄色小针状结晶，加热至２２0℃左右分解，生成红棕色小檗红碱，继续加热至285℃左右完全熔融。小檗碱及其盐类干燥时，温度不宜过高，一般不超过８０℃。

２）碱性：小檗碱属季铵型生物碱,呈强碱性。

3）溶解性：①游离小檗碱能缓缓溶解于水中，易溶于热水或热乙醇,在冷乙醇中溶解度不大，难溶于苯、氯仿、丙酮等有机溶剂。②小檗碱盐酸盐在水中溶解度较小,为1：５00,较易溶于沸水，难溶于乙醇。

3小檗碱的特性性反映:

1）丙酮加成反映:生成黄色结晶性小檗碱丙酮加成物，有一定熔点,可供鉴别。ﻫ２）漂白粉显色反映:小檗碱的酸性水液中加入漂白粉(或通入氯气),溶液变为樱红色。

4小檗碱和甲基黄连碱的提取分离:运用黄连中小檗碱等生物碱盐的溶解度差异进行分离。

5黄连生物碱的生物活性:１）小檗碱有明显的抗菌、抗病毒作用,2)小檗碱、黄连碱、巴马丁、药根碱等原小檗型生物碱还具有明显的抗炎、解痉、抗溃疡、免疫调节及抗癌等作用。ﻫ６黄连生物碱在临床应用中应注意的问题：１）黄连粉或小檗碱外用或口服偶引起过敏性皮疹；2)小檗碱静注或肌注有毒性反映,引起药疹、皮疹、血小板减少以致过敏性休克，静脉给予大剂量的小檗碱则可引起循环、呼吸骤停以及急性心源性脑缺氧综合征，甚至死亡，临床应用应注意。

4．川乌

1《中国药典》指标成分:乌头碱、次乌头碱和新乌头碱。ﻫ２结构分类：四环或五环类二萜类生物碱(C１4和C8的羟基常和乙酸、苯甲酸结合成酯）。ﻫ3毒性大小:双酯型乌头碱>单酯型乌头碱＞无酯键的醇胺型生物碱(双单无）

3川乌生物碱的生物活性：1)乌头和附子的提取物具有镇痛、消炎、麻醉、降压及对心脏产生刺激等作用，其有效成分为生物碱。2)附子具有升压、扩张冠状动脉等作用,中医用于回阳救逆。

4川乌生物碱在临床应用中应注意的问题:1)由于乌头碱类化合物有剧毒，用之不妥易致中毒,且毒性较强,0．2mg即可中毒,2~4mg即可致人死亡。其药物引起的不良反映重要涉及神经系统及心血管系统,临床应用时需注意。2）乌头不宜与半夏、瓜蒌、贝母、白蔹、白及等同用，临床配伍时应注意。ﻫ

5洋金花

1）重要化学成分：莨菪碱（阿托品）、山莨菪碱、东莨菪碱、樟柳碱和Ｎ－去甲莨菪碱。

２）《中国药典》指标成分：硫酸阿托品、氢溴酸东莨菪碱。

３）结构分类：莨菪烷类生物碱,由莨菪醇类和芳香族有机酸结合生成的一元酯类化合物。

2莨菪烷类生物碱的理化性质:ﻫ１）性状:①莨菪碱为细针状结晶,其外消旋体阿托品是长柱状结晶,加热易升华。②东莨菪碱为黏稠状液体。③山莨菪碱为无色针状结晶。ﻫ２）旋光性:①除阿托品无旋光性外，其他均具有左旋旋光性ﻫ3)碱性:①影响因素：空间效应和诱导效应。②碱性强弱：莨菪碱>山莨菪碱>东莨菪碱、樟柳碱。(浪荡山东）

4）溶解性:亲水性强弱：莨菪碱﹤山莨菪碱﹤东莨菪碱、樟柳碱。（与碱性反)

①莨菪碱（或阿托品)亲脂性较强,易溶于乙醇、三氯甲烷,可溶于四氯化碳、苯，难溶于水。

②东莨菪碱有较强的亲水性,可溶于水，易溶于乙醇、丙酮、乙醚、三氯甲烷等溶剂，难溶于苯、四氯化碳等强亲脂性溶剂。

③樟柳碱的溶解性与东莨菪碱相似，也具较强的亲水性。

④山莨菪碱由于多一个羟基,亲脂性较莨菪碱弱,能溶于水和乙醇。

5）水解性:莨菪烷类生物碱都是氨基醇的酯类,易水解,特别在碱性水溶液中更易水解。如莨菪碱(阿托品)水解生成莨菪醇和莨菪酸。

3莨菪烷类生物碱的鉴别反映：

1)氯化汞沉淀反映:莨菪碱生成黄色沉淀，加热后沉淀变为红色。东莨菪碱则生成白色沉淀。ﻫ2)Vitali反映:莨菪碱（或阿托品）、东莨菪碱等莨菪烷类生物碱分子结构中具有莨菪酸部分者，用发烟硝酸解决，产生硝基化反映,生成三硝基衍生物，此物再与苛性碱醇溶液反映，分子内双键重排,生成醌样结构的衍生物而呈深紫色,渐转暗红色,最后颜色消失。

3）过碘酸氧化乙酰丙酮缩合反映（DDＬ反映)：樟柳碱分子具邻二羟基结构而显黄色。ﻫ4洋金花中生物碱的生物活性:1）莨菪碱及其外消旋体阿托品有解痉镇痛、解救有机磷中毒和散瞳作用；2)东莨菪碱除具有莨菪碱的生理活性外，尚有镇静、麻醉作用。ﻫ5洋金花在临床应用中应注意的问题:中毒机制重要为Ｍ-胆碱反映。对周边神经表现为克制副交感神经功能作用,对中枢神经系统则为兴奋作用,严重者转入中枢克制,也可影响呼吸及温度调节中枢。ﻫ

6马钱子ﻫ１《中国药典》指标成分：士的宁、马钱子碱。ﻫ2结构分类:吲哚类生物碱均有两个氮原子,,其中吲哚环上的氮原子呈内酰胺结构,几乎无碱性,另一个氮原子为叔胺,相称于一元碱,呈中档强度碱性。

４）性状:①士的宁为单斜柱状结晶，味极苦,毒性极强。②马钱子碱为针状结晶，味极苦，有强毒性。

２马钱子生物碱的鉴别方法：

1)与硝酸作用:①士的宁显淡黄色，遇氨气转变为紫红色。②马钱子碱显深红色,再加氯化亚锡溶液，则由红色转变为紫色。ﻫ2)与浓硫酸/重铬酸钾作用:①士的宁显蓝紫色,渐变为紫堇色、紫红色，最后为橙黄色。②马钱子碱无颜色反映。ﻫ３马钱子在临床应用中应注意的问题:成人用量5～１０mｇ可发生中毒现象，30mg可致死。此外,有毒成分能经皮肤吸取,外用不宜大面积涂敷。

三、糖和苷ﻫ1．糖的分类:按水解和分子量大小分类:①单糖:不能再被水解，糖类物质的最小单位,游离状态存在。如葡萄糖、鼠李糖等。

②低聚糖:２~9个单糖分子通过苷键聚合而成。二糖、三糖、四糖,茹蔗糖、麦芽糖、龙胆二糖等。③多聚糖:1０个以上单糖通过苷键聚合而成。

2.常见单糖的结构特性：距羰基最远的那个不对称碳原子的构型定为整个糖分子的绝对构型,其羟基向右的为Ｄ型,向左的为L型。单糖成环后，生成一对差向异构体α与β两种构型：①Fiｓcｈer式中C１－０H与原Ｃ5或C４,-OH顺式的为α,反式的为β。②Haworth式中C1－0H与C５(或C４）上取代基（Ｃ6或Ｃ5），同侧的为β,异侧的为α。

3蔗糖：非还原糖。两个单糖都是以半缩醛或半缩酮上的羟基通过脱水缩合而成的聚糖。3.常见单糖的英文缩写:葡萄糖(glc），半乳糖(gal），甘露糖(ｍan)，鼠李糖（rｈａ）,木糖(ｘyｌ),果糖(fru）,阿拉伯糖(ara)

4．淀粉直链淀粉和支链淀粉的区别及鉴别方法:淀粉由直链的糖淀粉和支链的胶淀粉组成。

１糖淀粉:1)为α1→4连接的Ｄ-葡萄吡喃聚糖;２）聚合度一般为300～350,高的可达1０00；3）能溶于热水得澄明溶液，

4)通常占淀粉总量的ｌ7%~３4％。5）遇碘呈蓝色。ﻫ2:胶淀粉:１）也是α１→4葡聚糖，但有α１→６的支链，平均支链长为25个葡萄糖单位;2）聚合度为3000左右;3)不溶于冷水,在热水中呈胶状。４）遇碘呈紫红色。

ﻫ5.苷的定义：是由糖或糖的衍生物与非糖类化合物,通过糖的端基碳原子连接而成的化合物。ﻫﻫ6．苷元按化学结构分类：氰苷、香豆素苷、木脂素苷、蒽醌苷、黄酮苷、吲哚苷。

７.按苷类在植物体内的存在状况分类:原存在于植物体内的苷称为原生苷,水解后失去一部分糖的称为次生苷。

ﻫ８.按苷键原子分类：Ｏ-苷、S-苷、N-苷和C-苷，其中以O-苷最为常见。

ﻫ9.氧苷（O-苷):以苷元不同又可分为醇苷、酚苷、氰苷、酯苷和吲哚苷。

①醇苷：醇羟基与糖端基羟基脱水而成（醇羟—糖羟）,如红景天苷、毛莨苷、獐牙菜苦苷、海星环苷等。醇苷苷元中不少属于萜类和甾醇类化合物，其中强心苷和皂苷是醇苷中的重要类型。ﻫ②酚苷：通过酚羟基而成的苷，苯酚苷、萘酚苷、蒽醌苷、香豆素苷、黄酮苷、木脂体苷等都属于酚苷。如天麻苷、水杨苷等。ﻫ③氰苷:重要是指一类α-羟腈的苷。特点：多数为水溶性,不易结晶，容易水解,特别有酸和酶催化时水解更快。生成的苷元α—羟腈很不稳定，立即分解为醛(酮)和氢氰酸,而在碱性条件下苷元容易发生异构化。ﻫ④酯苷:羧基和糖的端基碳相连接(羧—糖碳)。特点：苷键既有缩醛性质又有酯的性质，易为稀酸和稀碱所水解，如山慈菇苷A。某些二萜和三萜的羧基上也常构成酯苷结构，特别在三萜皂苷中多见,如土槿皮甲酸和乙酸。

⑤吲哚苷:吲哚醇与糖的端基碳相连(吲—糖碳）,如豆科属和蓼蓝中特有的靛苷。

1０.硫苷（S-苷):糖端基羟基与苷元上羧基缩合而成(糖羟—苷羧)。如芥子苷、萝卜苷等。

11．氮苷（Ｎ-苷）：氮原子与糖的端基碳相连（氮—糖碳)。如巴豆。

ﻫ12碳苷（Ｃ-苷）：糖基直接以C原子与苷元的Ｃ原子相连。碳苷以黄酮碳苷最为常见,常与O－苷共存,如牡荆素。芦荟苷。

１3.苷的性状：1）吸湿性的无定形粉末,少数结晶。2）一般无味，少数有甜或苦味,如穿心莲新苷具有苦味。ﻫ

14．苷的溶解性:１)大多数的苷具有一定的水溶性(亲水性）,其亲水性随糖基的增多而增大；２)碳苷无论在水中,还是在有机溶剂中,溶解度均较小。ﻫ

15.苷的旋光性：１)天然苷类多呈左旋。2)苷水解后生成的糖多为右旋。比较水解前后旋光性的变化,可用以检识苷类的存在。

ﻫ16.糖的氧化反映:单糖分子中有醛(酮）基、伯醇基、仲醇基和邻二醇基结构单元，可被氧化。

1氧化顺序：醛（酮）基＞伯醇基>仲醇基(劝伯仲）

2重要氧化反映:ﻫ1）葡萄糖银镜反映:生成银。ﻫ２）葡萄糖斐林反映：生成砖红色沉淀。可用于鉴定可溶性还原糖（既醛基）的存在。

3）溴水氧化:只氧化醛糖,不氧化酮糖，可作为鉴别反映。

４）硝酸氧化:不仅可以氧化糖的醛基,还可以氧化糖端基,这可作为糖二酸的制备方法，还常用于糖结构的测定。ﻫ5）过碘酸氧化：ﻫ①合用范围:只是对于α-羟基醛(酮）反映,对酮酸反映非常慢;

②在中性或弱酸性条件下,对顺式邻二醇羟基的氧化速度比反式快得多,但在弱碱性条件下顺式和反式邻二醇羟基的反映速度相差不大;ﻫ③对固定在环的异边并无扭曲余地的邻二醇羟基不反映。ﻫ④对开裂邻二醇羟基的反映几乎是定量进行的,生成的ＨIO3可以滴定，最终的降解产物（如甲醛、甲酸等)也比较稳定；ﻫ⑤反映在水溶液中进行。通过测定HI0４的消耗量以及最终的降解产物，可以推测出糖的种类、糖的氧环大小（吡喃糖或呋喃糖）、糖与糖的连接位置、分子中邻二醇羟基的数目以及碳的构型等。ﻫﻫ17.糖羟基反映的活泼顺序：半缩醛羟基＞伯醇羟基>Ｃ2-羟基(半百C)ﻫ１8.糖的醚化反映:①常用的醚化反映：甲醚化、三甲基硅醚化和三苯甲醚化等。②常用的甲醚化方法有：Hawｏrth法、Purdｉｃ法、Kuhn法、箱守法（Hakｏmｏri)。其中箱守法和改良箱守法的甲醚化能力最强。

19.糖的酰化反映：:①常用的酰化反映:乙酰化、甲苯磺酰化。②酰化反映所用溶剂多为醋酐，催化剂多为吡啶、氯化锌、醋酸钠等,通常在室温放置下即可获全乙酰化物。

20．糖的缩醛和缩酮化反映:①酮或醛在脱水剂作用下易与具有适当空间的１,3－二醇羟基或邻二醇羟基生成环状的缩醛或缩酮。

②常用脱水剂：无机酸、无水氯化锌、无水硫酸铜等。③可以运用缩醛、缩酮反映作为某些羟基保护剂，也可运用它来推测结构中有无顺邻二醇羟基或1,3-二醇羟基。对于特定的糖还可推测其氧环大小。ﻫﻫ2１．糖的硼酸络合反映:具有邻二羟基的化合物可与硼酸、试剂反映生成络合物,处在同一平面上的羟基才干形成稳定的络合物。

22.糖的羰基反映:１)与硝酸氧化同样常用于糖的结构测定。2）具有醛或酮羰基的单糖可苯肼反映。ﻫﻫ２3.糖的显色反映：Moｌish反映:常用的试剂由浓硫酸和α-萘酚组成。硫酸兼有水解苷键的作用，生成单糖,再浓硫酸的作用下，失去3分子水,生成糠醛类化合物。这些糠醛衍生物和许多芳胺、酚类可缩合成有色物质,借此来检识糖和苷类化合物。ﻫ

24.糖的纸色谱鉴定法:

１）展开剂:正丁醇－乙醇-水和水饱和的苯酚。

２）单糖Ｒｆ规律：①碳原子数目少的糖Rf值比碳原子多的大；②若碳原子数目相同，则酮糖比醛糖的大,去氧糖更大;③分子组成相同的糖，构象式中竖键羟基多的比横键羟基多的Ｒf值大。ﻫ

25.纸层析的糖斑点显色意义:①拟定糖斑点的位置;②区别糖的类型。ﻫ

２6.糖常用的显色剂显色剂合用对象硝酸银试剂使还原糖显棕黑色三苯四氮唑盐试剂使单糖和还原性低聚糖呈红色苯胺-邻苯二甲酸盐试剂使单糖中的五碳糖和六碳糖所呈颜色略有区别3,５－二羟基甲苯－盐酸试剂使酮糖和具有酮糖的低聚糖呈红色过碘酸加联苯胺使糖、苷和多元醇中有邻二羟基结构者呈蓝底白斑27．苷键的酸催化水解法：（3)蒽醌类化合物的酸性及酸性强弱与结构的关系ﻫ1醌类化合物多具有酚羟基，显酸性,加碱成盐，加酸析出。ﻫ2醌类化合物的酸性规律:

1）带羧基的蒽醌类化合物酸性强于不带羧基的；ﻫ2）羟基位于苯醌或萘醌的醌核上则属插烯酸结构,酸性与带羧基的蒽醌类衍生物类似；

3)由于α-羟基蒽醌中的－OH与C＝O形成分子内氢键，故酸性弱于β－羟基蒽醌衍生物；

4）羟基数目越多,酸性越强。ﻫ5)蒽醌类衍生物酸性强弱的排列顺序为:

含COＯH>含二个以上β－OＨ＞含一个β-OH＞含二个以上α－OH＞含一个α－OH。（CＯ>2β＞1β＞2α＞１α）

6在分离工作中，常采用碱梯度萃取法来分离蒽醌类化合物。用碱性不同的水溶液（5%碳酸氢钠溶液、5％碳酸钠溶液、1%氢氧化钠溶液、５％氢氧化钠溶液）依次提取：

1)酸性较强的化合物（含COOＨ或二个β-OH)被碳酸氢钠提出;ﻫ2)酸性较弱的化合物(含一个β-ＯH）被碳酸钠提出;ﻫ３)酸性更弱的化合物（含二个或多个α-OH）只能被１％氢氧化钠提出;

4）酸性最弱的化合物（含一个α-OH）则只能溶于5％氢氧化钠。

1常用的酸:盐酸、硫酸、乙酸、甲酸等。ﻫ2机制:苷原子先质子化，然后断键生成碳正离子或半椅型中间体,在水中溶剂化而成糖。

３苷键酸水解的难易规律:

1)按苷键原子的不同，酸水解由易到难的顺序为：

N-苷＞０-苷＞S－苷>C-苷。

2）酸水解由易到难的顺序为:ﻫ①呋喃糖苷＞吡喃糖苷(呋吡)

②酮糖苷>醛糖苷(酮醛）

③五碳糖苷＞甲基五碳糖苷>六碳糖苷＞糖醛酸苷（五甲六酸）ﻫ④2，6-去氧糖苷>２-去氧糖苷>6-去氧糖苷＞2－羟基糖苷＞2-氨基糖苷（26,２，６去氧,2羟,２氨）ﻫ3）苷元的种类不同时的水解：ﻫ①芳香苷较脂肪苷易于水解。ﻫ②苷元为小基团时：苷键为ｅ键(横键)较a键（竖键)易水解；

③苷元为大基团时：苷键为a键（竖键))较ｅ键（(横键）)易水解。ﻫ

２8.苷的碱催化水解:酯苷，及酚苷、烯醇苷、β－吸电子基的苷等具有酯性质的苷。一般的苷键对碱稳定。如水杨苷、４-羟基香豆素苷、藏红花苦苷等都可为碱所水解。ﻫﻫ２９．苷的酶催化水解:

１)特点：专属性高、条件温和、即可得到苷元，又可得到次级苷。ﻫ2)常用的酶有：①β-果糖苷水解酶:如转化糖酶，可以水解β-果糖苷键而保存其他苷键结构。②α-葡萄糖苷水解酶：如麦芽糖酶。③β-葡萄糖苷水解酶:如杏仁苷酶，可以水解一般β-葡萄糖苷和有关六碳醛糖苷，专属性较低。ﻫﻫ3０.苷类化合物的提取分离:１）克制或破坏酶的活性。2）加入一定量的碳酸钙，或采用甲醇、乙醇或沸水提取。ﻫ3)勿与酸和碱接触。4)明确提取的目的规定,即规定提取的是原生苷、次生苷、还是苷元。ﻫ

31.糖的种类、构型和比例的拟定:ﻫ1种类鉴别:苷类水解所得到的各种单糖和低聚糖的结构大多数是已知的,只要与各种已知糖的标准品对照就可加以鉴定。

2苷键构型的拟定：测定苷键构型的问题重要有三种方法,即酶催化水解方法、分子旋光差法（Kｌyne法）和NMＲ法。ﻫ３糖链的组成及单糖比例的拟定：1)苷键所有酸水解，然后用纸色谱检出单糖的种类。经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。2）单糖的定性定量也可以通过苷全甲基化并水解后得到的甲基化单糖的气相色谱测定，但需要各种各样的甲基化单糖作标准品。ﻫﻫ32.糖与糖的连接位置：1）缓和水解法．。2)Smｉｔh裂解法。３）质谱分析（快原子轰击质谱)。４）２D-ＮMR和NＯE差谱技术:ﻫ33.糖与苷元的连接位置：1)化学法。２）13Ｃ-NMR法。ﻫ

３4实例:苦杏仁ﻫ1《中国药典》指标成分:苦杏仁苷，规定含量不低于３.O％。

2性质：斜方柱状结晶,易溶于水和醇，而几乎不溶于乙醚。苦杏仁苷是一种氰苷,易被酸和酶所催化水解。水解所得到的苷元α－羟基苯乙腈很不稳定,易分解生成苯甲醛和氢氰酸。1)苯甲醛具有特殊的香味，通常将此作为鉴别苦杏仁苷的方法。2)苯甲醛可使三硝基苯酚试纸显砖红色，此反映也可用来鉴定苦杏仁苷的存在。

3使用注意：苦杏仁苷水解后可产生HCN，对呼吸中枢起镇静作用，故少量服用可起镇咳作用,但大剂量可中毒,引起组织窒息。因此对含氰苷的中药或制剂要严格控制用药量。

ﻫ

四、醌类

1.醌类化合物的化学结构类型：具有αβ-α＇β＇不饱和酮的结构，当其分子中连有-ＯH、-OCH3等助色团时,多显示黄、红、紫等颜色。ﻫ２.醌类的分类：重要有苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌等四类。

１苯醌类:分为邻苯醌和对苯醌两大类，前者不稳定,天然存在者以后者为多见。如软紫草中克制前列腺素PGE２。ﻫ2萘醌类：分为α（1，４)，β(1，2）及ampｈｉ（2,６)三种类型.但天然存在的大多为α-萘醌类衍生物。如紫草素及异紫草素。ﻫ3菲醌类::天然菲醌分为邻醌及对醌两种类型。如从中药丹参根中提取得到多种菲醌衍生物,其中丹参醌Ⅰ、丹参醌ⅡA、丹参醌ⅡB、隐丹参醌、丹参酸甲酯、羟基丹参醌ⅡＡ等为邻醌类衍生物(另含字母）,而丹参新醌甲、丹参新醌乙、丹参新醌丙则为对醌类化合物。(队甲乙丙）ﻫ4蒽醌类：可分为单蒽核及双蒽核，按氧化限度又可分为氧化蒽酚、蒽酚、蒽酮、蒽酚及蒽酮的二聚物。按是否含糖和是否形成苷来分类,分为游离蒽醌和结合蒽醌。

3.单蒽醌：

１）蒽醌及其苷类：天然蒽醌以９，１０－蒽醌最为常见，其C-９、C-10为最高氧化状态，较为稳定。①大黄素型：羟基分布于两侧的苯环上，多数化合物呈黄色。许多中药如大黄、虎杖等有致泻作用的活性成分就属于此类化合物。羟基蒽醌类衍生物多与葡萄糖、鼠李糖结合成苷存在。②茜草素型:羟基分布在一侧苯环上,颜色为橙黄至橙红色，种类较少,如中药茜草中的茜草素及其苷、羟基茜草素、伪羟基茜草素。ﻫ2）氧化蒽酚类：蒽醌在碱性溶液中可被锌粉还原生成氧化蒽酚及其互变异构体蒽二酚,氧化蒽酚及蒽二酚均不稳定，氧化蒽酚易氧化成蒽酮或蒽酚，蒽二酚易氧化成蒽醌,故两者较少存在于植物中。ﻫ3）蒽酚或蒽酮类:蒽醌在酸性溶液中被还原,则生成蒽酚及其互变异构体蒽酮。在新鲜大黄中具有蒽酚类成分,贮存2年以上则检测不到蒽酚。假如蒽酚衍生物的ｍeso位羟基与糖缩合成苷，则性质比较稳定，只有通过水解去糖后,才容易被氧化转变成蒽醌类化合物。

4)C－糖基蒽类:这类蒽衍生物是以糖作为侧链通过C一C键直接与苷元相连。

ﻫ４.双蒽核类:

1)二蒽酮类衍生物：①二蒽酮类是二分子,蒽酮脱去一分子氢后互相结合而成，其上下两环的结构相同且对称,又可分为中位连接(Ｃ10-C10')和α位连接(C1-C1＇或C4-C４')等形式。二蒽酮多以苷的形式存在，如中药大黄、番泻叶中致泻的重要成分番泻苷A、B、C、Ｄ等皆为二蒽酮类衍生物。ﻫ②二蒽酮类化合物C１0－C１0'键易于断裂,生成蒽酮类化合物。大黄中致泻的重要成分番泻苷A。ﻫ2）二蒽醌类：蒽醌类脱氢缩合或二蒽酮类氧化形成。天然二蒽醌类中两个蒽醌环都是相同且对称的，由于空间位阻的互相排斥,使两个蒽醌环呈反向排列，如山扁豆双醌。ﻫ３)去氢二蒽酮类：中位二蒽酮脱去一分子氢被进一步氧化，两环之间以双键相连。颜色呈紫红色。ﻫ4）日照蒽酮类:去氢二蒽酮进一步氧化,α与α’位相连组成一六元环。ﻫ5）中位苯骈二蒽酮类:在天然蒽衍生物中具有最高氧化限度,也是天然产物中高度稠合的多元环系统之一。

ﻫ

5.醌类化合物的性状:１）醌类中无酚羟基的，则近乎无色。２）母核引入助色团越多,颜色越深。3)天然醌类多为有色晶体。ﻫ4）苯醌和萘醌多以游离态存在，蒽醌一般结合成苷存在于植物体中。

6.醌类化合物的升华性:游离的醌类具有升华性,小分子的苯醌类及萘醌类还具有挥发性,能随水蒸气蒸馏。ﻫﻫ7.醌类化合物的溶解度与结构的关系：ﻫ１游离醌类极性较小,一般溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂，几乎不溶于水。ﻫ２成苷后极性显著增大,易溶于甲醇、乙醇中,在热水中也可溶解,但冷水中溶解度较小，几乎不溶于苯、乙醚、氯仿等极性较小的有机溶剂。ﻫ３蒽醌的碳苷在水中的溶解度都很小，难溶于有机溶剂。8．蒽醌类化合物的酸性：醌类化合物多具有酚羟基，显酸性,加碱成盐，加酸析出。ﻫ

９.醌类化合物的酸性规律：ﻫ1)带羧基的蒽醌类化合物酸性强于不带羧基的；ﻫ２)羟基位于苯醌或萘醌的醌核上则属插烯酸结构,酸性与带羧基的蒽醌类衍生物类似;ﻫ3)由于α－羟基蒽醌中的-OH与C=Ｏ形成分子内氢键,故酸性弱于β－羟基蒽醌衍生物；

4)羟基数目越多,酸性越强。ﻫ

9.蒽醌类衍生物酸性强弱的排列顺序为:含CＯOH＞含二个以上β-OH＞含一个β-OＨ＞含二个以上α-OH>含一个α-OH。（CO>2β>１β>2α>1α）

10.蒽醌类衍生物酸性强弱的分离工作:用采用碱梯度萃取法来分离蒽醌类化合物。用碱性不同的水溶液（5%碳酸氢钠溶液、5%碳酸钠溶液、1％氢氧化钠溶液、5％氢氧化钠溶液）依次提取：

１)酸性较强的化合物（含COOH或二个β-OH）被碳酸氢钠提出；ﻫ2)酸性较弱的化合物（含一个β－OH)被碳酸钠提出;ﻫ3）酸性更弱的化合物(含二个或多个α-OＨ)只能被1％氢氧化钠提出；

4）酸性最弱的化合物（含一个α-OＨ)则只能溶于5％氢氧化钠。ﻫﻫ11.蒽醌类化合物的显色反映：

１Fｅigｌ反映:醌类衍生物在碱性条件下加热与醛类、邻二硝基苯反映,生成紫色化合物。

2无色亚甲蓝显色实验：无色亚甲蓝乙醇溶液(1mg／mｌ)专用于检识苯醌及萘醌。样品在白色背景下呈现出蓝色斑点,可与蒽醌类区别。ﻫ３Bｏrｎtｒaｇer’ｓ反映:在碱性溶液中，羟基醌类颜色改变并加深,多呈橙、红、紫红及蓝色,如羟基蒽醌类化合物遇碱显红至紫红色,称之为Bｏrｎtrａgeｒ’s反映。蒽酚、蒽酮、二蒽酮类化合物需氧化形成羟基蒽醌后才干呈色,其机理是形成了共轭体系。ﻫ4Kｅsｔing-Crａveｎ反映：当苯醌及萘醌类化合物的醌环上有未被取代的位置时,在碱性条件下与含活性次甲基试剂，如乙酰乙酸酯、丙二酸酯反映,呈蓝绿色或蓝紫色。蒽醌类化合物因不具有未取代的醌环,故不发生该反映,可用于与苯醌及萘醌类化合物区别。

５与金属离子的反映:蒽醌类化合物如具有α-酚羟基或邻二酚羟基,则可与Pb2+、Mｇ2+等金属离子形成络合物。

１与Pb2+形成的络合物在一定ｐH条件下能沉淀析出,与Ｍg２+形成的络合物具有一定的颜色,可用于鉴别。

2假如母核上只有1个α-OH或1个β-ＯH，或2个-0H不在同环上，则显橙黄至橙色；ﻫ3如已有１个α-OH,并另有l个-0H在邻位则显蓝至蓝紫色,若在间位则显橙红至红色，在对位则显紫红至紫色。（琳琅见红对子)

ﻫ1２.醌类化合物的提取分离：

1提取：一般选用甲醇、乙醇作为提取溶剂。

2分离:ﻫ1）蒽醌苷类和游离蒽醌衍生物的分离:蒽醌苷类与游离蒽醌衍生物的溶解性不同样，前者易溶于水,而后者则易溶于有机溶剂如氯仿等,因而常用与水不混溶的有机溶剂萃取或回流提取蒽醌粗提物,可将两者分开。

2）游离蒽醌衍生物的分离：一般采用溶剂分步结晶法、pＨ梯度萃取法和色谱法。pH梯度萃取法是最常用的手段。柱色谱法常用的吸附剂有硅胶、磷酸氢钙、聚酰胺,一般不用氧化铝，以免发生不可逆的化学吸附。ﻫ3)蒽醌苷类的分离：蒽醌苷类水溶性较强,需要结合吸附及分派柱色谱进行分离，常用载体有聚酰胺、硅胶及葡聚糖凝胶。

ﻫﻫ1３.蒽醌类化合物的红外光谱法（IR）特性；

1)蒽醌的羰基频率饱和直链酮型羰基的典型伸缩频率为１715cm-1,由于蒽醌羰基的α、β位存在共轭系统，故未取代蒽醌伸缩频率为1６75ｃm-1。

２）羟基蒽醌的羟基频率α-OH因与Ｃ=Ｏ缔合,其吸取频率移至315０ｃm－1以下,多与不饱和C—H的伸缩振动频率重叠；β－OH振动频率较α-OＨ高,在360０~3１50ｃm-1区间,若只有l个β－OH,则大多数在3300～33９0cm－1之间有ｌ个吸取峰，若在3600～3150cm-1之间有几个峰,表白蒽醌母核也许有多个β-OＨ。

３）1，8-二羟基蒽醌和1-羟基蒽醌具有2个羰基峰,其中1，8-二羟基蒽醌的２个羰基峰相差大于40ｃm-１，１-羟基蒽醌的２个羰基峰相差小于4０ｃm-1。其他类型的羟基蒽醌均为1个羰基峰。

ﻫ１４.蒽醌类化合物的ＭS裂解规律：蒽醌类衍生物的质谱特性是分子离子峰为基峰，游离醌依次脱去两分子ＣO,得到Ｍ-CO及M-2CO的强峰以及它们的双电荷峰。

１5．含醌类化合物的常用中药：ﻫ1．大黄

《中国药典》采用紫外分光光度法测定药材中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量，总量不得少于干燥药材１.５%。药材储藏置于通风干燥处。ﻫﻫ2.丹参

1重要化学成分:1）脂溶性成分大多为共轭醌、酮类化合物,具有特性的橙黄和橙红色。如丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮等。（纸隐字母)2）水溶性成分则涉及丹参素,丹参酸甲、乙、丙,原儿茶酸，原儿茶醛等。（水元素甲、乙、丙)ﻫ２《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量,丹参酮ⅡＡ不得少于0．20%，丹酚酸B不得少于3．0%。药材储藏需置于干燥处。ﻫ3化学方法：丹参醌Ⅱ显绿色，隐丹参醌显棕色，丹参醌Ⅰ显蓝色。（一蓝二绿隐衷)ﻫ４生物活性：１)丹参的药理作用有：减轻心肌、脑缺血再灌注损伤，克制血小板凝聚和血栓形成，克制胶原纤维的产生和促进纤维蛋白降解，清除自由基等。２)重要用于治疗心脑血管疾病，如冠心病、高血压、脑卒中、动脉粥样硬化等，同时还用于治疗肝纤维化、消化性溃疡、白内障、癌症、记忆缺失、艾滋病等疾病。3）近年来开发出的丹参注射液是以丹参中水溶性成分为主的制剂，丹参滴丸则是以脂溶性丹参酮为主的制剂。如由丹参醌ⅡA制得的丹参醌ⅡA磺酸钠注射液已用于临床,用于治疗冠心病、心肌梗死。

ﻫ3．紫草ﻫ1《中国药典》采用紫外分光光度法测定药材中羟基萘醌总含量，以左旋紫草素计,不得少于0.8０%;采用高效液相色谱法测定药材中β，β－二甲基丙烯酰阿卡宁（β，β－二甲基丙烯酰欧紫草素)含量，不得少于O．30％。药材储藏置于干燥处。ﻫ２生物活性：具有抗肿瘤、抗炎和抗菌活性，尚有抗肝脏氧化损伤和抗受孕作用。此外紫草素作为天然色素已广泛应用于医药、化妆品和印染工业中。ﻫﻫ４．虎杖ﻫ《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中大黄素和虎杖苷含量,大黄素不得少于0.60％,虎杖苷不得少于0.15%。药材储藏置干燥处，防霉,防蛀。ﻫ

五、香豆素和木脂素

1．香豆素名称和存在形式:邻羟基桂皮酸的内酯,广泛分布于高等植物中，特别以芸香科和伞形科为多，少数发现于动物和微生物中。在植物体内，它们往往以游离状态或与糖结合成苷的形式存在。

.

2.香豆素的结构类型:母核为苯骈α－吡喃酮。分子中苯环或α-吡喃酮环上常有取代基存在。

3．香豆素分类:简朴香豆素类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素类、异香豆素类及其他香豆素类。

１简朴香豆素类：１）苯环有取代基。绝大部分香豆素在C－7位都有含氧基团存在,仅少数例外。２)伞形花内酯，即7－羟基香豆素可以认为是香豆素类成分的母体。３）其他Ｃ-5、C-6、C-８位都有存在含氧取代的也许,常见的基团有羟基、甲氧基、亚甲二氧基和异戊烯氧基等。4）异戊烯基除接在氧上外，也有接在碳上的,并且以C-６和C-8上出现较多。如茵芋苷。

2呋喃香豆素类：由香豆素母核上所存在的异戊烯基与其邻位的酚羟基环合而成的,成环后有时随着着失去3个碳原子(丙酮）的变化。呋喃香豆素又分为线型和角型。1）６,7-呋喃骈香豆素型(线型)：线型分子由C6－异戊烯基与C7-羟基成环，三环处在一直线上。此型以补骨脂内酯(补骨脂内酯型）为代表,例如香柑内酯、花椒毒内酯、欧前胡内酯、紫花前胡内酯等，其中紫花前胡内酯为未经降解的二氢呋喃香豆素。2）７,8-呋喃骈香豆素型（角型)：角型分子由C８-异戊烯基与C7－羟基成环,处在一条折角线上。此型以白芷内酯(异补骨脂内酯型)为代表，如异香柑内酯、茴芹内酯。ﻫ3吡喃香豆素类：C-6或C-８位异戊烯基与邻酚羟基环合而成2,２－二甲基-α-吡喃环结构,形成吡喃香豆素。按吡喃环骈合的位置也可分为线型和角型。1）６,7-吡喃骈香豆素（线型）此型以花椒内酯为代表，如美花椒内酯。2）7,8-吡喃骈香豆素（角型）此型以邪蒿内酯为代表,如沙米丁和维斯纳丁。3）其他吡喃香豆素5,６-吡喃骈香豆素如别美花椒内酯;双吡喃香豆素如狄佩它妥内酯。ﻫ４异香豆素类：异构体，在植物中存在的多数为二氢异香豆素的衍生物,其代表化合物有茵陈炔内酯、仙鹤草内酯等。ﻫ5其他香豆素类：是指α-吡喃酮环上有取代基的香豆素,C-3、Ｃ-４上常有苯基、羟基、异戊烯基等取代，如沙葛内酯、黄檀内酯等。

4．香豆素的性状、溶解性、荧光性及其他性质:ﻫ1性状:１)游离的香豆素：多数有较好的结晶，且大多有香味。２）香豆素中分子量小的：有挥发性，能随水蒸气蒸馏，并能升华。3)香豆素苷：多数无香味和挥发性，也不能升华。

2溶解性：1）游离的香豆素:能溶于沸水，难溶于冷水,易溶于甲醇、乙醇、氯仿和乙醚;2）香豆素苷类:能溶于水、甲醇和乙醇,难溶于乙醚等极性小的有机溶剂。ﻫ3荧光性质:1）香豆素类在可见光下为无色或浅黄色结晶。2）香豆素母体自身无荧光，而羟基香豆素在紫外光下多显出蓝色荧光，①C-７位引入羟基即有强烈的蓝色荧光,加碱后可变为绿色荧光;②C-８位再引入一羟基，则荧光减至极弱，甚至不显荧光。③呋喃香豆素多显蓝色荧光,荧光性质常用于色谱法检识香豆素。ﻫﻫ５.香豆素与碱的作用：1）香豆素类及其苷因分子中具有内酯环,在热稀碱溶液中内酯环可以开环生成顺邻羟基桂皮酸盐,加酸又可重新闭环成为本来的内酯。但长时间在碱中放置或UＶ光照射,则可转变为稳定的反邻羟基桂皮酸盐，再加酸就不能环合成内酯环。香豆素与浓碱共沸，往往得到酚类或酚酸等裂解产物。因此用碱液提取香豆素时，必须注意碱液的浓度,并应避免长时间加热，以防破坏内酯环。２)７位甲氧基香豆素较难开环，这是由于7-OCH３的供电子效应使羰基碳的亲电性减少,7-羟基香豆素在碱液中由于酚羟基酸性成盐，更难水解。

ﻫ６.香豆素的应用:对于香豆素及其苷类,可以运用上述性质进行该类化合物的提取和精制，即先溶解于热稀苛性碱的水溶液中，酸化后沉淀析出，借以和杂质分离从而达成提取和精制的目的。如由秦皮中提取治疗菌痢的有效成分,就可用此法。ﻫﻫ７.香豆素的显色反映:

1）异羟肟酸铁反映：由于香豆素类具有内酯环，在碱性条件下可开环,与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸，然后再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。ﻫ2）三氯化铁反映:具有酚羟基的香豆素类可与三氯化铁试剂产生显色反映，通常为蓝绿色。ﻫ3)Gibb’s反映:试剂是２,6-二氯（溴)苯醌氯亚胺，它在弱碱性条件下可与酚羟基对位的活泼氢缩合成蓝色化合物。ﻫ4)Ｅｍersｏｎ反映：试剂是氨基安替比林和铁氰化钾,它可与酚羟基对位的活泼氢生成红色缩合物。ﻫﻫ８.香豆素的提取分离方法：

1水蒸气蒸馏法：小分子的香豆素类因具有挥发性,可采用水蒸气蒸馏法进行提取。

2碱溶酸沉法：由于香豆素类可溶于热碱液中，加酸又析出,故可用０.5%氢氧化钠水溶液（或醇溶液)加热提取,提取液冷却后再用乙醚除去杂质,然后加酸调节pH至中性,适当浓缩，再酸化，则香豆素类或其苷即可析出。但必须注意，不可长时间加热,此外加热温度不能过高，碱浓度不宜过大，以免破坏内酯环。ﻫ３系统溶剂法：从中药中提取香豆素类化合物时，可采用系统溶剂提取法。常用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇顺次萃取。石油醚对香豆素的溶解度并不大,其萃取液浓缩后即可得结晶。乙醚是多数香豆素的良好溶剂,但亦能溶出其他可溶性成分，如叶绿素类、蜡质等。其他极性较大的香豆素和香豆素苷，则存在于甲醇或水中。ﻫ4色谱方法:结构相似的香豆素混合物最后必须经色谱方法才干有效分离，柱色谱吸附剂可用中性和酸性氧化铝以及硅胶，碱性氧化铝慎用。常用己烷和乙醚,已烷和乙酸乙酯等混合溶剂洗脱。其他吸附剂有用混以甲酰胺或乙二醇的纤维素来分离呋喃香豆素或酯类香豆素,用活性炭-硅藻土混合物分离香豆素苷类的。除柱色谱外，其他色谱方法如制备薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱等都有用于香豆素类分离的。

ﻫ9.简朴香豆素的UV、ＩR和1H-NMR波谱特性：

１UV光谱:1)香豆素类化合物的紫外吸取与α-吡喃酮相似,在30０ｎm处可有最大吸取；2)但吸取峰的位置与取代基有关,未取代的香豆素，其紫外吸取光谱一般可呈现２75nm、2８４nm和3１0nm三个吸取峰；3）如分子中有羟基存在,特别是在C-6或C－7上，则其重要吸取峰均红移，有时几乎并成一峰。4）在碱性溶液中,多数香豆素类化合物的吸取峰位置较在中性或酸性溶液中有显著的红移现象，其吸取度也有所增大,如7－羟基香豆素的入ｎａx３25nm（４．15），在碱性溶液中即向红移动至3７2ｎm(4.23)，这一性质有助于结构的拟定。ﻫ２ＩR光谱：１)香豆素类成分属于苯骈α－吡喃酮,因此在红外光谱中应有α-吡喃酮１74５~1715cm－1处的羰基特性吸取峰。2）此外还可见芳环双键的l645～1625cm-１吸取峰。3）假如有羟基取代尚有３60０～3200cm-1的羟基特性吸取峰。

3NMR谱：:１)香豆素母核环上的质子受内酯羰基吸电子共轭效应的影响，C-3、Ｃ－6和C-８上的质子信号在较高场(3６8）;C-4、C-５和C-7上的质子信号在较低场(45７）。2）简朴香豆素的1H—NMＲ谱上可见如下特性信号：ﻫＨ-3：δ6.1～６.4(ｄ,J＝9Ｈz）

H-4：δ７.5~8．3(d,J=９Hz）ﻫＨ-5:δ7.３8(d,J＝9Ｈz）ﻫＨ-6和H-8:δ6．87(2Ｈ,m）

1０.木脂素的理化性质:ﻫ1木脂素多数为无色或白色结晶，但新木脂素不易结晶。ﻫ2木脂素多数不挥发，少数如去甲二氢愈创酸能升华。ﻫ3游离木脂素偏亲脂性，难溶于水,能溶于苯、氯仿、乙醚、乙醇等。

4与糖结合成苷者水溶性增大,并易被酶或酸水解。ﻫ5木脂素分子中常有醇羟基、酚羟基、甲氧基、亚甲二氧基、羧基和内酯环等官能团，因此它也具有这些官能团所具有的化学性质。如Labet反映等。

ﻫ1１.含香豆素类化合物的中药实例ﻫ1秦皮

中国药典则采用高效液相色谱方法并规定本品按干燥品计,含秦皮甲素、秦皮乙素的总量不得少于1．0%。药材储藏置通风干燥处

2前胡ﻫ《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中白花前胡甲素和白花前胡乙素含量,其中白花前胡甲素含量不少于0.90％,白花前胡乙素不少于O.24％。药材储藏置阴凉干燥处,防霉,防蛀。ﻫﻫ3肿节风

含量测定指标共有３个：异秦皮啶（检测方法：反向高效液相色谱）、反丁烯二酸(检测方法：正相高效液相色谱)和总黄酮（检测方法:紫外比色）。具有一定的抗菌、消炎、止痛和抗肿瘤活性。ﻫ4）《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中异秦皮啶和迷迭香酸含量,其中异秦皮啶含量不少于0．02%,迷迭香酸含量不少于0.０2%。药材储藏于通风干燥处。

4补骨脂

《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中补骨脂素和异补骨脂素含量，两者总含量不得少于0.70%。药材储藏置于干燥处。ﻫ

12.含木脂素的中药实例ﻫ1五味子

《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中五味子醇甲含量不得少于0．40%。药材储藏通风干燥处,防霉。ﻫﻫ2厚朴

《中国药典》采用高效液相色谱法测定药材中厚朴酚与和厚朴酚含量,两者总含量不得少于2.０%。药材储藏于通风干燥处。

六、黄酮

１.黄酮类化合物的基本母核:2－苯基色原酮的一系列化合物。现在，黄酮类化合物是泛指两个苯环（A与Ｂ环)通过三个碳原子互相联结而成的一系列化合物。其基本的碳架为Ｃ6-Ｃ3-Ｃ6。

２．苷元的结构与分类：ﻫ根据中央三碳链的氧化限度、Ｂ-环连接位置(２或３位)以及三碳链是否成环等特点,可将中药中重要的黄酮类化合物分类:

1黄酮：母核为2-苯基色原酮,且3位无含氧基团取代。ﻫ2黄酮醇:母核3位连有羟基或其他含氧基团。ﻫ３二氢黄酮：母核2,３位双键被氢化。ﻫ4二氢黄酮醇:黄酮醇2，3位双键被氢化。

5异黄酮:母核为3－苯基色原酮，即B环连接在Ｃ环的3位。ﻫ6查耳酮:三碳链不构成环，为二氢黄酮C环的1、2位键断裂生成的开链衍生物。ﻫ７橙酮:母核Ｃ环为含氧五元环。ﻫ8花色素：母核C环无羰基，1位氧原子以盐形式存在。ﻫ9黄烷醇:花色素的1,2位和3，4位双键被氢化，分为黄烷-３-醇类和黄烷-3，４-二醇类。ﻫﻫ3．黄酮类化合物的性状:ﻫ1黄酮类化合物多为结晶性固体,少数(如黄酮苷类)为无定形粉末。

2游离的苷元(二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇、二氢异黄酮除外）无旋光性。ﻫ3黄酮苷类(结构中引入了糖分子）有旋光性,且多为左旋。ﻫ4黄酮类化合物的颜色与分子中是否有交叉共轭体系及助色团（－0Ｈ、－0CH３等)的种类、数目、取代位置有关。ﻫ1)黄酮的色原酮部分原本是无色的,但在2位上引入苯环后,即形成了交叉共轭体系，使共轭链延长,因而显现出颜色。ﻫ①黄酮、黄酮醇及其苷类多显灰黄至黄色。

②查耳酮为黄至橙黄色。

２）二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮类因不具有交叉共轭体系或共轭链较短,故不显色。ﻫ①二氢黄酮、二氢黄酮醇无色。

②异黄酮显浅黄色。

3）黄酮、黄酮醇分子中，特别是在7位及4’位引入-0Ｈ及-0CH3等助色团后，因有促进电子移位、重排作用,而使化合物的颜色加深。ﻫ４)花色素及其苷元的颜色随ｐH不同而改变,一般显红、紫、蓝颜色。

4.黄酮类化合物的溶解性与化学结构的关系：

1一般游离苷元难溶或不溶于水,易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱水溶液中。ﻫ1）黄酮、黄酮醇、查耳酮等平面性强的分子，因分子与分子间排列紧密，分子间作用力较大,故更难溶于水;

２)二氢黄酮及二氢黄酮醇等,因系非平面性分子,分子与分子间排列不紧密,分子间作用力较小,有助于水分子进入，故溶解度稍大。ﻫ3）花青素虽也为平面性结构,但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强,在水中的溶解度较大。ﻫ2黄酮类苷元分子中引入羟基,将增长在水中的溶解度;而羟基经甲基化后,则增长在有机溶剂中的溶解度。ﻫ４黄酮类化合物的羟基被糖苷化后，在水中溶解度则相应增大，而在有机溶剂中的溶解度则相应减小。

1)黄酮苷一般易溶于水和甲醇、乙醇等极性有机溶剂中;但难溶或