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第三章离心技术与离心机习题参考答案一、名词解释离心现象:物体远离圆心运动的现象称为离心现象,也叫离心运动。为重力沉降。沉降速度:在强大离心力的作用下,单位时间内物质的运动的距离。,主要是由于密度差引起的,这种现象称为集中现象。解释R·C·F:相对离心力,是指在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”解释沉降系数:是指颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。清程度的一个指标。rpm。最大离心力:指离心机可产生的最大相对离心力场R·C·F,单位是g。m×n。调速范围:也叫转速设置范围,指离心机转头转速可调整的范围。温度掌握范围:指离心机工作时可掌握的样品温度范围。工作电压:一般是指离心机电机工作所需的电压。电源功率:通常是指离心机电机的额定功率。二、选择题【A1.B 2.C 3.B 4.C 5.A 6.C 7.B 8.A9.C 10.A 11.A 12.C 13.C 14.C 15.D 16.B17.A 18.A 19.B 20.A 21.D 22.E 23.D 24.C25.C 26.B 27.C 28.B 29.C 30.A 31.D 32.B33.E 34.C 35.E 36.B 37.C 38.C【X1.ABCE2.ABC3.ACD4.ABCDE5.ABDE6.ABCD7.ABCD8.ABD9.ABC10.ABCDE11.ADE12.ABCDE13.ACDE14.ABD15.ABCD16.ABCDE17.ABCE18.ABCD19.ABCD20.ABCD21.ABCD22.AB23.ABCE24.ABC25.ABE26.ABC27.ABCD28.ABC29.ABC30.ABCDE31.CD32.ABCDE33.ABCDE34.ABCDE35.ABCE36.ABC三、简答题37.ABC38.ADE39.ABCDE什么是离心技术,离心技术主要用于哪些方面?,实现离心技术的仪器是离心机。离心技术主要用于各种生物样品的分别、纯化和制备,在细胞生物学和分子生物学的每一进程中,总可见到离心技术的运用。离心机的工作原理是什么?〔1〕离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进展分别、浓缩和提纯生物样品的一种方法〔2〕悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,〔3〕颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度〔4〕微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、〔5〕离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,迫使液体中微粒抑制集中加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分别开。怎样抑制微粒在沉降中所发生的集中现象?度的物质分别开。什么是离心力及离心现象?体远离圆心运动的现象称为离心现象。也叫离心运动。离心力的数学表达公式是什么?答:公式Fcm2rm(

)2r

60 3600转次数,r为离心半径,m为质量。什么叫相对离心力?什么叫沉降速度?答:指在强大离心力作用下,单位时间内物质运动的距离。什么叫离心沉降?1〕在离心机中,离心管放于离心转头里,当离心机开动时,离心管绕离心转头〔2〕对于离心管而言,样品处相像。这种颗粒在圆周运动时的切线运动称为离心沉降。什么叫最小离心力场及最大离心力场?Rmin,该处承受的离心力场心力场称为最大离心力场。常用的离心方法分几类?等三类。什么是差速离心法?这个方法又称为分步离心法。差速离心法的优、缺点是什么?〔1〕〔2〕〔3〕〔1〕〔2〕〔3〕颗粒被挤压,离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚拢而失活。什么是密度区带离心法?肯定离心力下把颗粒安排到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分别方法。什么是速率区带离心法?到达彼此分别的目的。什么是等密度区带离心法?〔即等密度点〕形成区带,称为等密度区带离心法。分析型超速离心机的工作原理是什么?答:其工作原理与一个一般水平转子一样。分析室有上下两个平面的石英窗,离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观看小室中正在沉降的物质,可以通过对紫〔如对蛋白质和DNA〕当光线通过一个具有不同密度区的透亮液,在这些区带的界面上产生光的折射。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜,结果在检测系统的照动的速度可以得到物质沉降速度的指标。分析型超速离心机的应用范围?〔1〕〔2〕〔3〕物大分子中的构象变化国际上对离心机的分类有几种方法,分成哪些类型?答:通常国际上对离心机的分类有三种方法:按用途分、按转速分、按构造分。按用速冷冻式、台式低速自动平衡离心机等。低速离心机、高速离心机、超速离心机的应用范围是什么?1〕低速离心机主要用作血浆、血清的分别及脑脊液、胸腹水、尿液等有形成份2〕DNRNA超速离心机主要用于亚细胞器的分级分别,还可以分别病毒、核酸、蛋白质和多糖等。超速离心机按用途可分为几种类型?答:超速离心机按用途分为制备型、分析型及分析制备两用型三种。制备型及分析型超速离心机的用途有哪些?统对测试样品的沉降过程及纯度进展观看。免疫血液离心机都用于哪些方面?处理离心;用于抗人球蛋白试验;用于洗涤红细胞及血浆的分别等。细胞涂片离心机的工作程序是怎样进展的?答:当样品经梯度离心分别出杂质,将细胞使用离心力从液体悬浮物中分别出来,甩细胞、细菌分布均匀,无重叠,染色效果好。低速离心机的大致构造有哪些?〔转头、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。高速、超速〔冷冻〕离心机的构造包括哪几局部?答:高速〔冷冻〕离心机的构造由转动装置、速度掌握系统、温度掌握系统、真空系掌握、真空系统和转头四局部组成。答:一般可分为五大类。固定角转头:用于分别沉降速度有明显差异的颗粒样品。式主要用于线粒体、细胞核等的分别和密度梯度离心。连续流淌转头:用于悬浮介质中高速分别较小的颗粒物质。区带转头:用于大容量的密度梯度离心。垂直转头:用于样品在短时间作密度梯度离心。简述区带转头的构造与用途?梯度液通过密封管道泵入转子内,然后通过密封组件中心输液管参加样品。主要用于大容量的密度梯度离心。对使用离心方法的选择要求是什么?差速离心法。使沉降系数比较接近的物质得以分别。离心时密度不同的物质颗粒因浮力差异或向下沉降,或向上漂移,始终移到它们各自密度恰好对应的位置〔等密度点,形成区带。可承受等密度梯度离心。离心机分别样本时的离心时间、温度和pH确实定,其意义是什么?衡时间;密度梯度离心所需的离心时间则是指形成界限清楚的区带的时间。值确实定是为了防止欲分别物质的凝集、变性和失活,除了在离心介质的选择方面加以留意外,还必需掌握好温度及介质溶液的pH值等离心条件。在使用离心机时应留意哪些问题?1〕确定不能装载单数的管子,以便使负载均匀地分布在转头的四周:料离心管的上部凹陷变形。严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管:机检查,准时排解故障。未找出缘由前不得连续运转。简述离心机转头的使用、消毒及保养方式。答:转头是离心机中须重点保护的部件,每次使用前要严格检查孔内是否有异物和污垢,以保持平衡;每次使用后,必需认真检查,并用温水〔500C-600C〕及中性洗涤剂浸泡清洗或定期用消毒液消毒〔每周消毒一次、上蜡、枯燥保存。每一转头都应有使用档案,记录累积的使用时间,假设超过了该转头的最高使用时限,则须按规定降速使用。怎样对离心机进展保养?5亿转处理真空泵油一次,每使用1500小时左右,应清洗驱动部位轴承并加上高速润滑油脂,转轴与转头接合部应常常涂酯防锈,长期不用时应涂防锈油加油纸包扎,寻常不用时,应每月低速开机1-2次,每次0.5小时,保证各部位的正常运转。离心机电机不转时应怎样进展检查?1〕好。〔2〕主电源指示灯亮而电机不能启动。①检查波段开关,瓷盘变阻器损坏或其连接线离心机机体震惊、响声特别,常见的缘由有哪些?1〕〔2〕3〕〔4〕5〕〔6〕本身损伤。Ficoll梯度液直接分别外周血单个核细胞的原理。分层液液面的细胞,就可以从外周血中分别到单个核细胞。简述快速氯化铯密度梯度离心法提取分别大质粒DNA的原理。〔EB〕过量的状况下,EB-DNAEB结合量成反比。因RNARNA。也可分别共价闭合环状DNA与线形或带缺口的环状DNA。同时,EB-DNA络合物在紫外光下能产生荧光,可见到离心后形成的区带,便于收集DNA,所得的EB-DNA络合物用异戊醇抽提去EB,即DNADNA纯度很高。离心分别技术在实际工作中应用的范围大致有哪些?高〔超〕速离心机已成为生物、医学、化学、农业试验室必不行少的试验设备。在生物化学领域,超速离心技术广泛应用于蛋白质、酶、激素、核酸和病毒的争论。简述国内外型离心机的类型及应用特点。答:我国研制的SS

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