医学微生物学11第10章肠杆菌科

主讲人：《中华医学检验全书》主编北华大学临床微生物学教授李影林

2010年10月第10章肠杆菌科

一、种类肠杆菌科细菌目前已有44个属170多个种。临床上常见的有

概述埃希菌属（Escherichia）沙门菌属（Salmonella）志贺菌属（Shigella）耶尔森菌属（Yersinia）枸橼酸杆菌属（Citrobacter）克雷伯菌属（Klebsiella）

肠杆菌属、多源菌属、哈夫尼亚属沙雷菌属（Serratia）

变形杆菌属、普罗菲登菌属、摩根菌属肠杆菌科中的其他菌属

第一节埃希菌属

（Escherichia）

(E.coli)(E.fergusonii)(E.hermannii)(E.vulneris)(E.blattae)不脱胺/凝聚埃希菌。(E.abecarboxylata/agglomerans)

代表菌：大肠埃希菌（Escherichiacoli）

学习大肠埃希菌有何意义?1.大肠埃希菌为肠道正常菌群成员。2.又为条件致病菌,引起肠道外感染。3.一些血清型具有致病性。4.环境卫生学和食品卫生学常用作粪便污染的指标。5.用于基因工程研究。

一、生物学性状

（一）形态与染色1.G-两端钝圆的中等大小的短杆菌。2.周鞭毛，无芽胞，电镜观察有周身菌毛

。菌毛：普通菌毛、性菌毛

3.某些菌株有包膜（K）。4.培养初期或分泌物中可形成球形。1.对营养要求不高，自身合成能力很强

。2.兼性厌O215~45℃均可发育，最适温度37℃，最适pH7.4~7.6。3.在普通琼脂上可形成光滑、湿润、灰白色半透明、凸起、边缘整齐中等大小（2~3mm）的菌落。4.在血平板上生长更佳，某些菌株（溶血性菌株）可产生β溶血。

（二）培养特点（1）SSA—指示剂为中性红，分解乳糖产酸的细菌（大肠埃希菌）呈红色菌落（2）中国蓝

大肠埃希菌分解乳糖产酸形成大而浑浊的蓝色菌落，其他不分解乳糖的肠道菌为透明淡红色菌落。5.在肠道选择性培养基上，因能分解乳糖产酸，使指示剂变色形成有色菌落。（三）生化反应

1.可分解多种糖（醇）类葡、乳、麦、甘⊕对蔗糖、卫矛醇、棉子糖、鼠李糖则因菌株而异。2.IMVC—为++--。3.尿素酶、苯丙氨酸、丙二酸盐

-。

4.克氏双糖铁⊕/⊕IMVCIMVC++----++

(四)Ag构造复杂

主要有O、H、K三种Ag1.O-Ag本质—是细菌细胞壁的成分，其化学组成是脂多糖组成—其分子由3部分组成：

2.H-Ag⑴本质—其化学组成为鞭毛蛋白⑵性质—不耐热⑶其特异性取决于多肽链排列顺序和空间构型

3.K-Ag⑴本质—化学成分是多糖⑵性质

⑶细菌的种类不同，其名称也不同

E.coli－K-AgS.typhiîíì--不耐热的作用与相应故可阻断周围因其包绕.bAbAgO，AgO.a

区别点LAB①破坏其本身的可凝集性100℃1h120℃2.5h100℃1h②破坏其抑制O血清的凝集100℃1h120℃2.5h100℃1h③与抗体结合力的破坏100℃1h121℃2.5h不破坏100℃2.5h不破坏④抗原性破坏100℃1h120℃2h100℃1h⑤本质菌毛抗原荚膜荚膜抗原表示法：上述3种抗原均用阿拉伯数字表示其型别按O:K:H

例如：O111:K58:H2简写：O111:58:2O86:B7:H3简写：O86:7:3表示法：上述3种抗原均用阿拉伯数字表示其型别按O:K:H

例如：O111:K58:H2简写：O111:58:2O86:B7:H3简写：O86:7:3ViAg（五）抵抗力不强1.10g/L石炭酸15~30min被杀死;2.加热60℃10min即死;3.对酸敏感

二、致病性

(一)致病物质1.黏附素使细菌紧密黏附于肠道泌尿道细胞上,避免尿液的冲刷和肠蠕动排除。

⑴特点:具有高度的特异性①定植抗原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(CFA/Ⅰ、CFA/Ⅱ、CFA/Ⅲ)

②集聚黏附菌毛Ⅰ和Ⅲ(

AAF/Ⅰ、AAF/Ⅲ)

③束形成菌毛(bundleformingpili,Bfp)

⑵种类④紧密黏附素(intimin)⑤P菌毛⑥侵袭质粒抗原(invasionplasmidantigen,Ipa)蛋白

⑦Dr菌毛

(1)志贺毒素Ⅰ和Ⅱ(Shigatoxins,Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ)（2）耐热肠毒素a和b（heatstableenterotoxin,STa,STb）

(3)不耐热肠毒素Ⅰ和Ⅱ

（heatlabileenterotoxin,LT-Ⅰ,LT-Ⅱ）

(4)溶血素A2.外毒素

(1)志贺毒素Ⅰ和Ⅱ(Shigatoxins,Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ)①产生菌株及作用肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagicE.coli,EHEC)可表达志贺毒素,引起上皮细胞微绒毛的破坏。②性质

Stx-Ⅰ与志贺菌产生的志贺毒素基本相同。Stx-Ⅱ则有60%的同源。两型毒素均由溶原性噬菌体介导。③结构及作用A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA阻止与氨酰tRNA的结合,终止蛋白质合成。Stx由1个A亚单位和5个B亚单位成。B亚单位与宿主细胞特异性糖脂受体结合(肠绒毛和肾上皮细胞均有高浓度的糖脂受体)④作用机制A.绒毛结构的破坏引起吸收减低和液体分泌的相对增加。B.溶血性贫血的尿毒综合征(hemolyticuremicsyndrome,HUS)在产生志贺毒素Ⅱ(Stx-Ⅱ)的EHEC中较多,因Stx-Ⅱ能选择性破坏肾小球内皮细胞,引起肾小球滤过减少和急性肾功能衰竭。C.志贺毒素(Stx)还能刺激炎症细胞因子(肿瘤坏死因子-α,白细胞介素-6)的表达。D.还可加强糖脂受体的表达。①产生菌株及作用肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenicE.coli,ETEC)产生耐热肠毒素由质粒编码。STb与人类疾病无关

。②STa的性质

:

A.低分子量多肽;B热稳定(100℃20min不失活)C.免疫原性差。③STa的作用机制:与LT-Ⅰ不同。是通过激活肠黏膜细胞的鸟苷环化酶使cGMP水平↑→引起腹泻，细菌产生肠毒素的能力与两种Plasmid有关。应当指出的是:STa阳性菌株同时产生LT,具有更强的致病性。（2）耐热肠毒素a和b（heatstableenterotoxin,STa,STb）

(3)不耐热肠毒素Ⅰ和Ⅱ

（heatlabileenterotoxin,LT-Ⅰ,LT-Ⅱ）①产生菌株及作用肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenicE.coli,ETEC)产生耐热肠毒素由质粒编码。LT-Ⅱ与人类疾病无关LT-Ⅰ

是引起人类胃肠炎的致病物质,在结构和功能上与霍乱弧菌产生的肠毒素密切相关。

②特点:不耐热

③结构:A亚单位(毒素的活性部位)B亚单位与肠黏膜上皮细胞表面的GM1神经节苷脂结合后,使A亚单位穿过细胞膜与腺苷环化酶作用

LT-Ⅰ↓小肠上皮C的腺苷环化E刺激前列腺素的释放和炎症因子↓的产生ATP→cAMP↓促进肠粘膜分泌功能进一步导致水

↓分的丧失引起腹泻④致病作用

(4)溶血素A在尿路致病性大肠埃希菌所致疾病中有重要作用。3.侵袭力（1）K-Ag—抗吞噬有抵抗抗体和补体（2）菌毛—帮助细菌粘附于粘膜表面。

4.内毒素

5.Ⅲ型分泌系统是一种向真核靶细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统。

（二）所致疾病(一)

1.肠外感染（1）尿路感染—常见的有O1、O2、O6、O7、O11、O25、O75，这些大肠埃希菌具有K-Ag（抗吞噬）和菌毛（粘附泌尿道抗冲洗）。（2）败血症—如烧伤引起G-败血症（3）胆囊炎、肺炎以及新生儿或婴幼儿脑膜炎。

（二）所致疾病(二)

2.胃肠炎（1）产毒素大肠埃希菌(ETEC)引起婴幼儿及旅游者腹泻。（2）致病性大肠埃希菌(EPEC)主要引起婴儿腹泻。（3）侵袭性大肠埃希菌(EIEC)引起较大儿童和成年人腹泻，有时可形成暴发性流行。（4）肠出血性大肠埃希菌(EHEC)：由O157:H7引起的腹泻，有2％～7％发展成溶血性尿毒综合征，出现溶血性贫血，血小板减少性紫癜和急性肾衰竭。（5）肠凝聚性大肠埃希菌(EAEC)：成人慢性腹泻，儿童急性腹泻。

三、微生物学检查法

（一）肠外感染的细菌学检验主要指普通大肠埃希菌1.标本的采集

视疾病种类不同而异呼吸系—痰烧伤及化脓感染—脓汁及分泌物尿路感染—尿液菌血症（败血症）—血液N症状—脑脊液胆囊炎—胆汁卫生细菌学—水等2.检验方法(1)涂片染色检查法除血液标本外,均作。(2)分离培养血平板、SSA、MAC(3)鉴定

（1）初步鉴定

①形态染色特点②菌落特征（EMB、中国蓝、麦康凯)③KIAA.A+-④生化反应初步鉴定为大肠埃希菌

ïïîïïíì硝酸盐还原+氧化触E+-E、IMVC++--MIU++-（2）最后鉴定①触E+②氧化E-③葡⊕或/+乳⊕/迟缓+肌醇-IMVC++--④脲酶-H2S-⑤苯丙脱氨E-⑥硝酸盐还原+⑦动力多+（二）肠道内感染的细菌学检验

ïïïîïïïíì)EaggEC()EHEC()EIEC()EPEC()ETEC(5肠凝聚型大肠埃希菌肠出血性大肠埃希菌肠侵袭性大肠埃希菌肠致病性大肠埃希菌产肠毒素型大肠埃希菌组包括

检验方法标本接种选择培养基挑选可疑菌落鉴定大肠埃希菌ELISA核酸杂交PCR其它其他分子生物学技术检测不同类型胃肠炎Ecoli的肠毒素毒力因子和血清型等特征卫生细菌学检查Ecoli随粪便排除污染环境、水源、饮料、食品等检测样品中Ecoli间接表明肠道致病菌污染大肠菌群指数每1000ml(g)样品中的大肠菌群数。大肠菌群系指在37℃24h内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌。包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属。我国卫生标准规定:饮水＜3个/L汽水果汁＜5个/L防治原则1.疫苗的免疫预防正在研究中。2.抗生素治疗要在药敏试验指导下进行。3.尿道插管和膀胱镜检查应无菌操作。4.腹泻病人应进行隔离治疗,及时校正水和电解质平衡。5.采取措施减少医院感染。6.保持高卫生标准,减少接触引起胃肠炎的大肠埃希菌菌株的危险。7.污染的水和食品是肠产毒素性大肠埃希菌(ETEC)的重要传播媒介;肠出血性大肠埃希菌(EHEC)常由污染的肉类和未消毒的牛奶引起。要充分烹饪。

第二节

志贺菌属（Shigella）

志贺菌属痢疾志贺菌（S.dysentriae）福氏志贺菌(S.flexneri)鲍氏志贺菌(S.boydii)宋内志贺菌(S.sonnei)一、生物学性状

（一）形态与染色从形态学上看，志贺菌属与一般肠杆菌科细菌无明显的区别。突出点是无鞭毛不能运动。1.G-短小杆菌2.无特殊构造3.有菌毛

（二）培养特点

1.营养要求不高，可在普通培养基上生长。2.普通琼脂平板光滑、湿润、圆形凸起，无色半透明，边缘整齐，中等大小的菌落。

3.在肠道选择性培养基上，为不发酵乳糖菌落值得提出的是，宋内志贺菌培养48h后可转为乳糖发酵菌落。也常出现扁平粗糙型菌落

SSA（三）生化反应

较为复杂

葡萄糖、MR阳性

尿乳蔗枸赖脱，V-P、H2S均阴性

SSA无色半透明菌落克氏双糖铁斜面粉红,

底层黄+IMVC（四）Ag构造及分类

1.Ag构造

特点——无H-Ag（1）O-Ag——是分类的依据①型特异性Ag②群特异性Ag（2）K-Ag2.分类根据O-Ag不同将shigella分为4个群

(P122，表7-12)

-我国福氏最多，宋内次之。南方鲍氏也不少。

A群:即痢疾志贺菌有12个血清型①均不发酵甘露醇②无鸟氨酸脱羧酶③与其他各群无血清学关系④我国常见的为2型，又叫舒密志贺菌（西藏），I（靛基质）+，其他型-

B群又叫福氏菌群有6个血清型,2个变种(X、Y)其特点：①分解甘露醇②无鸟氨酸脱羧酶-③Ag构造较复杂，各型间有交叉Ag

C群又叫鲍氏菌群，有18个血清型其特点：①分解甘露醇②鸟氨酸脱羧酶-③各型间无交叉Ag

D群又叫宋内菌群，只有一个血清型其特点：①分解甘露醇②鸟氨酸脱羧酶+③迟缓分解乳糖④本群菌有光滑型（S）和粗糙型（R）两种较其他肠杆菌科细菌弱

。（五）抵抗力1.不耐热60℃10min即可杀死2.对一般消毒剂敏感3.耐4~8种药物

二、致病性与免疫性

（一）致病物质

1.侵袭力

2.内毒素

3.外毒素派伊尔淋巴结的M细胞通过Ⅲ型分泌系统向上皮细胞和巨噬细胞分泌4种蛋白志贺菌IpaAIpaB黏附并侵入IpaCIpaD诱导细胞膜凹陷导致细菌内吞志贺菌溶解吞噬小泡进入细胞质内繁殖宿主细胞内肌动纤维的重排,推动细菌进入毗邻细胞细胞到细胞传播①细菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保护②通过诱导细胞程序性死亡从吞噬中得到了存活③引起白细胞介素-1β的释放吸引多形核白细胞到感染组织肠壁完整性破坏④细菌到达较深层的上皮细胞,加速了细菌的扩散1.侵袭力

作用2.内毒素内毒素肠黏膜通透性内毒素的吸收促进发热神志障碍中毒性休克作用内毒素肠黏膜破坏炎症溃疡形成典型的脓血黏液便内毒素肠壁自主神经系统作用于肠功能紊乱肠蠕动失调和痉挛肤痛里急后重3.外毒素其功能同肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagicE.coli,EHEC),引起上皮细胞微绒毛的破坏。①产生菌株及功能A群志贺菌(痢疾志贺菌)Ⅰ型和Ⅱ型可产生志贺外毒素。②结构及作用A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA阻止与氨酰tRNA的结合,终止蛋白质合成。Stx由1个A亚单位和5个B亚单位成。B亚单位与宿主细胞特异性糖脂受体结合(肠绒毛和肾上皮细胞均有高浓度的糖脂受体)毒素作用:损伤上皮细胞。个别病人志贺毒素可介导肾小球内皮细胞的损伤,导致溶血性尿毒综合征(HUS)急性、亚急性、慢性菌痢，急性最常见，中毒性痢疾。（二）所致疾病(三)免疫性

病后,在血液中可产生循环抗体,此抗体无保护作用。其抗感染免疫主要是消化道黏膜表面的分泌型IgA(SIgA)。病后免疫期短,不巩固。其原因:1.感染只停留在肠壁局部。2.型别多。

三、微生物学检查法

（一）标本的采集1.用无菌棉拭取病人新排出的粪便的粘液或脓血便。2.无便者，用无菌棉拭从肛门或直肠直接取。3.对昏迷病人、不排便者——灌肠。4.慢性患者——用直肠镜。

注意事项：1.用药前采集标本2.要快（要立即送检）最好1h内或床边接种3.取材不要粪尿相混（本菌怕酸）4.如不能立即送检者，立即用3%甘油盐水保存液，远道可放在冰壶中

（二）检验程序

（三）检验方法

1.分离培养SSA及MacConkey——无色透明中等大菌落2.初步鉴定

（1）试探性玻片凝集先用志贺菌属多价诊断血清→再用单价血清（2）初步生化反应KIA、MIU

KIA MIU 抗血清斜面 底层 气体 H2S动力 吲哚 脲酶 多价 单价- + -/+ - - +/- - + +

3.最后鉴定

（1）生化反应,除KIA、MIU外，甘露醇（+/-）、蔗糖（-/+）、C（-）、苯丙氨酸脱氨酶（-）、ONPG（β-半乳糖苷酶）（-）、鸟氨酸脱羧酶（-）（宋内+）(2)血清学鉴定：生化特点符合,且多价、单价血清均呈阳性者，应转入分型鉴定。测定志贺菌的侵袭力可用Sereny试验豚鼠眼结膜试验另一只眼用大肠埃希菌作对照

4.毒力试验受试18~24h培养物接种结囊内发生结膜炎Sereny试验阳性表明受试菌有侵袭力志贺毒素的测定HeLa细胞Vero细胞PCR直接检测其毒素基因stxA和stxB（1）免疫荧光菌球法——特异性较强（2）免疫染色法

(3)协同凝集试验

(4)胶乳凝集试验

(5)分子生物学方法5.快速检验法

第三节沙门菌属（Salmonella）动物致病的沙门菌从对人引起疾病的角度

本属的代表菌——伤寒沙门菌（S.typhi）。

引起肠热症副伤寒沙门菌伤寒沙门菌人的致病菌ïïîïïíìïïþïïýüBparatyphi.S(A)typhi.S(毒污染乳肉蛋引起食物中肠炎沙门菌猪霍乱沙门菌鼠伤寒沙门菌人畜共患ïîïíìïþïýü-)senteritidi.S()suischolera.S()mtyphimuriu.S(c

一、生物学性状

（一）形态与染色

基本同E.coli1.G-细长的中杆菌2.无芽胞、无荚膜，除雏白痢沙门菌和鸡沙门菌外均具有周身鞭毛3.多数菌株有菌毛

（二）培养特点

3.生长现象（1）普通琼脂平板圆形，无色半透明，光滑湿润，边缘整，粗糙型表面干燥边缘不整（呈锯齿状）。

(2)产生H2S的细菌在SSA上形成带黑心的菌落。

（三）生化反应

1.沙门菌与大肠埃希菌的区别

乳蔗I

E.coli⊕⊕+Salmonella---

尿素

Proteus+Salmonella-

葡

麦

甘

鼠

鸟

C（柠）

其他沙门菌

⊕⊕⊕⊕/-++/-

伤寒沙门菌

+++---/+3.伤寒沙门菌与其他沙门菌的主要区别

2.沙门菌与变形杆菌的区别

4.根据生化反应，沙门菌属分为6个亚属IMVC

（四）Ag构造及分类

1.菌体（O）Ag（1）组成

就是细胞壁的脂多糖

（2）性质较稳定（3）成分根据O-Ag的组成成分不同，共有58种，用阿拉伯字母1、2、3……表示，目前已排至67，其中有9个数码被删去，故数字不是连续的。并且将具有相同成分的沙门菌都归为一群（即每群都有它共同的Ag），这样使2000种沙门菌归为A、B、C、D、E、F、I……一直至Z，在以O51～O67群表示(4）O-Ag→机体→产生IgM型AbO-Ag与O-Ab呈颗粒状凝集îíì石炭酸破坏不被酒精可达耐热、②h5.2℃，100①2.鞭毛（H）Ag（1）组成——Pr（2）性质不稳定

（3）具有鞭毛的细菌经甲醛固定后即制成H-Ag，由于H-Ag将O-Ag遮盖，故O-Ag不能再与O-Ab发生凝集（4）H-Ag→机体→产生IgG型AbH-Ag与H-Ab呈絮状凝集

（5）H-Ag分两相

同时具有两相的H-Ag叫双相菌仅有一相的H-Ag，叫单相菌

3.表面Ag目前已证实，本属细菌中的个别血清型具有Vi-Ag、M-Ag和5Ag三种表面Ag。

ïïïîïïïíì¼¼-¼¼¼¼)7(4,3,12,，70)117P,117(zz,z,z，z)(zd,c,b,a，，65321种以上目前有表示伯字母几种沙门菌共有。用阿拉第二相又叫非特异相多种目前有表见表示以后则用小写直至表示用小写特异性高第一相又叫特异相,（五）抵抗力

本属细菌在自然界中生活能力较强，仅次于大肠埃希菌，在土壤、水中可活几周~几个月，在粪便中可活较长时间。1.耐冷不耐热

2.易被一般消毒剂杀死

3.胆盐、煌绿及其他染料对沙门菌的抑制作用较其他肠道菌为小。

二、致病性和免疫性

1.侵袭力

有Vi-Ag的伤寒沙门菌比无Vi-Ag者要强得多。2.内毒素3.有些菌型尚能产生肠毒素（如鼠伤寒沙门菌），其性质类似产毒素大肠埃希菌。

（一）致病物质派伊尔淋巴结的M细胞通过两个Ⅲ型分泌系统沙门菌黏附并侵入诱导细胞膜凹陷导致细菌内吞沙门菌溶解吞噬小泡进入细胞质内繁殖细胞到细胞传播导致宿主细胞死亡1.侵袭力

繁殖输送外源性Ag到其下方的巨噬细胞沙门菌致病岛Ⅰ(SPIⅠ)沙门菌致病岛Ⅱ(SPIⅡ)沙门菌侵袭蛋白向M细胞宿主细胞内肌动纤维的重排细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织具有耐酸应答基因使细菌在胃和吞噬体的酸性环境得到保护氧化酶、超氧化物歧化酶保护细菌不被胞内杀菌因素杀伤伤寒沙门菌希氏沙门菌Vi抗原抗吞噬,阻挡抗体、补体2.内毒素沙门菌死亡后释放内毒素引起宿主KT,WBC大剂量导致中毒症状和休克激活补体替代途径产生C3a、C5a等诱发免疫细胞、分泌TNF-α、IL-1、IFN-γ等细胞因子（二）所致疾病

1.伤寒、副伤寒沙门菌－肠热症2.食物中毒（急性胃肠炎）3.败血症

炎症出血性坏死4.无症状带菌者

三、微生物学检查法

（一）细菌学检查

1.标本的采集

（1）肠热症：1血2便3检尿，要检骨髓全知道

（2）食物中毒：呕吐物、可疑食物、粪便（3）其他标本

：胆汁、脑脊液、胸腹水，应离心后沉淀，供培养用；中耳分泌物、渗出液、脓液、咽喉、阴道等可用拭子采集。注意事项：病的晚期或用药，阳性率↓

病的初期阳性率不高①采集时机②用药前③新鲜标本，立即送检（如不能立即送检应保存在冰箱、冰壶内，但不得超过2h）④血液标本应在出现症状后尽早静脉采血5ml。2.检验方法

（1）分离培养与增菌培养①增菌培养îíì孔雀绿氯化镁四硫磺酸盐一般沙门菌亚硒酸盐甲副伤寒增菌液不同沙门菌应选择不同－、：－、温度的选择伤寒－37℃其他沙门菌－40～43℃为好②

ïïîïïíìîíì--îíì麦康凯中国蓝产选择亚硫酸铋琼脂琼脂强选择种各选培养基一次一次次进行分离培养、、EMB、HE.SSA)1(h48h24~162（2）初步鉴定-主要依据是生化和血清学两个方面①菌落特点：从选择性培养基上挑选菌落是一个重要环节，稍一疏忽则易遗漏a.菌落以无色、光滑、较透明、扁平为主要特征，大小则往往不一。b.EMB-靠近大肠埃希菌者可呈深蓝色c.SSA-产生H2S者带黑心d.对可疑菌落用笔圈出（便于复查）②生化鉴定

凡可疑之每型菌落均要挑取1~2个，分别接种于KIA和MIU。

本属内细菌鉴定

先用A~F群多价O诊断血清做玻片凝集试验盐水+无效（S→R有关）盐水-多价O血清+沙门菌盐水-多价O血清-生化反应不典型－阴性生化反应典型－Vi-AgcH若H2S+葡⊕尿素-→初步考虑（3）最后鉴定①全面生化反应→îíì枸橼酸菌属沙门菌亚属Ⅰ、Ⅲ②血清学鉴定a.先用A~F群多价O血清做玻片凝集T-确定是否是在A~F群内（因95%以上沙门菌均属A~F群）b.再分别用代表6个O群的单价因子血清做玻片凝集T进行分群

c.再用鞭毛Ag确定菌种

4.鉴定依据

（1）沙门菌的鉴定主要靠

（2）血清型的确定

（3）检查过程中必须配合形态与染色检查，以排除肠球菌和其他肠道内细菌（4）也可用噬菌体鉴定

ïîïíì生化反应综合判定式相同的菌株则需借助对于型相结合综合决定其血清相和第H因子血清第血清决定定群Ag③ⅡⅠ②①O（二）血清学检查——肥达（Widal）反应

1.原理

人患伤寒、副伤寒后，一般于1~2周后在血清中出现的特异性Ab（凝集素），3、4、5周后达高峰，以后缓慢下降。根据此道理，用已知伤寒沙门菌TO、TH和副伤寒PA、PB、PC的菌液做Ag，与病人血清做凝集反应来测定病人血清中有无相应特异性抗体的定量凝集试验。根据抗体凝集价增长情况，以做伤寒、副伤寒的辅助诊断。

2.方法——实验课做。

3.结果判断必须结果临床、病期及地区而定（1）效价的地区性（2）注意病程（3）有关TH与TO变化的评价①出现速度②交叉反应或非特异性回忆反应（4）注意区别非特异性回忆反应

本菌在自然界中分布很广，主要存在于饮水、污水中。在动物中存在于家畜、家禽、鼠、鸽、蛙、蜗牛和虾蟹排泄物中。在食品（乳、乳制品、蛋、肉、冰琪淋等）常检出。猪是带菌者。经苍蝇、蚤、蟑螂、蜚蠊带菌等媒介传播，为人兽共患病原菌之一。(三)致病性

第四节其他菌属

一、克雷伯菌属（Klebsiella）

肺炎克雷伯菌菌属(K·pneumonia)

产酸（催娩）克雷伯菌

(K·oxytoca)

解尿氨酸克雷伯菌(K·ornithinolytica)植生克雷伯菌(K·planticola)土生克雷伯菌(K·terrigena)臭鼻克雷伯菌(K·ozaenae)鼻硬结克雷伯菌(K·rhinoscleromatis)

本属菌包括7个种本属细菌符合肠杆菌科一般特征。其属的共同特征为：1.G—短杆菌，无芽胞，无鞭毛有荚膜2.营养要求不高普通培养基即可生长3.生化反应较活泼（1）可发酵多种糖类葡

乳

麦

甘

蔗

其他糖醇（阿拉伯、木、棉子、海藻、阿糖醇）⊕+++++（2）触酶

氧化E脂EH2S明胶

硝酸盐

尿素V-PONPG肌醇

+－

－

－

－

+++++4.均为周围环境及人呼吸道常居菌群，为条件致病菌，目前引起感染日益增多。其代表菌为肺炎克雷伯菌。

共同特征(一)生物学性状

肺炎克雷伯菌1.形态与染色（1）G-卵圆或球杆菌，常成双排列（2）菌体外绕以宽厚的荚膜（3）无芽胞、无鞭毛、无动力、有菌毛（4）培养物菌体长，常呈多形性，有时可见丝状物2.培养特点（1）需O2或兼性厌O2（2）对营养要求不高，普通培养基即可生长（3）在普通琼脂和血平板

灰白色、圆形、光亮较大凸起,粘液状，菌落易互相融合，用接种环挑易拉成丝状的较大菌落。（4）在肠道选择培养基上呈乳糖发酵产酸的菌落，与大肠埃希菌相似但色泽较淡，较为饱满而凸起。（5）液体培养基——混浊生长、农厚，有菌膜，管底有粘液性沉淀。

35℃

24h（6）生化反应本菌IMVC－－++，其他，如丙二酸盐+（7）Ag构造

O、K两种AgK-Ag为分型依据（8）抵抗力不强

对一般消毒剂敏感对热敏感56-60℃即死对一般抗生素均敏感，但易产生抗药性

(二)临床意义

本属细菌多感染重病老人及幼儿，死亡率很高。也是医院感染的常见菌。

二、变形杆菌属（Protens）

普通变形杆菌（P.vulgaris）变形杆菌属奇异变形杆菌（P.mirabili

产粘变形杆菌（P.myxofaciens）潘纳变形杆菌（P.penneri）（一）生物学性状1.形态与染色（1）G-中小杆菌，菌端钝圆（2）无芽胞、无荚膜、周身鞭毛，运动活泼。（3）具有明显的多形性，多呈球状或丝状，在活泼运动的培养物中多为较长而弯曲的杆菌。

2.培养特点（1）需O2，或兼性厌O2。（2）营养要求不高，在普通或综合培养基上均可发育，但大部分需要菸草酸（3）有迁徒状生长现象（movinggrow）。

（4）产粘变形杆菌能形成很粘的薄膜层，且能溶血。（5）在肠道选择性培养基上可形成圆、扁、无色半透明的乳糖不发酵菌落。在SSA上-产H2S的菌株菌落带黑心（6）液体培养基—均匀混浊，液面有菌膜、管底有沉淀。3.生化反应

共同点：

4.Ag构造与分型

Ag构造与分型根据菌体（0）Ag分群根据鞭毛（H）分型每种变形杆菌都分许多血清型。产粘变形杆菌Ag结构尚未测定目前有100多个血清型这里值的提出的是：在普通变形杆菌与奇异变形杆菌二类中还有些特殊的菌株OX19、OX2、OXK与某些立克次体有共同抗原成分，故可代替立克次体作为抗原与某些立克次体病患者血清作凝集反应，以辅助诊断某些立克次体病，此称为外-斐（Weill-f