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高考

生物山东省专用专题26基因工程与生物技术的安全性和伦理问题实践探究应用口蹄疫病毒VP1基因在胡萝卜中的表达情境材料口蹄疫由口蹄疫病毒(FMDV)引起,该病毒属于小RNA病毒科、口蹄疫病毒属。口蹄疫病毒VP1基因是参与构成病毒粒子的主要中和抗原基因,其表达蛋白可以诱导动物机体产生中和抗体。科学家们将VP1基因转入拟南芥、马铃薯、烟草和苜蓿中,用转基因植物抽提物腹腔注射或采用高表达株饲喂实验动物,均引起了动物产生抗口蹄疫病毒的特异性免疫反应,这些研究成果极大地促进了口蹄疫疫苗的研究。但由于转化受体主要集中在一些模式植物,而烟草的毒性、马铃薯块茎难以生食等因素限制了生产的转基因植物疫苗直接用于口服。胡萝卜种植广泛,易于组织培养和转化,且可以生食,是生产口服疫苗的理想“生物反应器”。因此以胡萝卜为转化受体,研究FMDV的VP1基因在转基因胡萝卜中的表达情况,为进一步研究利用转基因植物生产口服疫苗提供了一条新途径。探究问题(1)构建基因表达载体的目的是什么?(2)将VP1基因转入胡萝卜细胞可用农杆菌转化法,其原理是什么?(3)一般来说,切割目的基因或载体为何使用两种不同的限制酶?要点点拨

(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一

代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。(2)农杆菌细胞内含Ti质粒,当它侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA

(可转移的DNA)转移至被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的染色体

DNA上,利用这一特点,可将目的基因转入胡萝卜细胞中。(3)防止切割后的载体或目的基因发生自身环化,使目的基因与载体正确

连接。拓展思维(1)1944年,艾弗里等人的肺炎链球菌转化实验可以说是基因

工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么

启示是什么?【提示】证明了DNA是遗传物质,也证明了DNA可以在同种生物的不

同个体之间转移。(2)1972年,伯格首先在体外进行了DNA改造的研究,成功构建了第一个体

外重组DNA分子,如果说他的工作为基因工程理论的建立提供了

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