抗原抗体反应的类型之凝集反应（免疫学检验技术课件）

间接凝集反应免疫学检验技术教学培训课件—*—间接凝集反应Ag颗粒性Ab+Ag-Ab（凝集）电解质？电解质电解质—*—间接凝集反应直接间接（1）改造（2）反应反应—*—间接凝集反应凝集反应直接凝集反应间接凝集反应正向间接凝集试验反向间接凝集试验<不改造><改造><改造Ag><改造Ab>载体类型红细胞聚苯乙烯胶乳颗粒炭粒金黄色葡萄球菌（含A蛋白）—*—间接凝集反应（1）改造Ag（试剂）（2）反应已知抗原载体抗原致敏载体抗原致敏载体待测抗体抗原抗体复合物（凝集）正向间接凝集试验（改抗原→测抗体）可溶性抗原（Ag）致敏载体，检测标本中未知抗体（Ab）凝集→待测抗体阳性；无凝集→待测抗体阴性—*—间接凝集反应反向间接凝集试验（改抗体→测抗原）抗体（Ab）致敏载体，检测标本中未知可溶性抗原（Ag）（1）改造Ab（试剂）（2）反应已知抗体载体抗体致敏载体抗体致敏载体待测抗原抗原抗体复合物（凝集）凝集→待测抗原阳性；无凝集→待测抗原阴性—*—类风湿因子（RF）是抗自身变性IgG的自身抗体。应用举例测定血清中类风湿因子（RF）是阴性还是阳性？待测血清思路分析R间接凝集反应目标：RF是抗体（未知）变性IgG载体颗粒性抗原（已知试剂）颗粒性抗原（已知试剂）待测血清凝集现象？胶乳颗粒结果：凝集→阳性；无凝集→阴性正向间接凝集试验微视频：类风湿因子（RF）检测（胶乳凝集法）—*—间接凝集反应间接凝集抑制试验用抗原致敏载体和相应的抗体作为诊断试剂，检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原的方法凝集→待测抗原阴性；无凝集→待测抗原阳性—*—间接凝集反应试剂已知抗体抗原致敏载体标本待测抗原（1）已知抗体与待测抗原反应（2）反应液中加入抗原致敏载体待测抗原已知抗体抗原抗体复合物无凝集抗原致敏载体抗原抗体复合物—*—提问下列方法中，哪两种是测抗原的？两种测抗原的方法中，哪一种灵敏度高？待测抗原选项RF间接凝集反应A：正向间接凝集试验B：反向间接凝集试验C：间接凝集抑制试验—*—间接凝集反应反向间接凝集试验（测抗原）抗体致敏载体待测抗原抗原抗体复合物（凝集）—*—间接凝集反应反向间接凝集试验抗体致敏载体待测抗原无凝集待测抗原间接凝集抑制试验待测抗原已知抗体抗原抗体复合物无凝集抗原致敏载体阳性阴性—*—间接凝集反应协同凝集试验（测抗原）IgG类抗体与葡萄球菌A蛋白结合，形成抗体致敏载体颗粒，检测标本中的待测抗原凝集→待测抗原阳性；无凝集→待测抗原阴性已知抗体凝集抗体致敏载体金葡（含A蛋白）待测抗原抗球蛋白试验免疫学检验教学培训课件—*—案例不完全抗体leRF抗球蛋白试验一名Rh（D）-孕妇今做了第一胎流产手术，胎儿为Rh（D）+，胎儿含D抗原的红细胞进入母体内，刺激母体产生抗DIgG类不完全抗体。机体在某些抗原刺激下产生的大小为7S的IgG类抗体，此抗体能与相应抗原牢固结合，但在一般条件下不出现凝集现象。—*—抗球蛋白试验（Coombs试验）Coombs利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接结合在红细胞表面抗原的不完全抗体，使红细胞发生凝集。抗球蛋白试验Coombs（Coombstest）（1945）分类：直接抗球蛋白试验（直接Coombs试验）间接抗球蛋白试验（间接Coombs试验）应用：新生儿溶血症检测等。—*—胎儿红细胞D抗原刺激母体免疫系统抗D（IgG）（不完全抗体）免疫动物抗球蛋白抗体（二抗）抗原-抗体（无凝集）抗原-抗体-二抗（凝集）抗球蛋白试验—*—案例选项RFA：直接抗球蛋白试验B：间接抗球蛋白试验该Rh（D）-孕妇今产下第二胎，新生儿为Rh（D）+，新生儿发生溶血症，怎样确定新生儿的红细胞上有无不完全抗体？其母亲的血清中有无不完全抗体？抗球蛋白试验—*—试剂已知二抗标本新生儿红细胞？抗球蛋白试验直接抗球蛋白试验（直接Coombs试验）检测结合在红细胞表面的不完全抗体的方法—*—抗原-抗体（无凝集）抗原-抗体-二抗（凝集）已知抗体抗球蛋白试验—*—试剂标本抗球蛋白试验间接抗球蛋白试验（间接Coombs试验）检测血清中游离不完全抗体的方法母亲血清？已知抗体已知RBC（含D）—*—抗原-抗体抗原-抗体-二抗（凝集）已知二抗抗球蛋白试验已知RBC（含D）待测抗D（IgG）（不完全抗体）抗原-抗体—*—冷凝集试验此试验是用于检测血清中冷凝集素的方法，冷凝集素是冷反应型抗红细胞抗体，在0-4℃是容易和红细胞膜表面抗原结合，具有较强的凝集红细胞的作用，属于IgM型抗体，可存在于正常人血清中，但效价比较低。抗球蛋白试验凝集反应免疫学检验技术教学培训课件—*—凝集反应的概念和分类颗粒抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体特异性结合，或可溶性抗原（或抗体）致敏载体颗粒（如红细胞、聚苯乙烯胶乳颗粒、炭粒等）形成的颗粒状物质与相应抗体（或抗原）特异性结合，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。凝集反应概念—*—凝集反应的概念和分类Ag颗粒性Ab+Ag-Ab（凝集）电解质电解质—*—凝集反应的概念和分类颗粒性抗原类型红细胞金黄色葡萄球菌—*—凝集反应的概念和分类Widal（肥达反应）(1896)Landsteiner（ABO血型）（1900）—*—凝集反应的概念和分类Ag颗粒性Ab+Ag-Ab（凝集）电解质？电解质电解质—*—凝集反应的概念和分类直接间接（1）改造（2）反应反应—*—凝集反应的概念和分类已知抗体载体抗体致敏载体抗体致敏载体待测抗原抗原抗体复合物（凝集）（1）改造（2）反应—*—凝集反应的概念和分类凝集反应直接凝集反应间接凝集反应正向间接凝集试验反向间接凝集试验<不改造><改造><改造Ag><改造Ab>—*—凝集反应的概念和分类检测结果定性半定量定量备注：定性：常用“阴性”或“阳性”，“有”或“无”判断结果。半定量：常以滴度或效价表示。定量：有准确的量值（数字和单位）。直接凝集反应免疫学检验技术教学培训课件—*—直接凝集反应电解质Ag颗粒性Ab+Ag-Ab（凝集）电解质—*—直接凝集反应颗粒性抗原类型红细胞金黄色葡萄球菌在适当电解质参与下，颗粒抗原（细菌、螺旋体、红细胞、白细胞和血小板等）可直接与相应抗体特异性结合出现肉眼可见的凝集现象。直接凝集反应—*—直接凝集反应直接凝集反应玻片法试管法血型鉴定微孔板法效价测定柱凝集法直接凝集反应类型—*—应用举例简述血型鉴定的原理和结果判断方法。（玻片法）待测RBC直接凝集反应思路分析R目标：红细胞表面抗原（未知颗粒性抗原）颗粒性抗原（未知）已知抗体（试剂）凝集现象？结果：凝集→阳性；无凝集→阴性—*—直接凝集反应微视频：ABO、Rh血型鉴定正定型（玻片法）动画：血型鉴定的原理和结果判断—*—应用举例什么是效价？怎样测定？结果判断方法？（试管法）待测血清直接凝集反应思路分析R效价：又称滴度，是指抗体（或抗原）与一定量的对应物产生可见反应的最小量，一般以抗体（或抗原）仍能与对应物呈现可见反应的最高稀释度表示。结果：凝集2+的血清最高稀释度可见反应：明显凝集（2+）倍比稀释：1：2、1：4、