ch黄酮类化合物

ch黄酮类化合物第1页/共128页2黄酮类化合物概述黄酮类化合物是一类重要的含氧杂环天然有机化合物。分布广泛：高等植物中常见存在形式：苷元、苷活性多样：抗氧化、心血管、保护肝脏、抗炎、抗癌、雌激素作用等第2页/共128页3第十一章黄酮类化合物概述1黄酮类化合物的结构和分类2黄酮类化合物的理化性质3黄酮类化合物的提取和分离4黄酮类化合物的检识和结构鉴定5第3页/共128页4黄酮类化合物的结构和分类母核：9(8a)10(4a)结构特征第4页/共128页5生物合成基本途径第5页/共128页6黄酮类化合物的结构和分类a.中央三碳链的氧化程度b.B-环联接位置（2-或3-位）c.三碳链是否构成环状分类标准第6页/共128页7黄酮类化合物的结构和分类木犀草素，抗菌作用黄芩苷，清热解毒槲皮素：R=H芦丁：R=芸香糖最常见的黄酮醇类化合物

黄酮类flavones

黄酮醇类flavonols黄酮黄酮醇第7页/共128页8黄酮类化合物的结构和分类

二氢黄酮类

flavanones二氢黄酮醇类flavanonols橙皮苷Vpp样作用

甘草素对溃疡有抑制作用

水飞蓟素保肝作用二氢黄酮二氢黄酮醇第8页/共128页9黄酮类化合物的结构和分类

异黄酮类

isoflavones二氢异黄酮类isoflavanones大豆异黄酮

鱼鳞酮农业杀虫剂异黄酮二氢异黄酮第9页/共128页10大豆异黄酮进入20世纪90年代，国内外的生物学家、化学家、医学家被一种神奇的物质所吸引，这存在于大豆中的神奇物质被称作“大豆异黄酮”。流行病学资料表明，长期食用大豆的东南亚人群中，癌症、动脉粥样硬化等心血管病症的发病率明显低于西方。在日本，乳腺癌的发病率是美国的1/4；妇女更年期综合症的发病率只有美国的1/3；这个现象已引起科学家的注意。经研究发现，大豆中含有一种结构与雌激素相似的物质叫异黄酮，它是大豆中的一种非营养成份，具有生理活性，能产生类似雌激素的效应，而被称之为“植物雌激素”。对身体雌激素的双向调节作用。当人体内雌激素水平低时，大豆异黄酮占据雌激素受体，发挥弱雌激素效应，表现出提高雌激素水平的作用。当人体内雌激素水平高时，大豆异黄酮以“竞争”方式占据受体位置，同样发挥弱雌激素效应，但由于它的活性仅为体内雌激素的2%，因而从总体上表现出降低体内雌激素水平的作用，这就是著名的大豆异黄酮对雌激素的双向调节作用机制。第10页/共128页11大豆异黄酮对身体雌激素的双向调节作用抗癌作用降低胆固醇，预防动脉硬化改善骨质疏松预防冠心病美国的食品药物管理局（FDA）把大豆列为能够“真正降低心脏病危险的食品”之一

第11页/共128页12大豆异黄酮~12Å植物雌激素雌二醇~12Å第12页/共128页13黄酮类化合物的结构和分类

查耳酮类chalcones

橙酮类aurones红花的颜色变化较少见黄花波斯菊花：硫黄菊素查耳酮橙酮第13页/共128页14黄酮类化合物的结构和分类花色素类anthocyanidins

黄烷醇类矢车菊素：R1=OH,R2=H飞燕草素：R1=R2=OH天竺葵素：R1=R2=H锦葵花素：R1=R2=OCH3黄烷-3-醇R=H黄烷-3,4-二醇R=OH儿茶素：抗癌活性麻黄宁A/B：抗癌活性花色素黄烷醇第14页/共128页15黄酮类化合物的结构和分类苯骈色原酮类xanthones

苯色原酮类异芒果苷：止咳祛痰芒果叶和知母叶

呋喃色原酮类凯林khellin红镰枚素：R1=CH3,R2=H去甲红镰枚素：R1=R2=H红镰枚素-6-β-龙胆双糖苷：

R1=CH3,R2=龙胆双糖基其他黄酮类第15页/共128页16黄酮类化合物的结构和分类黄酮苷元取代基：OH，OMe，Me，异戊烯基等黄酮苷氧苷和碳苷存在形式第16页/共128页17黄酮类化合物的结构和分类取代基：-OH,-OMe,-Me,以及各种糖等取代基取代位置规律取代基A环B环-OH,-OMe5,7位3’,4’位-Me,6,8位3’位第17页/共128页18黄酮类化合物的结构和分类天然黄酮类化合物多以苷类形式存在。由于糖

的种类、数量、联接位置及联接方式不同，组成各种各样的黄酮苷。组成苷类的糖有：

单糖：D-glc、D-gal、D-xyl、L-rha、L-ara、

D-glucuronicacid

双糖：槐糖（glcβ1-2glc),芸香糖（rhaα1-6glc)等。

三糖：龙胆三糖（glcβ1-6glcβ1–2fru)

槐三糖（glcβ1-2glcβ1-2glc)黄酮苷第18页/共128页19氧苷碳苷

黄酮异黄酮黄酮苷黄酮类化合物的结构和分类第19页/共128页20黄酮类化合物的生理活性（一）对心血管系统的作用

1、降低血管脆性及异常的通透性芦丁、橙皮苷

2、扩冠作用如：槲皮素、葛根素

3、降低血脂及胆固醇的作用（二）有抗肝脏毒活性如：水飞蓟素、儿茶素（三）抗炎作用如：芦丁、羟乙基芦丁、

橙皮苷-甲基查尔酮（四）雌激素样作用如：染料木素、大豆素等第20页/共128页21黄酮类化合物的生理活性（五）抗菌作用如：木犀草素、黄芩素、黄芩苷（六）抗病毒作用如：槲皮素、山柰酚等（七）泻下作用如：营实苷A（八）解痉作用如：异甘草素、大豆素等（九）其它作用止咳、祛痰、平喘等作用第21页/共128页22第十一章黄酮类化合物概述1黄酮类化合物的结构和分类2黄酮类化合物的理化性质3黄酮类化合物的提取和分离4黄酮类化合物的检识和结构鉴定5第22页/共128页23黄酮类化合物的理化性质形态：黄酮类化合物多为晶性固体，少数为无定形粉末。颜色：

黄酮（醇）及其苷：显灰黄--黄色。若7-及4’-位引入-OH和–OCH3等，颜色加深。

查尔酮：显黄--橙黄色。

二氢黄酮（醇）及异黄酮：不显色或显微黄色。

花色苷及苷元：颜色随pH不同而变化：

pH<7显红色；pH=8.5显紫色；pH>8.5显兰色。性状第23页/共128页24黄酮类化合物的理化性质

游离苷元：

二氢黄酮（醇）、黄烷（醇）有旋光性其余黄酮类化合物无旋光性。

苷类：

因为糖分子的引入，具有旋光性，且多为左旋。旋光性第24页/共128页25黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的溶解行为与其结构及存在状态有很大的关系。苷元：

难溶或不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂。苷：

可溶于水、乙醇、甲醇中，难溶于苯和氯仿水溶度：

苷元＜苷，连糖越多，水溶度越大

溶解性第25页/共128页26黄酮类化合物的理化性质取代基对溶解度的影响：羟基数目越多，水中溶解度增加；羟基甲基化后，在有机溶剂中溶解度增加。黄酮（醇），查耳酮平面型分子

二氢黄酮（醇）非平面型分子花色素离子水溶性增大溶解性第26页/共128页27黄酮类化合物的理化性质酸性：酚羟基可溶于碱水、吡啶、ＤＭＦ中酸性强弱取决于羟基数目和位置7、4’－二OH>7－或4’－OH>一般酚OH>5－OH>3－OH应用:

提取、分离和鉴定中酸性第27页/共128页28黄酮类化合物的理化性质

由于黄酮类化合物分子中γ-吡喃酮环上的1-位氧原子，有未共用的电子对，表现出微弱碱性，与强无机酸生成盐。碱性第28页/共128页29黄酮类化合物的理化性质

还原反应与金属盐类试剂的络合反应硼酸显色反应碱性试剂显色反应显色反应第29页/共128页30黄酮类化合物的理化性质HCl-Mg反应含黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）

（+）橙红色-紫红色查耳酮、橙酮、黄烷（醇）类（-）不显色操作方法：1ml样品+Mg粉+几滴浓HCl花色素及部分橙酮、查耳酮在浓盐酸中会变色，故需做对照

还原反应HCl-Mg反应第30页/共128页31黄酮类化合物的理化性质HCl-Zn反应

二氢黄酮醇、黄酮醇-3-O-糖苷（+）红~紫色

四氢硼钠（钾）反应二氢黄酮类化合物的专属性还原剂（+）紫-紫红色

还原反应第31页/共128页32黄酮类化合物的理化性质铝盐：1%AlCl3或Al（NO2）3

黄色定性、定量铅盐：1%醋酸铅或碱式醋酸铅黄~红色沉淀锆盐：2%ZrOCl2的甲醇溶液黄色游离的3，5-羟基锆-枸橼酸反应黄绿色荧光络合反应第32页/共128页33黄酮类化合物的理化性质镁盐：二氢黄酮（醇）类天蓝色

5-酚羟基色泽更明显氯化锶：氨性甲醇溶液

具有邻二酚羟基绿色~棕色~黑色沉淀三氯化铁：酚类显色剂三氯化铁-铁氰化钾络合反应第33页/共128页34黄酮类化合物的理化性质样品

硼酸草酸枸橼酸黄色并有绿色荧光黄色，无荧光丙酮硼酸显色反应第34页/共128页35黄酮类化合物的理化性质碱：氨蒸汽可逆；碳酸钠水溶液不可逆二氢黄酮类开环橙色~黄色黄酮醇类黄色~棕色（通入空气）其他黄酮无次反应含有邻二羟基或3,4’-二羟基取代的黄酮类不稳定易氧化黄色~深红色~绿棕色碱性试剂显色反应第35页/共128页36练习一芦丁的显色反应HCl-Mg反应(+)黄酮醇HCl-Zn反应(+)黄酮醇-3-O-糖苷NaBH4反应(-)非二氢黄酮类锆-枸橼酸反应(+)游离的5-羟基加枸橼酸褪色SrCl2反应(+)邻二酚羟基硼酸+草酸反应(+)5-羟基黄酮Molish反应(+)苷第36页/共128页37练习二----鉴别(化学方法)ABCD第37页/共128页38第十一章黄酮类化合物概述1黄酮类化合物的结构和分类2黄酮类化合物的理化性质3黄酮类化合物的提取和分离4黄酮类化合物的检识和结构鉴定5第38页/共128页39黄酮类化合物的提取和分离原理：黄酮类化合物的溶解性和酸性

相似相溶与酸碱理论提取：苷元：极性小的溶剂，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等回流提取苷及极性大的苷元：

用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加热提取极性稍大的甙元一般指：羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查尔酮多糖苷类：一般用沸水提取

提取第39页/共128页40黄酮类化合物的提取和分离溶剂萃取法（系统分离法）碱提酸沉法炭粉吸附法

粗分第40页/共128页41黄酮类化合物的提取和分离药材水或醇-水，加热提取提取液浓缩，加3-4倍醇醇水液沉淀（水杂）浓缩，回收醇，加水水液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取石油醚层氯仿层乙酸乙酯层正丁醇层水层叶绿素等脂溶性成分黄酮苷元大极性苷元小极性的苷黄酮苷多糖蛋白质原理：利用黄酮类与其它杂质极性不同，选不同溶剂进行萃取溶剂萃取法第41页/共128页42黄酮类化合物的提取和分离原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出碱：常用Ca(OH)2，即石灰乳(石灰水)优点

A：使含酚羟基化合物成盐溶解

B：使含羧基杂质（果胶、粘液质、蛋白质等）形成沉淀注意

a：提取时，碱液浓度不宜过高。

b：加酸酸化时，酸性也不宜过强。应用：芦丁和槲皮素的提取、分离和鉴定碱提酸沉法第42页/共128页43黄酮类化合物的提取和分离原理：活性炭吸附黄酮苷类化合物用途：主要用于含量较高的黄酮苷类的精制操作：植物的甲醇提取物中，分次加入活性炭，搅拌，静置，定性检查上清液无黄酮反应时为止。过滤，收集活性炭，依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、

15%酚/醇溶剂进行梯度洗脱，对各部分洗脱液进行定性检查。大部分黄酮苷类可以用7%酚/水洗下。活性炭吸附法第43页/共128页44黄酮类化合物的提取和分离

极性氢键分子大小（量）酸性特殊结构硅胶聚酰胺凝胶梯度pH萃取法金属盐络合法柱色谱法分离方法第44页/共128页45黄酮类化合物的提取和分离硅胶是一种高活性吸附材料，其化学分子式为mSiO2·nH2O

应用范围：主要分离小极性和中等极性的化合物，应用最为广泛。异黄酮、二氢黄酮（醇）、高度甲基化（乙酰化）的黄、酮及黄酮醇多羟基黄酮、黄酮醇及其苷类：硅胶加水去活化吸附规律：

极性大吸附能力强eg：

A苷元B二糖苷C单糖苷

Rf：A>C>B硅胶柱色谱第45页/共128页46黄酮类化合物的提取和分离原理：氢键吸附（作用）洗脱规律：（先—后）母核上羟基增加，洗脱顺序递减羟基数目相同时，有缔合羟基>无缔合羟基苷元相同：三糖苷>双糖苷>单糖苷>苷元

不同类型黄酮类化合物的洗脱先后顺序为：

异黄酮＞二氢黄酮醇＞黄酮＞黄酮醇。分子中芳香程度高、共轭双键多，则聚酰胺对其的吸附力强，故难于洗脱。应用范围：适合各种类型的黄酮类化合物，包括苷、苷元、查耳酮及二氢黄酮聚酰胺柱色谱第46页/共128页47聚酰胺“双重色谱”原理

正相色谱反相色谱苷与苷元聚酰胺色谱聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团）非极性固定相（非极性脂肪链）洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小）含水溶剂（甲醇-水，极性大）先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小）苷（极性大）（柱色谱分离）

Rf值：苷元>苷苷元<苷（TLC色谱鉴别）第47页/共128页48正相与反相层析硅胶固定相（硅醇）极性>流动相（醇）极性时为正相聚酰胺固定相（聚酰胺脂肪链）极性<流动相（醇水）极性时为反相槲皮素对照品槲皮素芦丁芦丁对照品槲皮素对照品槲皮素芦丁芦丁对照品聚酰胺TLC硅胶TLC第48页/共128页49黄酮类化合物的提取和分离常用型号：Sephadex-G和Sephadex-LH20原理：吸附作用和分子筛对游离黄酮，主要是吸附作用,吸附程度取决于游离酚羟基的数目，苷元的羟基数目越多，越难洗脱。对黄酮苷，主要是分子筛原理,洗脱时按分子量由大到小先后洗脱下来。常用洗脱剂：碱性水溶液（0.1mol/LNH4OH），盐水溶液(0.05mol/LNaCl)

醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水，乙醇等。其它溶剂：含水丙酮、甲醇-氯仿(凝胶会膨胀，体积变大)。葡聚糖凝胶柱色谱第49页/共128页50黄酮类化合物在Sephadex-LH20(甲醇)上的Ve/Vo黄酮类化合物取代情况Ve/Vo芹菜素5,7,4’－三OH5.3木犀草素5,7,3’,4’－四OH6.3槲皮素3,5,7,3’,4’－五OH8.3杨梅素3,5,7,3’,4’,5’－六OH9.2山奈酚-3-半乳糖鼠李糖-7-鼠李糖苷三糖苷3.3槲皮素-3-芸香糖苷双糖苷4.0槲皮素-3-鼠李糖苷单糖苷4.9第50页/共128页51黄酮类化合物的提取和分离规律：苷元的羟基数越多，Ve/Vo越大，越难以洗脱。

吸附作用苷的分子量越大,其上联结糖的数目越多,Ve/Vo越小,容易洗脱。

分子筛原理苷比苷元先洗脱。葡聚糖凝胶柱色谱第51页/共128页52黄酮类化合物的提取和分离原理：黄酮类化合物具有酸性、且不同数目和不同位置的酚羟基的酸性强弱不同适用范围：适用于分离酸性强弱不同的黄酮苷元酸性：7,4′-OH＞7-或4′-OH

＞一般酚OH＞5-OH溶于5%NaHCO3溶于5%NaCO3溶于不同浓度NaOH梯度pH萃取法第52页/共128页53黄酮类化合物的提取和分离乙醚液（脂杂）乙醚液乙醚液乙醚液乙醚液碱液(3或5-OH黄酮)碱液(一般酚OH黄酮)碱液(7,4’-二OH黄酮)碱液(7或4’-OH黄酮)5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH梯度pH萃取法第53页/共128页54黄酮类化合物的提取和分离原理：利用分子中某些特定官能团性质进行分离具有邻二酚羟基的成分，用醋酸铅沉淀不具有邻二酚羟基的成分，用碱式醋酸铅沉淀

具有邻二酚羟基的黄酮类化合物还可以与硼酸反应形成溶于水的硼酸络合物，可以与不具有邻二酚羟基的其它黄酮类化合物分离金属盐络合法第54页/共128页55从柠檬果皮中分离降血压有效成分目的：使要得到的化合物溶解，而使蛋白质、黏液质等大极性成分形成沉淀除去水提醇沉法提取分离实例1第55页/共128页56从柠檬果皮中分离降血压有效成分溶剂萃取法铅盐沉淀法凝胶色谱法硅胶色谱法目的：除去Pb，生成PbCO3

提取分离实例1第56页/共128页57提取分离实例1从柠檬果皮中分离降血压有效成分第57页/共128页58提取分离实例1从柠檬果皮中分离降血压有效成分第58页/共128页59满山红化学成分的提取分离提取分离实例2第59页/共128页60去除鞣质等减少杂质满山红化学成分的提取分离提取分离实例2第60页/共128页61第十一章黄酮类化合物概述1黄酮类化合物的结构和分类2黄酮类化合物的理化性质3黄酮类化合物的提取和分离4黄酮类化合物的检识和结构鉴定5第61页/共128页62黄酮类化合物的检识和结构鉴定

一色谱法的应用

二紫外光谱

三1H-NMR

四13C-NMR

五质谱第62页/共128页63黄酮类化合物的检识颜色：多呈黄色母核检识：盐酸-镁粉反应黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇

四氢硼钠反应二氢黄酮（醇）类取代基团检识：锆盐-枸橼酸反应

3-OH、5-OH黄酮鉴别氨性氯化锶反应邻二酚羟基色谱检识:

硅胶TLC聚酰胺TLC纸层析（PC）理化检识第63页/共128页64黄酮类化合物的检识和结构鉴定硅胶TLC：

用于分析与鉴定弱极性黄酮类化合物。展开剂：甲苯-甲酸甲酯-甲酸(5:4:1)，苯-甲醇，氯仿-甲醇等。聚酰胺TLC：

适合于含游离酚OH的黄酮及其苷类的分析。

聚酰胺对黄酮类化合物吸附能力强，大多数展开剂中含有醇、酸或水。纸色谱（PC）：适用于各种黄酮类化合物及其苷类的分析色谱法第64页/共128页65黄酮类化合物的检识和结构鉴定第一相展开采用醇性展开剂如:BAWn-BuOH:HOAc:H2O=4:1:5上层

TBAt-BuOH:HOAc:H2O=3:1:1

水饱和n-BuOH层析行为:Rf值:苷元>单糖苷>双糖苷一般:苷元在0.70以上，而苷则小于0.7。分配作用第二相展开采用水性展开剂

如：2~6%HOAc水溶液

3%NaCl水溶液

HOAc:浓HCl:H2O=30:3:10层析行为:连接糖链越长,Rf

越大(>0.5);

苷元Rf较小，有的留在原点。吸附作用ABCDABCD苷元苷元纸色谱第65页/共128页66双向PC

第I向醇性展开剂第II向水性展开剂（BAW、TBA、水饱和正丁醇）（2~8%HAc、3%NaCl、1%HCl）

正相色谱

反相色谱固定相（水）极性>流动相（**有认为是吸附原理）？？

Rf规律：极性小的化合物Rf大极性大的化合物Rf大

苷元（0.7以上）>单糖苷>双糖苷（0.7以下）苷元中，平面型分子>非平面型分子Rf规律与左边相反母核相同，2-OH>3-OH>4-OH>5-OH黄酮

苷元的分离鉴别黄酮苷及花色素类第66页/共128页67黄酮类化合物的检识和结构鉴定纸层析（PC）：采用双向纸层析。

苷元:

平面型分子:

黄酮(醇)、查耳酮的Rf小,几乎留在

原点不动(Rf<0.02);

非平面型分子:

二氢黄酮(醇)、二氢查耳酮的Rf大,

因亲水性较强(Rf0.10-0.30)。

层析检查方法：

①观察荧光,用紫外光灯照射看到有色斑点，NH3处理

产生明显的色变。

②用2%AlCl3甲醇液喷雾,UV灯下呈亮黄色荧光斑点。纸色谱第67页/共128页68黄酮类化合物结构鉴定一般步骤：

1待测样品在甲醇中的UV光谱

2待测样品在甲醇中加入各种诊断试剂后的UV光谱

诊断试剂：NaOCH3,NaOAc,NaOAc/H3BO3,AlCl3,AlCl3/HCl3苷类水解后的UV光谱。UV第68页/共128页69黄酮类化合物的结构鉴定苯甲酰基带II：220~280nm桂皮酰基带I：300~400nmUV第69页/共128页70两者UV光谱图形相似，但带I位置不同。整个母核上氧取代程度越高，则带I将向长波方向位移（红移）。

不同类型黄酮的UV基本特征a.b.黄酮黄酮醇第70页/共128页71带II吸收峰为主峰，

带I很弱，常在主峰的长波方向有一肩峰。c.

d.不同类型黄酮的UV基本特征245-270nm270-295nm异黄酮、二氢黄酮二氢黄酮醇第71页/共128页72共同特征是带I很强，为主峰而带II则较弱，为次强峰。带I的位置不同。e.f.不同类型黄酮的UV基本特征查耳酮橙酮类第72页/共128页73不同类型黄酮的UV基本特征峰形带II（240~285nm，苯甲酰系统）带I（300~400nm，桂皮酰系统）类型取代240-285304-350黄酮类OH取代可以使相应的带I或II红移，Ｂ环具有３’,4’羟基，带II为双峰328-385黄酮醇类（3-OR）352-385黄酮醇类（3-OH）245-270300-400异黄酮类B环OH和OMe对带I影响不大270-295二氢黄酮220-270340-390查尔酮类2’-OH使带I红移370-430橙酮类带I有3-4个小峰第73页/共128页74诊断试剂在结构测定中的应用常用的诊断试剂：甲醇钠(NaOCH3)

醋酸钠(NaOCOCH3)

醋酸钠/硼酸(NaOCOCH3/H3BO3)

三氯化铝(AlCl3)

三氯化铝/盐酸(AlCl3/HCl)第74页/共128页75诊断试剂在结构测定中的应用1.NaOMe：碱性强，酚OH易形成钠盐。PhOHPhO-Na+，从而增加电子云密度和流动性红移。2.NaOAc：

未熔融:碱性较弱，只能使黄酮母核上酸性较强的酚OH解离而使UV谱红移。

熔融：碱性,表现出与NaOMe类似的效果。第75页/共128页76诊断试剂在结构测定中的应用3.NaOAc/H3BO3：用于鉴定邻二酚OH。在醋酸钠碱性下，邻二酚OH与硼酸络合，引起峰带红移。第76页/共128页77诊断试剂在结构测定中的应用4.AlCl35.AlCl3/HCl：

分子中有3-OH，5-OH，邻二酚OH时，可与Al3+络合，引起吸收峰红移。铝络合物稳定性：

黄酮醇3-OH＞黄酮5-OH＞二氢黄酮5-OH＞邻二酚OH＞二氢黄酮醇3-OH第77页/共128页78诊断试剂对黄酮类化合物UV谱图的影响及结构的关系诊断试剂带II带I归属NaOCH3红移40-60nm,强度不降示有4’-OH红移50-60nm,强度下降示有3-OH,

但无4’-OH吸收谱随时间延长而衰退示有对碱敏感的取代方式NaOAc（未熔融）红移5-20nm在长波一侧有明显肩峰示有7-OH示有4’-OH，但无3或7-OHNaOAc（熔融）红移40-65nm强度下降示有4’-OH吸收谱随时间延长而衰退示有对碱敏感的取代方式第78页/共128页79诊断试剂带II带I归属NaOAc/H3BO3红移5-10nm示A环有邻二酚羟基，但不包括5,6-二羟基红移12-30nm示B环有邻二酚羟基AlCl3及AlCl3/HClAlCl3/HCl谱图

=AlCl3谱图

示结构中无邻二酚羟基AlCl3/HCl谱图

≠AlCl3谱图

示结构中可能有邻二酚羟基带I或Ia紫移30-40nm示B环有邻二酚羟基带I或Ia紫移50-65nm示A、B环上均有邻二酚羟基AlCl3/HCl谱图

=CH3OH谱图

示无3-或5-OHAlCl3/HCl谱图

≠CH3OH谱图

示可能有3-或5-OH带I红移35-55nm示只有5-OH带I红移60nm示只有3-OH带I红移50-60nm示可能同时有3-和5-OH带I红移17-20nm除5-OH外，还有6-含氧取代诊断试剂对黄酮类化合物UV谱图的影响及结构的关系第79页/共128页80练习----芦丁的UV光谱CH3OHNaOCH3AlCl3AlCl3/HClNaOCOCH3NaOCOCH3/H3BO3259,266sh,299sh,359272,327,410275,303sh,433271,300,364sh,402271,325,393262,298,387第80页/共128页81练习----由UV光谱推断结构CH3OHNaOCH3AlCl3AlCl3/HClCH3OHNaOCOCH3NaOCOCH3/H3BO3259,266sh,299sh,359272,327,410275,303sh,433271,300,364sh,402259,266sh,299sh,359271,325,393262,298,387红移51nm有4’-OH紫移31nm示B环有邻二酚羟基红移43nm只有5-OH红移12nm有7-OH红移28nm示B环有邻二酚羟基第81页/共128页82氢核磁共振在黄酮类结构分析中的应用常用溶剂:CDCl3、DMSO-d6、C5H5N;当用DMSO-d6

时:

5-OH:δ12.40;7-OH:δ10.93;3-OH:δ9.70。加入D2O交换后，OH信号消失。第82页/共128页83氢核磁共振基础知识（一）第83页/共128页84氢核磁共振基础知识（二）102345678910111213C3CH

C2CH2

C-CH3环烷烃0.2—1.5CH2ArCH2NR2CH2S

CCH

CH2C=OCH2=CH-CH31.7—3CH2F

CH2Cl

CH2Br

CH2ICH2OCH2NO22—4.70.5(1)—5.56—8.510.5—12CHCl3

(7.27)4.6—5.99—10OH

NH2

NHCR2=CH-RRCOOHRCHO常用溶剂的质子的化学位移值D特征质子化学位移第84页/共128页01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemicalshift(d,ppm)Cl2CHCH34lines;quartet2lines;doubletCH3CH核磁共振基础知识（三）第85页/共128页01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemicalshift(d,ppm)BrCH2CH34lines;quartet3lines;tripletCH3CH2核磁共振基础知识（四）第86页/共128页01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemicalshift(d,ppm)BrCH(CH3)27lines;septet2lines;doubletCH3CH核磁共振基础知识（五）第87页/共128页01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemicalshift(d,ppm)OCH3HHHHClOCH3核磁共振基础知识（六）第88页/共128页HHO2NHdoubletofdoubletsdoubletdoublet核磁共振基础知识（七）第89页/共128页01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemicalshift(d,ppm)ClCH2CH3ClCH2CH2CH2CH2CH31H核磁共振基础知识（八）第90页/共128页Chemicalshift(d,ppm)ClCH2CH2CH2CH2CH302040608010012014016018020013CCDCl3核磁共振基础知识（九）第91页/共128页CH3OHChemicalshift(d,ppm)020406080100120140160180200核磁共振基础知识（十）第92页/共128页Chemicalshift(d,ppm)020406080100120140160180200OCCCHCHCHCH2CH2CH2CH3CCH2CH2CH2CH3O核磁共振基础知识（十一）第93页/共128页941H-NMR在黄酮结构分析中的应用

A环质子B环质子C环质子糖上质子取代基团质子

芳环质子芳环质子与类型有关

端基质子

-OH、-CH3、其他质子-OCH3、-OCOCH3

黄酮类化合物各质子的信号特征（δ、峰形状、J、峰面积）符合芳环质子规律第94页/共128页95黄酮类化合物A、B环的取代模式A环取代模式B环取代模式第95页/共128页96黄酮类化合物1H-NMR谱6-Hδ5.7－6.9(d,J=2.5Hz)8-H

δ5.7－6.9(d,J=2.5Hz)6-H信号总比8-H高场H-6H-8黄酮、黄酮醇、异黄酮6.0-6.2,d6.3-6.5,d上述化合物7-O-糖苷6.2-6.4,d6.5-6.9,d二氢黄酮、二氢黄酮醇5.7-6.0,d5.9-6.1,d上述化合物7-O-糖苷5.9-6.1,d6.1-6.4,d5,7-二取代黄酮A环第96页/共128页975,7-二取代黄酮实例芹菜素第97页/共128页985-H7.9－8.2(d,J=9.0Hz)6-Hδ6.7－7.1(dd,J=9.0,2.5Hz)8-H

δ6.7－7.0(d,J=2.5Hz)黄酮、黄酮醇、异黄酮二氢黄酮、二氢黄酮醇H-57.9-8.2,d7.7-7.9,dH-66.7-7.1,dd6.4-6.5,ddH-86.7-7.0,d6.3-6.4,d7-取代黄酮A环黄酮类化合物1H-NMR谱第98页/共128页997-取代黄酮实例刺槐亭第99页/共128页100H-2’,6’H-3’,5’二氢黄酮类7.1-7.3,d6.5-7.1,d二氢黄酮醇类7.2-7.4,d异黄酮类7.2-7.5,d查耳酮类7.4-7.6,d橙酮类7.6-7.8,d黄酮类7.7-7.9,d黄酮醇类7.9-8.1,dB环质子形成H-2’,6’及H-3’,5’两组形成AA’BB’系统总体比A环质子低场H-2’,6’比H-3’,5’低场4’-取代黄酮B环黄酮类化合物1H-NMR谱第100页/共128页1014′-取代黄酮实例芹菜素第101页/共128页01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0Chemicalshift(d,ppm)OCH3HHHHClOCH3AA′BB′

取代模式第102页/共128页103H-2’H-6’黄酮类3’,4’-OH及3’-OH,4’-OMe7.2-7.3,d7.3-7.5,dd黄酮醇类3’,4’-OH及3’-OH,4’-OMe7.5-7.7,d7.6-7.9,dd黄酮醇类3’-OMe,4’-OH7.6-7.8,d7.4-7.6,dd黄酮醇类3’,4’-OH,3-O-糖7.2-7.5,d7.3-7.7,dd对于黄酮与黄酮醇H-5’作为一个二重峰(d,J=8.5Hz)出现在6.7-7.1处H-2’(d,J=2.5Hz)及H-6’(dd,J=8.5,2.5Hz)信号出现在7.2-7.9异黄酮、二氢黄酮及二氢异黄酮H-2’,5’,6’作为一个多重峰出现在6.7-7.13’,4’-取代黄酮B环黄酮类化合物1H-NMR谱第103页/共128页1043′,4′-取代黄酮实例木犀草素第104页/共128页105

若3'位和5'位取代基相同时，H-2',H-6'作为一个单峰，出现在δ6.50~7.50。若3'位和5'位取代基不相同时，H-2',H-6'将以不同的化学位移分别作为二重峰出现，J=2.0Hz。3’,4’,5’-取代黄酮B环黄酮类化合物1H-NMR谱第105页/共128页106刺槐亭3′,4′,5′-取代黄酮实例第106页/共128页107

H-3常作为一个尖锐的单峰信号出现在δ6.3处，常会与H-6或H-8相混，应注意区别H-2常作为单峰出现在较低场区

δ7.6-7.8(1H,s,CDCl3)

δ8.5-8.7(1H,s,DMSO-d6)C环黄酮及异黄酮黄酮类C环1H-NMR谱第107页/共128页108黄酮类C环1HNMR实例芹菜素黄酮第108页/共128页109黄酮类C环1HNMR实例奥洛波尔异黄酮第109页/共128页110黄酮类C环1HNMRH-2δ5.2(1H,dd,Jtrans=11.5,Jcis=5.0Hz)H-3δ2.8(1H,dd,J=17.0Hz,J=11.5Hz)(1H,dd,J=17.0Hz,J=5.0Hz)二氢黄酮第110页/共128页111黄酮类C环1HNMR实例甘草素二氢黄酮第111页/共128页112黄酮类C环1HNMR实例二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O糖苷H-24.8-5.0,d,J=11Hz5.0-5.6,d,J=11HzH-34.1-4.3,d,J=11Hz4.3-4.6,d,J=11Hz二氢黄酮醇第112页/共128页113黄酮类C环1HNMR实例二氢槲皮素二氢黄酮醇第113页/共128页114黄酮类C环1HNMRH-α6.5-6.7(1H,d,J=17.0Hz)H-