微生物培训详解演示文稿

微生物培训详解演示文稿当前1页，总共76页。（优选）微生物培训当前2页，总共76页。目录临床微生物检验在疾病诊疗中的作用微生物检验报告单解读当前3页，总共76页。临床微生物检验在疾病诊疗中的作用MAKERBIOTECHNOLOGY当前4页，总共76页。2012卫生部《管理办法》二级以上医院应当根据实际需要，建立符合实验室生物安全要求临床微生物室当前5页，总共76页。2013年《整治方案》配备感染专业医师、微生物检验专业技术人员和临床药师，并在抗菌药物临床应用中发挥重要作用，加强对感染专业医师、微生物检验专业技术人员和临床药师的培训，尤其是县级医院相关人员培训，不断提高相关人员专业技术水平。当前6页，总共76页。2013年《整治方案》明确规定标本送检率住院患者抗菌药物使用前微生物检验样本送检率不低于30%接受限制药物治疗住院患者用前，送检率不低于50%接受特殊药物治疗住院患者用前，送检率不低于80%当前7页，总共76页。2013年卫计委《抗菌药物专项整治方案》

提高标本质量、提高血液和无菌部位标本送检比例当前8页，总共76页。临床微生物检验在疾病诊疗中的作用准确的病原学诊断针对性病原学治疗有效预防医院感染正确标本采集和运送当前9页，总共76页。不合格标本带来的后果标本不合格结果不准确诊断错误治疗错误当前10页，总共76页。合格的标本

来自病变部位不受污染且新鲜未使用抗菌药物当前11页，总共76页。基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的当前12页，总共76页。标本采集MAKERBIOTECHNOLOGY当前13页，总共76页。

血培养的临床意义

感染性疾病预报：早期诊断细菌是否进入血液，防止全身性脓毒血症。感染性疾病诊治:为感染性疾病提供确诊的重要依据。为正确选用抗生素治疗提供依据。感染性疾病疗效观察：监测抗菌药物浓度和细菌杀死情况。当前14页，总共76页。

血培养血液标本采集

采集时机皮肤准备培养瓶消毒采血量

双瓶（需氧厌氧）采血套数（多部位）振摇及时送检血培养成功关键环节当前15页，总共76页。血培养指征当病人具有以下2条或以上的临床/实验室证据，可以定义为SIRS。体温：>38℃或<36℃；心率：>90/分；呼吸率>20/分或PaCO2<32mmHg;白细胞记数：>12，000/ul或<4000/ulBloodcultureM47

出现全身炎症反应综合症（SIRS)时，建议做血培养当前16页，总共76页。

采集时间通常在寒战和发烧前根据临床体征和实验室检则信息（PCT）在使用抗菌药物之前同时或间隔时间采集2套以上血培养标本当前17页，总共76页。消毒步骤当前18页，总共76页。消毒步骤当前19页，总共76页。静脉穿刺使用注射器抽取推荐的血量直接接种到培养瓶中,在培养瓶上标记接种体积.使用该方法,首先接种厌氧瓶,再接种需氧瓶。避免注射器头部氧气的污染当前20页，总共76页。静脉穿刺使用蝶形针采集带针的适配器首先插入需氧瓶.碟形针中的氧气进入需氧瓶采集时垂直放瓶.培养瓶中的真空压力使血液自动流入培养瓶.（病人心脏位置应高于培养瓶）采集前的采集量标记保证了推荐采集量的获得.需氧瓶完成后移动该适配器插入厌氧瓶内继续采集.当前21页，总共76页。

血培养的采集采集外周静脉血液，不建议采动脉血，静脉留置导管内血液。（如果必须从留置导管内采血液，也要同时采集外周静脉血液）当前22页，总共76页。血培养标本采集当前23页，总共76页。婴幼儿患者，采血量不超过患者总血量的1％在此前提下，增加采血量也会增加阳性率当前24页，总共76页。一次静脉采血培养一份检出率：65%二份检出率：80%三份检出率：96%一份血培养定义：同一穿刺所获得的血液接种到2瓶或以上的血培养瓶。

血培养的数量当前25页，总共76页。送检和保存当前26页，总共76页。注意事项严格执行消毒程序保证足够的采血量当前27页，总共76页。脑脊液标本采集采集指针成人：发热、头痛、恶心、呕吐、颈强直和反射增强等症状，怀疑为脑膜炎的患者。儿童：因儿童和新生儿的临床表现不明确，因此对于婴儿不明原因发热，应怀疑为脑膜炎，采取脑脊液。作脑脊液培养的患者，建议同时做血培养。当前28页，总共76页。脑脊液标本采集无菌操作，腰椎穿刺采样最少1mL，最好>5mL分枝杆菌培养标本需要2mL以上，当前29页，总共76页。脑脊液标本采集打入3个小管中，以第二根小管送检培养当前30页，总共76页。脑脊液标本采集即时送检，绝对不能冷藏！常温下15分钟内送到实验室。脑脊液标本不可放冰箱保存，会使一些细菌死去（如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和嗜血杆菌）。常温下可存放24小时。当前31页，总共76页。上呼吸道标本采集采集指针病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养。细菌性咽－扁桃体炎：明显咽痛、畏寒、发热，体温可达39℃以上。上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管－支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。当前32页，总共76页。上呼吸道标本的采集嘱患者用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，拭子要避免接触口腔和舌粘膜。当前33页，总共76页。注意事项采集时避免触碰舌头和面颊采集后立即送检当前34页，总共76页。下呼吸道标本采集采集指针咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。咯血：肺结核病人常痰中带血。呼吸困难发热胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸痛。肺部感染的患者有25～50％可能发生菌血症，应同时作血培养当前35页，总共76页。下呼吸道标本采集采集方法自然咳痰法：先用清水或漱口液反复漱口，然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可采用3—5%

NaCl5ml雾吸约5min导痰，使痰液易于排出。咳痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽。气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。当前36页，总共76页。下呼吸道标本采集采集方法胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。气管穿刺法：用于昏迷患者小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。当前37页，总共76页。注意事项以晨痰为好。易于采集、含有的病理成分较多，增加培养的阳性率。立即送检，做结核分支杆菌和真菌培养的标本如不能及时送检，可放4℃保存，以免杂菌生长当前38页，总共76页。尿标本采集采集指针有典型的尿路感染症状；肉眼脓尿或血尿；尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性；不明原因的发热，无其他局部症状；留置导尿管的病人出现发热；膀胱排空功能受损；泌尿系统疾病手术前。当前39页，总共76页。清洁中段尿嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排去，接取中段尿约10ml于无菌容器中，立即送检，于1小时内接种该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。当前40页，总共76页。耻骨上膀胱穿刺使用无菌注射器直接在耻骨联合距脐1/3处穿刺入膀胱吸取尿液。此方法是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。当前41页，总共76页。直接导尿按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。此法可减少尿液标本的污染，准确地反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。当前42页，总共76页。

留置导尿管收集尿液利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液，操作时应防止混入消毒剂，不能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者，应在更换新尿管时留取尿标本当前43页，总共76页。注意事项采集晨起第一次尿液立即送检，不能及时送检需冷藏，超过4小时，重新送检当前44页，总共76页。男性生殖道标本采集如疑为急性淋病奈瑟菌或其他化脓性细菌感染，应在清洗龟头部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒剂消毒，挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取。立即送检，或以专用的细拭子插入尿道口2～4cm，旋转采取。

如疑为前列腺炎、精囊炎或慢性淋病奈瑟菌感染应由医师按摩前列腺，以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。当前45页，总共76页。女性生殖道标本采集成年妇女自宫颈采取标本，应在扩阴器的支持下，选取有炎症或分泌物部位，先以无菌棉拭子拭去表浅层分泌物，再用另一拭子取分泌物送检。如做厌氧或真菌培养应另外采取标本。如未成年幼女疑患性传播疾病时，不应使用扩阴器，应以无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检。当前46页，总共76页。注意事项任何不能及时送检的生殖道标本，都应采用运送培养基采样保存。禁止冷藏当前47页，总共76页。大便标本采集自然排便采集法：自然排便后，调取有脓血粘液部位的粪便2～3g，液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内或置于保存液或增菌液中送检。直肠拭子法：如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可采用直肠拭子方法采集，用长无菌棉签蘸生理盐水，由肛门插入6-7cm，顺一个方向轻轻旋转后取出，将棉签插入培养试管内，盖紧送检。当前48页，总共76页。注意事项应在急性期采样，以提高检出率，最好在用药前。送检：应立即送检，如不能立即送检，放入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油（0.033mol/LPBS与等体积的甘油混合）中运送和保存。当前49页，总共76页。脓、吸取物或组织标本开放性感染和已溃破的化脓灶：先用灭菌生理盐水冲洗表面的污染菌，用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。注意尽量取化脓组织与正常组织交界处的脓汁，因为脓汁中心的细菌大部分已死亡，交接处的活菌较多，会提高阳性率。对于慢性感染，因污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织，研磨成组织匀浆接种于培养基。闭锁性脓肿：一般采用穿刺或手术引流的方法采取.采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤。当前50页，总共76页。注意事项立即送检。如不能送检，应放4℃保存。培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌的标本除外当前51页，总共76页。

微生物报告单解读MAKERBIOTECHNOLOGY当前52页，总共76页。从报告中了解什么了解报告的细菌是什么类型和性质的细菌药敏试验报告中MIC、S、R、I是什么意思怎样选药敏试验结果中最有效地抗菌药物根据药敏结果如何判断常见的多重耐药菌当前53页，总共76页。细菌分类当前54页，总共76页。47/74肺部细菌性感染病原诊断确定意义①血或胸液培养到病原菌②纤支镜或人工气道吸引标本：>105cfu/ml（2+）

BALF（支气管肺泡灌洗液）

有意义肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌当前55页，总共76页。48/74肺部细菌性感染病原诊断无意义①痰培养到上呼吸道正常菌 草链、表葡、非致病奈瑟菌、类白喉杆菌等②多种病原菌少量(<+++)生长摘自胡必杰教授当前56页，总共76页。尿培养阳性结果的解读正常尿液是无菌的，但膀胱的尿液经尿道排出可受到尿道正常菌群的污染尿培养应同时做菌落计数才有意义革兰阴性菌>105CFU/ml，革兰阳性菌>104CFU/ml，念珠菌>103cfu/mL

49/74当前57页，总共76页。病例一男,98岁,入院诊断：AECOPD肺炎？发烧：39.4度X光检查:右下肺肺炎WBC:17800/m3中性粒细胞88%病例来源于北京医院当前58页，总共76页。经验用药及培养结果亚胺培南,替考拉宁,氟康唑。用药24h后症状无改变痰培养:铜绿假单孢菌++、鲍曼不动杆菌+肺泡灌洗液培养：铜绿假单孢菌入院3h送4瓶血培养：6h培养系统提示阳性涂片为革兰阴性杆菌入院24h血培养初步药敏报告：亚胺培南:R头孢他定:R环丙沙星:R派拉西林/三唑巴坦:R头孢派铜/舒巴坦:I当前59页，总共76页。入院24小时后改变治疗头孢派铜/舒巴坦代替亚胺培南.入院后第三天正式鉴定和药敏报告:铜绿假单孢菌：亚胺培南：R美罗培南：R头孢他定：R派拉西林/三唑巴坦：R环丙沙星：R头孢派铜/舒巴坦：I氨曲南：S丁胺卡那：R专家系统提示：可能是产金属酶的细菌，对碳氢酶烯类天然耐药，氨曲南可逃离金属酶的水解。当前60页，总共76页。48小时改变治疗48h改变治疗为氨曲南+妥布霉素56h症状明显改善2天后痊愈出院小结：立即送检病人标本，查找病原菌马上开始经验用药根据初步药敏结果调整用药根据最终结果再次调整用药，病人痊愈当前61页，总共76页。进行药敏试验的意义药敏试验：是使用体外试验的方法检测细菌菌的耐药性，预测抗菌药物的临床治疗效果，在药物种类的选择上为临床医生提供帮助，以实施个体化治疗。意义在于：第一，可预测抗菌治疗效果，即药敏试验结果为“敏感”时，治疗可能有效；反之，实验结果为“耐药”,治疗肯定失败；第二，指导临床医生选择使用抗菌素，报告药敏测试的结果往往在给予病人经验性治疗24-48小时之后，若结果为“敏感”，则该治疗有效，若结果为“耐药”则应立即更换药物；第三，提供选择药物的依据。第四，进行细菌耐药性监测。当前62页，总共76页。/7450/73药敏结果的解读当前63页，总共76页。报告单符号解释MIC：最小抑菌浓度(minimalinhibitoryconcentration，MIC）：是指在体外试验中，抗菌药物能抑制培养基中细菌生长的最低药物浓度。是抗菌药抗菌活性指标，显示出药物抑制病原微生物的能力当前64页，总共76页。报告单符号解释当前65页，总共76页。细菌耐药性细菌耐药性：是细菌抵抗抗菌药物杀菌、抑菌作用的一种防御能力，一种生物学的表型。天然耐药（固有耐药）：耐药性为某种细菌固有的特点称细菌的天然或固有耐药性。天然耐药非常稳定，据此就可预测某一细菌或可能存在的细菌对某种抗生素是否耐药。获得性耐药：细菌获得耐药基因，原来敏感的细菌变为耐药称细菌的获得性耐药。当前66页，总共76页。抗生素等效性抗生素的等效性：是指用一种相关抗生素的试验结果预测同类抗生素体内抗菌活性。如头孢噻吩与其他一代头孢具有等效性，可用头孢噻吩结果预测其他一代头孢。此特性允许检测少数几种抗生素而不影响临床对其他抗生素的广泛选择。当前67页，总共76页。报告单种类肠杆菌科假单胞菌相关菌葡萄球菌属肠球菌属当前68页，总共76页。肠杆科细菌如大肠埃希菌、肠杆菌属、肺炎克雷伯菌、枸橼酸杆菌属等结果判定：根据头孢类、氨基糖苷类、头霉素类结果进行判断头孢一代：头孢噻吩头孢二代：头孢呋辛头孢三代：头孢噻肟、头孢他啶头孢四代：头孢吡肟头霉素类：头孢西丁青霉素类：阿莫西林、哌拉西林、替卡西林β-内酰胺类/β-内酰胺类酶抑制剂：阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦碳氢酶烯类：亚胺培南、美洛培南氨基糖苷类：阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星二代喹诺酮：环丙沙星